Rainin Good Pipetting Practice från METTLER TOLEDO är en praktisk, vetenskapsbaserad metod för att hjälpa forskare att förbättra och förbättra noggrannheten och effektiviteten i sina experiment. Från utvärdering av arbetsflöden och val av instrument till teknik, ergonomi och instrumentkvalificering hjälper GPP laboratorier att förbättra experimentell reproducerbarhet med utbildning i vätskehantering och tekniska resurser och supportresurser.
GPP täcker många ämnen inom pipetteringsteknik som är relevanta för forskare inom biovetenskap eller alla som använder pipetter regelbundet:
Vårt system med utbildning och resurser hjälper bänkforskare att förstå nyanserna i vätskehantering och de verktyg, tekniker och alternativ som sparar tid, minskar avfallet och uppnår mer reproducerbara resultat.
Vi håller utbildningar i kort- och långformat i ditt labb med hela ditt team och kan till och med mäta varje användares pipetteringsförmåga före och efter träningen.
"Föreläsningen om det säkra pipetteringsområdet gav oss nya insikter som vi inte kände till tidigare, och som vi nu vill införliva i vårt dagliga arbete."
– Till en början var deltagarna skeptiska till om det behövdes en praktisk del. Men i efterhand kunde man ändå upptäcka specifika brister i pipetteringen som inte var kända tidigare, vilket gjorde feedbacken ännu mer positiv."
"GPP-seminariet hjälper oss att utbilda våra anställda och hålla dem uppdaterade med den senaste pipetteringstekniken."
"Deltagaren ville ta reda på hur man kan upprätthålla konsekventa resultat i hela sin slutanvändargrupp genom att pipettera en lösning med suspenderade celler. Det var viktigt att hålla cellerna ordentligt blandade i lösningen innan de överfördes. Efter mycket diskussion kom vi alla överens om att det var bäst att använda spetsar med låg retention för att minska provretentionen och blanda lösningen några gånger innan man tar arbetsalikvoten från röret till plattan."
"De nya medarbetarna som kom in i företaget hade utbildats på olika nivåer i det akademiska labbet, så de hade alla olika nivåer av erfarenhet av pipettering. Det här seminariet var nyttigt.
Grattis till att du har genomfört ett av våra GPP-seminarier. Det går snabbt att beställa ditt intyg om slutförande. Klicka bara på den här länken och ange din seminariekod.
När du beställer ditt kostnadsfria färdigställandeintyg planterar vi ett träd genom våra partners på One Tree Planted.
.png/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.png "bra pipetteringspraxis från Rainin")
Att stretcha under dagen hjälper till att förhindra trötthet och smärta som kan påverka experimentella resultat. Skaffa affischen och förbättra pipetteringsergonomin i ditt labb. Läs mer
Vår affisch Bench Posture täcker alla ämnen om rätt hållning för att förebygga kroniska muskel- och skelettsjukdomar för dem som arbetar i labbet. Läs mer
Särskilda tekniker för dekontaminering av pipetter med specifika rengöringsmedel för olika provtyper. Läs mer
Säker pipettering av viskösa, högt ångtryck, skumning och andra typer av utmanande vätskor som inkluderar instruktioner för omvänd pipettering. Läs mer
Hur du pipetterar har en direkt inverkan på hur framgångsrika och repeterbara dina experiment blir. Använd dessa bra tips för pipettering för att förbättra din pipetteringsnoggrannhet. Läs mer
Den här affischen illustrerar snabba handsträckningar för att öka ditt fingerrörelseomfång och stärka din pipetteringstumme. Läs mer
Quick Check-affischen förklarar i tio enkla steg hur vem som helst i labbet kan kontrollera prestandan hos sina pipetter. Läs mer
Med Good Pipetting Practice erbjuder METTLER TOLEDO ett brett utbud av utbildning och resurser för att hjälpa bänkforskare, laboratoriechefer och kvalitets- och säkerhetspersonal att uppnå mer tillförlitliga och repeterbara experimentella resultat samtidigt som organisationens totala risk sänks.
Utvärdering och urval
Minimera dina risker och förbättra robustheten i dina pipetteringsarbetsflöden med hjälp av vår riskbaserade metod för att utvärdera protokoll och välja rätt instrument och förbrukningsartiklar.
Teknikträning
Hjälp teamen att förbättra sina färdigheter och reproducerbarheten av sina experiment genom att fokusera på hur användarna påverkar pipetteringsnoggrannheten och experimentresultaten.
