Mikropipety

Mikropipety používame na presný prenos malých objemov kvapaliny z jednej nádoby do druhej. Pomocou mikropipety napríklad presúvame kvapalinu z kultivačnej banky do jednotlivých jamiek v mikrojamkovej doštičke. Mikropipety sa používajú v environmentálnych vedách, chémii, farmaceutickom vývoji, forenzných vedách, biologických laboratóriách a mnohých ďalších oblastiach.

Mnohé mikropipety majú vzhľadom na presnosť veľmi dobrú špecifikáciu. Tieto prístroje majú potenciál podávať objemy s veľmi nízkou systematickou a náhodnou chybou. Avšak technika používateľa mikropipety môže výrazne ovplyvniť presnosť. Správne nastavenie objemu, predbežné prepláchnutie pipetovej špičky a hĺbka ponorenia špičky, ako aj vertikalita a rytmus pipetovania môžu ovplyvniť reprodukovateľnosť.  

Mikropipety sú presné prístroje, ktoré sa v laboratóriu často intenzívne používajú, takže okrem správnych špecifikácií a správnych techník sa aj najpresnejšia mikropipeta pravidelne kalibruje. Intervaly údržby zvyčajne odrážajú intenzitu používania mikropipety.

Na použitie mikropipety najskôr nastavte a uzamknite objem. Potom spustite dávkovaciu hlavu mikropipety do čistej, prázdnej pipetovej špičky. Presvedčte sa, či je špička pipety bezpečne pripevnená k mikropipete, aby sa zabezpečilo vzduchotesné spojenie. Po nasadení na manuálnu mikropipetu stlačte piest až po prvú zarážku. Pri elektronických modeloch je mikropipeta pripravená na nasávanie po nastavení objemu a nasadení špičky .  

Držte mikropipetu vertikálne, ponorte špičku do kvapaliny v správnej hĺbke pre veľkosť špičky. Príliš hlboké ponorenie špičky zvyšuje tlak a môže špičku preplniť. Pri príliš plytkom ponorení vzniká riziko nasatia vzduchu.  

V prípade manuálnej mikropipety pomaly uvoľnite tlak na piest, čím nasajete nastavený objem kvapaliny. V prípade elektronickej verzie stlačte tlačidlo na nasávanie.

Keď sa v špičke nachádza kvapalina, presuňte mikropipetu nad cieľovú nádobu. Pri manuálnych mikropipetách stlačte piest až po prvú zarážku, čím kvapalinu nadávkujete. Na elektronickej mikropipete jednoducho stlačte tlačidlo na dávkovanie.  

Nakoniec na odstránenie zvyšnej kvapaliny premiestnite mikropipetu nad želanú nádobu na odpad a v prípade manuálnych mikropipiet stlačte piest po druhú „vyfukovaciu“ zarážku. Na elektronických mikropipetách použite tlačidlo na vyfúknutie prípadných zvyškov kvapaliny.

Ak chcete minimalizovať riziko chýb pri práci s mikropipetou, začnite vytvorením kompletného systému mikropipety a špičky, aby ste zabezpečili riadne vzduchotesné spojenie.  

Počas práce držte mikropipetu v čo najzvislejšej polohe. Pri manuálnych mikropipetách nastavte objem na mikrometri mierne nad cieľový objem. Potom ho znížte na požadovanú hodnotu. Každú novú špičku pri nasadení vopred prepláchnite, aby ste optimalizovali podmienky v špičke pre vysoko presné pipetovanie. Pri nasávaní a dávkovaní udržujte svoju rýchlosť konzistentnú a počas kroku protokolu zachovávajte rytmus.  

Dávkovanie pod hladinou cieľovej kvapaliny, keď je to možné, alebo vypnutie dotykom – utretie špičky na vnútornej stene nádoby pri dokončovaní dávkovania – sú dva spôsoby na maximalizovanie presnosti objemu, ktorý dávkujete.

Rôzni ľudia označujú rovnaké typy nástrojov oboma spôsobmi: niektorí ich nazývajú pipety a iní ich nazývajú mikropipety. Všeobecné použitie spojilo tieto pojmy, ktoré označujú tie isté nástroje, aj keď mikropipety je možné užšie definovať ako nástroje schopné vstrekovať kvapalinu priamo do buniek. Pipety, širší pojem, zahŕňajú nástroje od očných kvapkadiel a ústnych skúmaviek až po sérologické pipety a vysokovýkonné pipetovacie systémy.

Mikropipety sú pipety, ktoré dokážu merať a dávkovať kvapalné roztoky v rozsahu objemu od 1 μl do 1 000 μl. Bežne sa používajú v rámci výskumu v biologických odboroch, kde sa vyžaduje presné meranie a dávkovanie roztokov.