UV Vis spektrofotometer kalibrering

UV/VIS Excellence spektrofotometre testes i henhold til prosedyrene som er definert i amerikansk farmakopé (USP) 43 – NF 38 og europeisk farmakopé (Ph. Eur.) Ed. 10. Testene dekker følgende parametere:

• Bølgelengdenøyaktighet
• Fotometrisk nøyaktighet
• Fotometrisk repeterbarhet
• Fotometrisk linearitet*
• Strølys
• Oppløsning

I tillegg parametere som ikke kreves av hverken USP eller Ph. Eur. er også testet:

• Bølgelengde repeterbarhet
• Fotometrisk støy
• Basislinje flathet
• Fotometrisk drift

Testens omfang sikrer at alle aspekter av spektrofotometrenes ytelse blir vurdert. Våre UV7 Excellence spektrofotometre oppfyller de strenge kravene som er beskrevet mer detaljert nedenfor.

*Den fotometriske lineariteten er ikke lenger eksplisitt nevnt i den 43. utgaven. Den fotometriske nøyaktigheten må testes over det tiltenkte driftsområdet. Derfor anbefaler METTLER TOLEDO fortsatt testen for fotometrisk linearitet.

Bølgelengdenøyaktighet vurderer instrumentets evne til pålitelig å reprodusere bølgelengder. Målingen av bølgelengdenes nøyaktighet gjør det mulig å bestemme om forskyvninger av feiljustering av bølgelengdeaksen er til stede.

Egnede referansematerialer for bestemmelse av bølgelengdenøyaktighet bør ha smale og veldefinerte topper. En løsning av holmiumoksyd brukes ofte til dette formålet.

USP og Ph. Eur. angir forskjellige akseptkriterier avhengig av referansematerialet som brukes og deres bølgelengdeområde. For flytende referansemateriell gjelder følgende kriterier:

USP: ± 1 nm under 400 nm; ± 2 nm over 400 nm
Ph. Eur.: ± 1 nm under 400 nm; ± 3 nm over 400 nm

I henhold til USP og Ph. Eur., bølgelengdepresisjon, eller repeterbarhet, er ikke nødvendig for matrisebaserte spektrofotometre. Takket være fraværet av bevegelige deler, er ikke matrisebaserte instrumenter utsatt for feiljustering mellom målingene.

Fotometrisk nøyaktighet er et mål på instrumentets evne til å måle absorbansen riktig og returnere absorbansverdiene så nær den sanne verdien som mulig.

Fotometrisk nøyaktighet kan bestemmes ved å måle faste eller flytende filtre med kjente konsentrasjons- og absorbansverdier, og sammenligne den målte absorbansen med referanse-absorbansverdiene.

En 60 mg/l løsning av kaliumdikromat (PDC) brukes for det ultrafiolette området, mens et 0,5 A-filter med nøytral tetthet (ND) dekker det synlige området. Akseptkriteriene er de samme for begge farmakopéene og er avhengig av referansematerialets absorbansnivå.

PDC: ± 0,010 A under 1,0 A; ± 1,0 % (0.010*A) over 1,0 A
ND: ± 0,008 A under 1,0 A; ± 0,8 % (0.008*A) over 1,0 A

I henhold til USP og Ph. Eur., bølgelengdepresisjon, eller repeterbarhet, er ikke nødvendig for matrisebaserte spektrofotometre. Takket være fraværet av bevegelige deler, er ikke matrisebaserte instrumenter utsatt for feiljustering mellom målingene.

Fotometrisk repeterbarhet, også referert til som fotometrisk presisjon av USP, definerer kapasiteten til et spektrofotometer for å returnere absorbansverdier over flere målinger på en pålitelig og repeterbar måte.

Det brukes de samme referansematerialene som ble brukt for å bestemme fotometrisk nøyaktighet. Filtrene måles seks ganger, og standardavviket over alle målinger beregnes for å vurdere repeterbarheten.

Standardavviket skal ikke overstige 5 mA under 1 A eller 0,5 % over 1 A, uavhengig av det brukte referansematerialet eller bølgelengdeområdet.