Ergonomi
En bra ergonomi i bänken förbättrar teamets hälsa och välbefinnande samtidigt som den förbättrar den experimentella reproducerbarheten och minskar risken för repetitiva belastningsskador.
Kalibrering och rutindrift
Behoven av kvalitetssäkring varierar kraftigt mellan laboratorier och organisationer. Miljöanpassad offentlig upphandling kan hjälpa dig att hitta rätt balans mellan kvalitet, säkerhet, efterlevnad och kostnad.
Detta whitepaper diskuterar hur en framgångsrik vätskehanteringsstrategi är en kritisk framgångsfaktor för små och nystartade life science-företag som försöker uppfylla time-to-market-målen. Läs mer
Vår Rainin-guide till pipettering hjälper dig att uppnå exakta, reproducerbara resultat genom välgrundade val av pipett- och spetsval och korrekt teknik. Läs mer
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Whitepaper om ergonomi vid pipettering")
Högre pipetteringskrafter och långa timmar av pipettering är förknippade med utveckling av repetitiva stressskador (RSI). Följande rekommendationer som finns i detta vitbok om ergonomi kommer att hjälpa forskare att minimera risken för att utveckla dessa tillstånd. Läs mer
Improve pipetting accuracy by understanding basic concepts behind pipetting errors and uncertainty. Learn how pipetting accuracy can improve pipetting results. Läs mer
Detta white paper ger en överblick över vanliga typer av pipetter och ger värdefulla tips om hur du får ut det bästa av din pipett, beroende på hur du arbetar. Läs mer
Pipettkalibrering och tekniker är viktiga för att hålla pipetterna väl underhållna och maximera prestandan i labbet. Läs mer
Det här dokumentet är skrivet för alla som har en roll i att skapa ett säkert laboratorium – anställda, chefer och andra strategiska partners. Läs mer
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Bra pipetteringspraxis")
I Vätskehantering för cellodling, ett white paper, förklaras vilka olika celltyper som kan odlas och vilka forskningsområden och verktyg som varje typ är mest lämplig för. Läs mer
De flesta forskare rapporterar att de har misslyckats med att reproducera experiment. Ladda ner vårt nya white paper för att ta reda på vad som driver den och tips för att säkerställa att den inte beror på felaktig vätskehantering. Läs mer
Noggrann pipettering kräver att man behärskar några grundläggande tekniker. Dessa inkluderar:
De flesta biovetenskapliga tillämpningar inkluderar kritiska vätskehanteringssteg där pipetterad volym direkt påverkar resultatet. Om pipetteringen inte är konsekvent och korrekt kan tid, pengar och material gå till spillo. Noggrann pipettering utgör grunden för reproducerbart arbete, vilket är avgörande för att generera meningsfulla data.
Det första steget mot att förbättra pipetteringsnoggrannheten är att välja rätt typ av pipett och rätt volymintervall. När det gäller storlek väljer du den pipett med lägst volym som passar den volym du pipetterar. Om du till exempel pipetterar 2 μL och har en 5 μL pipett och en 20 μL pipett, får du bättre noggrannhet med 5 μL.
Ta en titt på det här faktabladet om val av pipett för att förstå vilken pipett som fungerar bäst för vätskan och andra faktorer som är unika för din situation: Välja rätt pipett
När du har rätt instrument, omsätt din goda pipetteringsteknik i praktiken. Ställ in ett rutinmässigt testschema för att maximera förtroendet för dina resultat över tid, och, som med alla precisionsinstrument, se till att införa en regelbunden, expertservice och kalibreringsregim.
Det enklaste sättet att snabbt testa en pipetts noggrannhet kan vara Rainin SmartCheck. Läs mer på mt.com/SmartCheck
Att välja rätt pipett innebär att utvärdera dina krav. Först, vilken typ av prover pipetterar du? Är de vattenhaltiga? Eller är de trögflytande, flyktiga, skummande, frätande eller farliga? För vattenhaltiga och nästan vattenhaltiga vätskor är de vanligaste luftförskjutningspipetterna (även kallade "luftkudde"-pipetter) ett bra val. För viskösa, flyktiga och andra ovanliga vätsketyper skulle en pipett med positiv förskjutning vara ett bättre val för både noggrannhet och säkerhet.
Vilken volym kommer du att pipettera? Hur många prover behöver du överföra från ett fartyg till ett annat? Kolla in detta white paper om pipettval för att förstå vilken pipett som fungerar bäst beroende på vätskan och andra faktorer som är unika för din situation.
