Mikropipetter

Vi bruger mikropipetter til nøjagtigt at overføre små mængder væske fra én beholder til en anden. For eksempel bruger vi en mikropipette til at flytte væske fra en cellekulturkolbe til individuelle brønde i en mikrobrøndplade. Mikropipetter anvendes inden for miljøvidenskab, kemi, farmaceutisk udvikling, kriminalteknik, biologi og mange andre områder.

Mange mikropipetter har meget gode nøjagtighedsspecifikationer. Disse instrumenter har potentiale til at levere volumener med meget lave systematiske og tilfældige fejl. Men mikropipettebrugerens teknik kan i høj grad påvirke nøjagtigheden. Korrekt volumenindstilling, forskylning af pipettespidser og dybde ved neddypning af spidser samt pipetteringsvertikalitet og pipetteringsrytme kan alle påvirke reproducerbarheden.  

Mikropipetter er præcisionsinstrumenter, der ofte udsættes for omfattende brug i laboratoriet, så ud over gode specifikationer og korrekt teknik er den mest nøjagtige mikropipette også en, der kalibreres regelmæssigt. Serviceintervallerne afspejler typisk det antal gange, en mikropipette anvendes.

Hvis du vil bruge en mikropipette, skal du først indstille og låse volumen. Sænk derefter væskeenden af mikropipetten ned i en ren, tom pipettespids. Sørg for, at pipettespidsen er sikkert monteret på mikropipetten for at opnå en lufttæt forsegling. Når en pipettespids er isat, trykkes stemplet ned til det første stop på en manuel mikropipette. På elektroniske modeller er den klar til at aspirere, når volumen er indstillet, og en spids er isat.  

Hold mikropipetten lodret, og nedsænk spidsen i væsken i den dybde, der passer til spidsens størrelse. Trykket øges, hvis en spids nedsænkes for dybt, og det kan overfylde spidsen; hvis spidsen nedsænkes for lavt, er der risiko for, at der indsuges luft.  

Udløs langsomt trykket på stemplet på en manuel mikropipette for at aspirere den indstillede væskevolumen. På en elektronisk version skal der trykkes på knappen for at aspirere.

Med væsken inde i spidsen flyttes mikropipetten over målbeholderen. På manuelle mikropipettertrykkes stemplet ned til første stop for at dispensere. På en elektronisk mikropipette skal du blot trykke på dispenseringsknappen.  

Til sidst fjernes eventuel resterende væske ved at føre mikropipetten over en ønsket affaldsbeholder og, på manuelle mikropipetter, trykke stemplet ned til det andet udblæsningsstop. På elektroniske mikropipetter bruges knappen til at blæse eventuel resterende væske ud.

For at minimere risikoen for fejl, når der arbejdes med en mikropipette, skal du starte med et komplet system med en mikropipette og en spids for at sikre en korrekt lufttæt montering.  

Hold mikropipetten så lodret som muligt under arbejdet. På manuelle mikropipetter indstilles volumen ved at dreje mikrometeret en smule over den tilsigtede volumen. Sænk den derefter til det ønskede tal. Hver gang du påfylder en ny spids, skal den forskylles for at optimere betingelserne i spidsen og opnå særdeles nøjagtig pipettering. Når du aspirerer og dispenserer, skal du holde hastigheden konstant og opretholde en rytme gennem hele protokoltrinnet.  

Dispensering under målvæskeoverfladen, når det er muligt, eller berøring – aftørring af spidsen på beholderens indvendige væg, når du færdiggør dispenseringen – er begge måder at maksimere nøjagtigheden af den volumen, du doserer.

Forskellige personer refererer til de samme typer instrumenter på begge måder: Nogle kalder dem pipetter, og andre kalder dem mikropipetter. Populær brug har samlet disse udtryk for at kunne referere til de samme instrumenter, selvom mikropipetter kan defineres mere snævert som instrumenter, der er i stand til at mikroinjicere væske direkte i celler. Pipetter dækker over instrumenter, der spænder fra pipetter og mundbetjente rør til serologiske pipetter og pipetteringssystemer med høj kapacitet.

Mikropipetter er pipetter, der er i stand til at måle og dispensere væskeopløsninger i volumenintervallet fra 1 μl til 1.000 μl. De bruges ofte i biovidenskabelig forskning, hvor nøjagtig måling og dosering af opløsninger er påkrævet.