Biofarmaceutiske produkter Downstream-behandling

Molekylet af interesse kan enten udskilles eller kan ophobes i cellerne. Når dette sker, skal cellerne først forstyrres, nedbrydning forhindres og urenheder adskilles fra molekylet af interesse.

Centrifugering og mikrofiltrering er optimale metoder til at adskille molekylet fra cellen, og kun supernatanten kan opsamles til yderligere oprensning.

Realtidsmåling af tryk, flow, partikelakkumulering , størrelsesfordeling, pH eller turbiditet af celler, der både føres ind og ud af filtre, kan give feedbackkontrol for at minimere procesforstyrrelser.

In-line  spektroskopi, turbiditet, pH-overvågning og kontrol garanterer ensartethed gennem hele processen.

Målproduktet isoleres og koncentreres ved kromatografi.

Mens antistoffer fanges ved affinitetskromatografi ved hjælp af harpikser med protein A, protein G eller andre selektivt konstruerede metoder, fanges oligonukleotider og ikke-proteinmolekyler ofte ved ionbytterkromatografi , polysaccharider og kompleks glykan ved hydrofob interaktion eller IMAC-kromatografi.

Almindelige målinger omfatter tryk, flow, pH, Fouriertransform infrarød (FTIR) spektroskopi, UV-Vis og ledningsevne før kromatografikolonnen for at overvåge variable tilførselsindgange og give information om kolonnens kvalitet og ydeevne. 

Med rensningstrinnet fjernes de resterende urenheder (såsom proteiner, nukleinsyrer, endotoksiner osv.) gennem en række enhedsoperationer - klaring, ekstraktion, kromatografi, tangentiel flowfiltrering - mens produktet tilbageholdes så meget som muligt og koncentreres yderligere ved hjælp af tangentiel flowfiltrering (TFF) via ultra/diafiltrering (UF/DF).

Målet er at øge renheden uden at miste udbytte. Overvågning af flow, tryk, ledningsevne, pH, turbiditet og flydevægt under bufferforberedelse og rensning sikrer pålidelighed gennem hele processen.

Vira inaktiveres og gøres ikke-patogene for at sikre bioterapeutiske lægemidlers sikkerhed ved at ændre opløsningsmiljøet (sænke pH eller tilsætte opløsningsmidler/rengøringsmidler). Inline-spektroskopi, turbiditet, pH- og ORP-overvågning og kontrol garanterer ensartethed gennem hele processen.

Med polering opnås den endelige renhed.

Forskere bruger størrelsesudelukkelseskromatografi og tangentiel flowfiltrering til at fjerne sporurenheder - virale partikler, bakterielle patogener og endotoksiner - og udveksle oprensningsbufferen med formulering et.

Mens FTIR-spektroskopi kan hjælpe med at kvantificere og specificere fraktionskomponenter under polering, kromatografi, overvågning af tryk, flow, ledningsevne, pH og turbiditet gennem alle poleringsenhedens operationer - inklusive bufferforberedelse, løfte om produktsikkerhed og kvalitet.