Att pipettera minsta möjliga volymer involverar specialiserade instrument och tekniker. En repeaterpipett kan vara ditt bästa val för att upprepa volymer ner till 100 nL. En annan pipett kan också fungera för bara några få dispenseringar. Se till att använda den minsta pipetten som rymmer den volym du vill pipettera.
Vid mycket låga volymer har pipetteringstekniken en proportionellt större inverkan på noggrannhet och reproducerbarhet. Nedsänkningsdjup, pipetteringsvinkel och aspirationshastighet är viktiga att kontrollera. Affischen Pipetting Techniques från Rainin kan vara till hjälp.
Rainin NanoRep upprepar-doserar alikvoter ner till 100 nL. Läs mer här: mt.com/NanoRep
Den viktigaste faktorn för exakt, reproducerbar flerkanalspipettering är integriteten hos tätningen för varje kanal i pipetten. Det betyder att varje spets passar perfekt på varje axel med noll luftläckage. Olika tillverkare uppnår detta på olika sätt, med varierande ergonomisk lätthet och tätningskonsistens. LTS LiteTouch System-pipettspetsar från Rainin kräver minst kraft för att ladda och mata ut från flera kanaler, och de tätar konsekvent varje gång.
Klicka här för att se Rainins breda sortiment av flerkanalspipetter.
När du aspirerar, håll en pipett så nära vertikalt som möjligt och undvik vinklar som är större än 20° från Y-axeln. När du dispenserar, om du rör vid väggen på målkärlet för att helt dra ut all vätska från spetsen, är det OK att överskrida 20° vinkeln.
Framåtpipettering är standardtekniken för pipettering och det bästa valet för vattenhaltiga prover. För viskösa och flyktiga prover ger omvänd pipettering bättre noggrannhet.
För att vidarebefordra pipetten, tryck ner kolven till första stoppet samtidigt som du håller pipetten utanför vätskan. Sänk sedan ner spetsen 2-10 mm djupt i vätskan du arbetar med – inte djupare. Släpp kolven långsamt till full förlängning för att aspirera hela vätskevolymen. För att dosera i ditt målkärl, flytta pipetten in i kärlet och tryck sedan på kolven med en jämn hastighet genom det första stoppet hela vägen till det andra stoppet – så långt som kolven går. Med kolven helt intryckt, dra lätt spetsen på pipetten upp längs kärlets vägg för att "röra av". Detta hjälper till att helt fördela hela vätskevolymen. Släpp kolven, mata ut pipettspetsen, ladda en ny pipettspets och upprepa.
För att vända pipetten, tryck kolven hela vägen ner genom det första stoppet till det andra stoppet – så långt som kolven går. Sänk sedan ner spetsen i vätska och släpp långsamt och jämnt kolven för att suga. Flytta till det mottagande kärlet och tryck ENDAST PÅ KOLVEN TILL DET FÖRSTA STOPPET för att dosera rätt volym. En liten restvolym kommer att finnas kvar i pipettspetsen. Flytta pipetten över ett kasserat dispenseringskärl och tryck kolven resten av vägen ner till det andra stoppet, även kallat "blowout"-stoppet, för att släppa ut eventuell kvarvarande vätska.
Släpp kolven, mata ut pipettspetsen, ladda en ny pipettspets och upprepa.
En luftförskjutningspipett kan användas för att pipettera lätt viskösa vätskor, inklusive blod. För att uppnå maximal noggrannhet, använd den omvända pipetteringstekniken som beskrivs ovan. För mer viskösa vätskor, såsom 85 % glycerol eller Triton X-100, ger en pipett med positiv förskjutning den bästa noggrannheten och konsistensen.
Lätt flyktiga vätskor som etanol kan pipetteras med en luftförskjutningspipett med hjälp av den ovan nämnda tekniken för omvänd pipettering. Pipetter med positiv förskjutning är dock ett bättre val för flyktiga vätskor.
Om du använder en pipett med luftförskjutning, förskölj pipettspetsen (aspirera och dispensera) minst fem gånger innan du pipetterar volymen. Detta gör att luften inuti pipetten kommer i jämvikt, vilket bromsar vätskans avdunstningshastighet. Snabb avdunstning av flyktiga vätskor expanderar luften inuti en pipett och tvingar vätska från spetsen utan att något tryck läggs på kolven, och detta minskar den exakta volymleveransen.
Flyktiga vätskor som acetonitril hanteras i allmänhet bättre med en pipett med positiv förskjutning.
