Biofarmaceutické zpracování v downstreamu

Molekula, která vás zajímá, může být buď vyloučena, nebo se může hromadit v buňkách. Když k tomu dojde, musí být buňky nejprve narušeny, musí být zabráněno degradaci a nečistoty odděleny od molekuly, která je předmětem zájmu.

Centrifugace a mikrofiltrace jsou optimální metody pro oddělení molekuly od buňky a pouze supernatant může být shromažďován pro další čištění.

Měření tlaku, průtoku , akumulace částic,  distribuce velikosti , pH nebo zákalu článků vstupujících do filtrů i z nich v reálném čase může poskytnout zpětnou vazbu a minimalizovat tak narušení procesu.

Viry jsou inaktivovány a stávají se nepatogenními. In-line spektroskopie, zákal, monitorování pH a kontrola zaručují konzistenci v průběhu celého procesu.

Cílový produkt je izolován a koncentrovánchromatografií.

Zatímco protilátky jsou zachycovány afinitní chromatografií za použití pryskyřic s proteinem A, proteinem G nebo jinými selektivně navrženými metodami, oligonukleotidy a neproteinové molekuly jsou často zachycovány iontovou výměnnou chromatografií, polysacharidy a komplexním glykanem hydrofobní interakcí nebo chromatografií IMAC.

Mezi běžná měření patří tlak, průtok, pH, infračervená spektroskopie s Fourierovou transformací (FTIR),UV-Vis a vodivost před chromatografickou kolonou pro sledování proměnlivých vstupů a poskytování informací o kvalitě a výkonu kolony.  

V kroku čištění jsou zbytkové nečistoty (jako jsou proteiny, nukleové kyseliny, endotoxiny atd.) odstraněny prostřednictvím sledu jednotkových operací – čiření, extrakce, chromatografie, filtrace tangenciálního toku – zatímco produkt je zadržen v maximální možné míře a je dále koncentrován pomocí filtrace tangenciálního toku (TFF) prostřednictvím ultra/diafiltrace (UF/DF).

Cílem je zvýšit čistotu bez ztráty výtěžnosti. Monitorování průtoku, tlaku, vodivosti, pH, zákalu a hmotnosti výtěžku během přípravy a čištění pufru zajišťuje spolehlivost v průběhu celého procesu.

Viry jsou inaktivovány a učiněny nepatogenními, aby byla zajištěna bezpečnost bioterapeutik změnou prostředí roztoku (snížením pH nebo přidáním rozpouštědel/detergentů). In-line spektroskopie, monitorování zákalu, pH a ORP a kontrola zaručují konzistenci v celém procesu.

Leštěním se dosahuje konečné čistoty.

Vědci používají vylučovací chromatografii afiltraci tangenciálního toku k odstranění stopových nečistot – virových částic, bakteriálních patogenů a endotoxinů – a výměně purifikačního pufru za formulační.

Zatímco FTIR spektroskopie může pomoci kvantifikovat a specifikovat složky frakcí během leštění chromatografií, monitorováním tlaku, průtoku, vodivosti, pH a zákalu v průběhu všech operací leštící jednotky – včetně přípravy pufru, závazku k bezpečnosti a kvalitě produktu.