Dyrkningsmedie er specifikke blandinger af næringsstoffer og andre stoffer, der understøtter væksten af mikroorganismer såsom bakterier og svampe (gær og skimmelsvampe). Dyrkningsmedier bruges til kvalitetskontroltest af ikke-sterile råmaterialer og færdige produkter samt til mikrobiel kontaminering (sterilitet) test i applikationer som hygiejneovervågning, steriliseringsprocesvalidering og bestemmelse af effektiviteten af konserveringsmidler og antimikrobielle midler.
Mikrobielle tællingstest for ikke-sterile produkter udføres i henhold til de harmoniserede testprocedurer i de europæiske, amerikanske og japanske farmakopéer. Disse tests, tidligere kendt som Microbial Limit Tests (MLT), bestemmer biobelastningen af produktprøven. Dette opnås ved at tælle antallet af kolonidannende enheder, der er vokset på dyrkningsmediet for en kendt prøvestørrelse (CFU/g). Acceptkriterierne er baseret på det samlede aerobiske mikrobielle antal (TAMC), det samlede gær- og skimmeltal (TYMC). Desuden foretages der specifikke test for at bekræfte tilstedeværelsen eller fraværet af visse mikroorganismer, der kan vise sig at være anstødelige.
Ingredienserne i dyrkningsmediet varierer afhængigt af den test, der udføres, og den mikroorganisme, der er af interesse. Oftest er kulturmedier baseret på en næringsbouillon (væske), ofte blandet med agar og tilberedt i petriskåle (de kan være halvfaste eller faste). For berigede eller selektive medier tilføjes yderligere specifikke komponenter.
Forberedelse af dyrkningsmedier skal udføres nøjagtigt for at sikre, at mikrobiologisk vækst fremmes korrekt. De enkelte ingredienser i dyrkningsmediet (pulvere, geler og væsker) skal afvejes omhyggeligt i henhold til opskriften på dyrkningsmedieformuleringen. En præcisionsvægt med læsbarhed fra 1 mg op til 10 mg bruges typisk til hovedkomponenterne. En analysevægt kan være nødvendig til afvejning af sporstoffer som kobber og zink. Hvis der er behov for en mindre mængde dyrkningsmedier, skal man sørge for at genberegne ingrediensmængderne korrekt, og en balance med en højere læsbarhed kan være nødvendig for at opfylde nøjagtighedskravene.
Nøjagtig forberedelse af dyrkningsmedier er afgørende for at sikre, at mikrobiologisk vækst understøttes korrekt. Se videoen for at se, hvordan METTLER TOLEDOs XPR-præcisionsvægte ikke kun hjælper med at sikre, at dine vækstmedier er formuleret præcist, men også forenkler processen, så du sparer tid og kræfter.
Fremstilling af dyrkningsmedieformuleringer, herunder flydende vækstmedier og dyrkningsmedier baseret på næringsagar, er en almindelig procedure i ethvert mikrobiologisk laboratorium. Processen med at formulere kulturmedier involverer mange trin og skal udføres med omhu for at undgå krydskontaminering og i sidste ende beskytte forbrugernes sundhed.
Afhængigt af produkttypen og dets formål er der tre hovedkategorier af mikrobielle kvalitetskontroltest, der kræver brug af vækstmedier:
| Produkttype | Test | Formål |
|---|---|---|
| Ikke-sterile | Mikrobielle tællingstest | Tæller det samlede antal bakterier og/eller svampe i en produktprøve |
| Ikke-sterile | Test for specifikke organismer | Identificerer stødende organismer, såsom salmonella, i en produktprøve |
| Steril | Sterilitetstest | Kontrollerer steriliteten af en produktprøve |
Testprocedurerne for mikrobielle grænser udføres for at afgøre, om et ikke-sterilt produkt overholder givne specifikationer for mikrobiel kvalitet. Sådanne ikke-sterile produkter omfatter kosmetiske, sundhedsmæssige og farmaceutiske produkter, der kan indtages, påføres lokalt eller inhaleres. Effektiviteten af sådanne produkter kan påvirkes eller endda elimineres af tilstedeværelsen af visse mikroorganismer, og derudover kan nogle mikroorganismer påvirke forbrugerens sundhed negativt. De mikrobielle optællingstests er en række tests, som producenter kan bruge til at sikre, at den biologiske byrde af deres færdige varer forbliver inden for sikre grænser.