Ja, pipettering med luftförskjutningspipetter kan skapa aerosoler. Aerosoler kan stiga upp i pipettens inre och förorena innerväggarna och kolven. Aerosolisering sker lättare när kolven släpps för snabbt under aspiration och kan också ske i motsatt riktning utanför pipetten med alltför snabb dispensering.
För att minimera aerosoler, aspirera och dosera långsamt och jämnt. Använd filtrerade tips.
Pipetter med positiv förskjutning använder sprutliknande spetsar som förhindrar aerosolisering. En pipett med positiv förskjutning är det bästa valet för pipettering av farliga vätskor och alla vätskor med förhöjd viskositet eller flyktighet.
Mycket kalla eller varma vätskor ändrar lufttrycket i luftförträngningspipetter, vilket leder till felaktig pipettering.
Pipetter med positiv förskjutning, med sprutliknande spetsar som inte har någon luftficka mellan vätska och kolv, påverkas inte av olika temperaturer på vätskor. Pipetter med positiv förskjutning ger exakta resultat med vätskor som inte har rumstemperatur.
Om du måste pipettera en mycket varm eller kall vätska med en pipett med luftförskjutning, skölj inte pipettspetsen i förväg – detta är vanligtvis den bästa metoden för högsta noggrannhet. Aspirera och dosera istället snabbt för att minimera effekten av vätskans temperatur på pipettens inre luftgap.
För att undvika bubblor och skumbildning vid pipettering, sänk inte ner spetsen mer än 10 mm i vätskebehållaren och aspirera långsamt.
Omvänd pipettering ger extra skydd eftersom du, innan du suger, trycker ned kolven helt till det 2:a stoppet, så det finns ingen risk för att luft injiceras i vätskeprovet. Mer information om omvänd pipettering finns på den här sidan.
En pipett med positiv förskjutning skapar inte bubblor eller skum när den interagerar med vätska eftersom dess sprutliknande spets inte presenterar luft för vätskan att interagera med.
Dekontaminera en pipett genom att torka av den med en våt trasa och ett rengöringsmedel som isopropanol eller en 10% blekmedelslösning. Undvik mikrometerns genomskinliga plastfönster.
Autoklavering kan vara ett annat alternativ, men kontrollera pipettens instrumentspecifikationer. Om den är autoklaverbar, är hela instrumentet autoklaverat eller bara den flytande änden? Ofta kan endast den flytande änden autoklaveras.
Om du vill veta mer om hur du rengör en pipett kan du skaffa affischen Rengöra en pipett .
Kalibrering är den kontrollerade och dokumenterade mätningen av en pipetts systematiska felfrekvens (noggrannhet) och slumpmässiga felfrekvens (precision). I många laboratoriemiljöer måste pipettens prestanda regelbundet testas och dokumenteras enligt lag under specifika förhållanden som är certifierade av ett ackrediterat organ.
ISO-certifierade leverantörer kalibrerar pipetter i en kontrollerad miljö. Resultaten dokumenteras på ett säkert sätt på ett kalibreringscertifikat, vilket bidrar till en revisionsklar prestandahistorik för varje instrument. När justeringar är nödvändiga tillhandahåller ISO-certifierade kalibreringslaboratorier expertservice med delar och smörjmedel som rekommenderas av tillverkaren.
Rainin och METTLER TOLEDO är världens största serviceorganisation för pipetter med snabb hantering från postservice och service på plats. Servicelaboratorier är ISO 17025-certifierade och procedurerna följer 2022 års uppdatering till ISO 8655.
Pipettens noggrannhet – eller riktighet, som det kallas nu – är skillnaden mellan medelvolymen av alla mätningar (4–10 mätningar) och den inställda volymen.
Precision är standardavvikelsen för alla mätningar som utförs. Hur långt ifrån varje läsning är de andra?
En pipetts osäkerhet är den kvantitativa termen för dess totala noggrannhet. Det är en kombination av riktighet (ett mått på systematiskt fel) och precision (ett mått på slumpmässiga fel).
Ekvationen för osäkerhet är:
Osäkerhet = Systematiskt fel + Slumpmässigt fel * k. k (täckningsfaktor eller Z-poäng) beror på antalet mätningar. k=3,31 för fyra mätningar och 2 för tio mätningar.
Förvara pipetter vertikalt, hängande från en hylla eller pipettställ. Håll pipetterna rena och fria från föroreningar. Håll pipettspetsställen stängda.