Merk: fotometrisk repeterbarhet er kreves ikke av Ph. Eur.

Fotometrisk linearitet er et mål på lineariteten til de målte verdiene (f.eks. absorbans) som en funksjon av økende konsentrasjon. Dette er spesielt viktig for kvantitative applikasjoner.

Fotometrisk linearitet kan bestemmes med de samme prosedyrene og filtre som brukes for å bestemme fotometrisk nøyaktighet, men ved tre konsentrasjoner / forskjellige filtre blir området mellom 0A og 2A brukt.

USP og Ph. Eur. angi forskjellige akseptanskriterier for den fotometriske lineariteten:

Ph. Eur.: korrelasjonskoeffisienten R2 må overstige 0,999.
USP: de målte verdiene ved alle konsentrasjoner/filtre må oppfylle kriteriene for fotometrisk nøyaktighet.

Strølys er definert som lys som når detektoren, men som ikke er en del av analysen. Det forårsaker en skjevhet med tilsvarende bølgelengde, men stammer ikke fra et bidrag fra den målte prøven. Derfor blir prøvens absorbans endret av strølys og prøveresultatene inkluderer en systematisk feil.

Strølys bestemmes ved å måle et avskjæringsfilter (en vandig kaliumkloridoppløsning) ved å bruke både den spesifikke bølgelengdemetoden (SWM) og metoden for løsningsfilerforhold (SFRM).

Akseptanskriteriene oppgitt av USP og Ph. Eur. for KCl er som følger:

SWM: Amax ≥ 2,0 A
SFRM: Amax ≥ 0,7 A

Oppløsning definerer oppløsningsstyrken til et UV Vis spektrofotometer og dets evne til å løse tilstøtende strukturer i et spekter.

Oppløsningen bestemmes ved å måle en løsning av Toluen i n-heksan. Absorpsjonsminimum og -maksimum på en skarp og godt oppløst topp brukes til vurdering av oppløsningen.

USP fastsetter at forholdet mellom minimum og maksimal absorbans ved respektive bølgelengder på 267 og 269 nm må overstige 1,3 for å gi tilstrekkelig oppløsning, mens Ph. Eur. akseptkriterier er angitt i den enkelte monografien.

I motsetning til UV Vis spektrofotometre som skanner, har matrisebaserte instrumenter ikke en fysisk spalte, som mekanisk definerer instrumentets spektrale båndbredde (SBW). Den ekvivalente SBW for et matriseinstrument kan beregnes ut fra instrumentets oppløsning.
For eksempel er UV7 Excellence spektrofotometerets oppløsning ≥ 1,9, som tilsvarer en SBW ≤ 1,0 nm.

Testene definert ovenfor kan utføres enten manuelt eller automatisk, men manuelle metoder har den iboende risikoen for redusert nøyaktighet. Manuelle arbeidsflyter er tidkrevende og kan være utsatt for feil. Automatisk ytelsesverifisering gir følgende fordeler:

• Raskere resultater med sporbar dokumentasjon og validering av resultat.
• Arbeidsflyt og feil i dataoverføring kan unngås, tester trenger ikke å gjentas.
• Samsvar med dataintegritetsstandarder. Dette er en betydelig fordel med hensyn til FDA-samsvars datahåndtering.
• Rask avkastning på investeringen takket være økt produktivitet og sikkerhet.

Forskriftssamsvar er et hovedmål for alle legemiddelprodusenter og deres leverandører. I følge GMP må produksjonsprosessene og analysemetodene valideres, samtidig som utstyret som brukes til produksjon og kvalitetskontroll krever kvalifisering.

For å støtte kunder i å oppfylle dette samsvarskravet, tilbyr METTLER TOLEDO EQPac for Excellence UV/VIS spektrofotometre. EQPac er en tjenesteløsning som er spesielt utviklet for å møte krav til samsvar i dagens krevende forskriftsmiljø. Det gir en fullt dokumentert, profesjonell installasjon og kvalifiseringstjeneste på stedet for å sikre overholdelse av forskrifter og pålitelig drift.

Lær mer om vår utstyrskvalifiseringstjeneste og vår UV/VIS spektrofotometer kalibreringstjeneste.