Mens mange lande har deres egne retningslinjer for fastlæggelse af sikkerheden ved ikke-sterile produkter, er der harmonisering af de vigtige standarder på de europæiske, amerikanske og japanske markeder, som det fremgår af nedenstående tabel.
| Den Europæiske Farmakopé (EP) | Den amerikanske farmakopé (USP) | Japansk farmakopé (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: Mikrobiel tællingstest | <61>: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: Mikrobiel optællingstest | 4.05 I: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: Mikrobiel optællingstest |
| 2.6.13: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: test for specificerede mikroorganismer | <62>: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: Undersøgelse for specificerede mikroorganismer | 4.05 II: Mikrobiel undersøgelse af ikke-sterile produkter: Test for specificerede mikroorganismer |
| 5.1.4: Mikrobiologisk kvalitet af ikke-sterile farmaceutiske præparater og stoffer til farmaceutisk brug | <1111>: Mikrobiologisk undersøgelse af ikke-sterile produkter: Kriterier for godkendelse af farmaceutiske præparater og stoffer til farmaceutisk brug | 12: Mikrobiologisk undersøgelse af ikke-sterile produkter: Kriterier for godkendelse af farmaceutiske præparater og stoffer til farmaceutisk brug |
Sterilitetstest bekræfter, at produkter er fri for levedygtige mikroorganismer og er af afgørende betydning for medicinsk udstyr, lægemidler, vævsmaterialer og andre materialer, der hævder at være sterile eller fri for levedygtige mikroorganismer. Ud over at identificere potentiel kontaminering bruges sterilitetstest også til at bestemme antimikrobiel effektivitet og til at validere steriliseringsprocedurer.
| Den Europæiske Farmakopé (EP) | Den amerikanske farmakopé (USP) | Japansk farmakopé (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Sterilitet | <71>: Sterilitetstest | 4.06: Sterilitetstest |
Bufferløsninger er af afgørende betydning i en lang række applikationer. Bufferforberedelse er dog tidskrævende og arbejdskrævende og skal udføres med omhu for at undgå fejl. Hvis du har brug for hjælp til bufferforberedelse eller ønsker rådgivning om, hvilken vægt der opfylder dine krav til nøjagtighed, er vores team af eksperter her for dig. Tøv ikke med at kontakte os for hjælp eller rådgivning.
Kulturmedier og vækstmedier består ofte af mere end fem ingredienser, nogle gange så mange som 30. Sådanne komplekse formuleringsprocesser kræver stor omhu og opmærksomhed, og selv den hurtigste laboratorietekniker kan have brug for 1,5 timer for at fremstille en sådan blanding.
Beregninger af dyrkningsmedie
Den typiske dyrkningsmedieopskrift producerer 1 liter dyrkningsmedieopløsning. Når der kræves et andet volumen end 1 liter, er det nødvendigt at genberegne alle ingrediensmængderne i overensstemmelse hermed og registrere alle de nye værdier. Enhver fejl i beregningerne eller i logningen af de nye værdier kan resultere i et dyrkningsmedium, der ikke fungerer som krævet, hvilket potentielt kan føre til alvorlige konsekvenser.
Vejning og registrering af vægtresultater
Når man følger en opskrift på dyrkningsmedier eller de genberegnede værdier, skal laboranten være sikker på, at der er brugt den rigtige mængde af hver ingrediens, og at alle ingredienser rent faktisk er tilsat. Dette kan ofte betyde, at ingredienserne krydses af på en liste, når de vejes ind. Man skal være omhyggelig med at undgå transskriptionsfejl ved registrering af de faktiske vægte eller ved overførsel til en computer. Brugen af to vægte i forberedelsesprocessen for kulturmedier øger kompleksiteten, reducerer effektiviteten og øger risikoen for fejl.
Påvirkninger af vejning
Ingredienser til kulturmedier kan vejes ud i en række forskellige beholdere lige fra vejning af både op til fem liters bægre. Alle beholdere såvel som selve vægten kan være udsat for ydre påvirkninger, f.eks. luftbevægelse, elektrostatiske ladninger eller magnetfeltet fra en omrører, hvilket kan give anledning til vanskeligheder som f.eks. tarering af vægten, drivende og ustabile aflæsninger og længere bundfældningstider. Sådanne udfordringer forlænger tiden til at lave kulturen til medier, hvilket påvirker produktiviteten.
Vanskelighederne ved at veje i et sikkerhedsskab eller stinkskab
Virkningerne af luftens bevægelse i et sikkerhedsskab eller stinkskab kan afhjælpes ved brug af et trækskjold for at beskytte vægten og beholderen. Mens et trækskjold er en glimrende måde at forhindre vejefejl på, er der nogle praktiske ulemper:
Dokumentation
Kulturmediet skal ikke kun mærkes fuldt ud for at undgå forvekslinger, alle data relateret til kulturmediet skal logges og opbevares sikkert til fremtidig reference og sporbarhed. Manuel håndtering af store mængder data er tidskrævende og indebærer en høj risiko for fejl.
METTLER TOLEDOs XPR-præcisionsvægte tilbyder et højt niveau af nøjagtighed og løser mange af udfordringerne ved forberedelse af dyrkningsmedier, hvilket forenkler processer og reducerer arbejdsbyrden for laboratorieteknikere. Med læsbarheder fra 0,1 mg til 100 mg og kapacitet op til 10 kg er XPR-præcisionsvægte perfekte til en lang række applikationer til forberedelse af dyrkningsmedier.
Opskrifter direkte på vægten
Op til 50 opskrifter til tilberedning af dyrkningsmedier kan gemmes på vægten som vejemetoder, hvilket gør det muligt for teknikere hurtigt at få adgang til den nødvendige opskrift og begynde at arbejde. Trin-for-trin instruktioner findes på vægtdisplayet, så det er nemt for teknikere at holde styr på, hvor de er i forberedelsesprocessen for dyrkningsmedier.
Automatiske beregninger og resultatlagring
I begyndelsen af opskriften på dyrkningsmedie indtaster teknikeren blot det krævede volumen, og mængderne af ingredienserne genberegnes automatisk. Vægten beder teknikeren om at veje hver ingrediens ind, gemmer det faktiske vægtresultat og tarer automatisk, før den næste ingrediens tilsættes. Det er ikke nødvendigt at registrere resultater manuelt, og resultaterne kan udskrives automatisk til sidst.
Intet trækafskærmning nødvendig
Alle XPR-præcisionsvægte er udstyret med SmartPan-vejepladen™. SmartPan giver ekstraordinær stabilitet ved at minimere virkningerne af luftstrømme på vejecellen, hvilket gør det muligt at veje ind med 1 mg læsbarhed uden trækafskærmning. SmartPan gør det muligt at levere resultater op til dobbelt så hurtigt som en standard vejeplade.
Nem rengøring
Rent udstyr er afgørende for at reducere risikoen for krydskontaminering. SmartPan-vejepladen bevarer eventuelt spild på grydens bund, hvilket muliggør sikker bortskaffelse. Gryden og bunden fjernes let til rengøring i opvaskemaskine. Et beskyttende dæksel på kroppen beskytter ikke kun vægten ved at hjælpe med at forhindre spild i at trænge ind i vejecellen, men den glatte overflade er nem at rengøre og forhindrer ophobning af snavs. Der findes kemisk resistente dæksler til vægtdisplayet, som nemt kan løftes af efter brug og bortskaffes for at undgå krydskontaminering.
METTLER TOLEDOs XPR-præcisionsvægte kan tilsluttes vores proprietære LabX-laboratoriesoftware for at skabe en komplet workflow-løsning, der tilbyder omfattende datastyringsfunktioner. En centraliseret database giver alle tilsluttede brugere adgang til de samme SOP'er til forberedelse af kulturmedier, hvilket sikrer, at hver tekniker følger de samme procedurer. Softwaren tager sig automatisk af alle procesoplysninger og beregninger. Resultaterne gemmes sikkert i databasen og kan til enhver tid tilgås for yderligere analyse og rapportgenerering. Softwaren eliminerer praktisk talt behovet for manuel registrering af data – selv detaljerede etiketter kan udskrives automatisk.
Løsningen kan integreres med eksisterende ERP/LIMS-systemer, hvilket muliggør tovejsoverførsel af recepter og resultater. Instrumenter, opgaver og brugere kan alle styres centralt; Laboratorieledere kan overvåge opgavernes live fremskridt uden at skulle være til stede i laboratoriet. I stærkt regulerede miljøer hjælper softwaren med at overholde FDA ALCOA+ dataintegritetskrav.
Uanset om du blot har brug for hurtige og pålidelige pH-målinger eller skal opfylde strenge regler, kan METTLER TOLEDO hjælpe dig.
Den førsteklasses SevenExcellence-serie tilbyder intuitiv OneClick-berøringsskærm™, der gør det muligt at starte gemte metoder direkte fra en genvej på startskærmen. Intelligent sensorstyring sikrer, at dine pH-elektroder altid er i topform for nøjagtige resultater. Seven Excellence-serien kan forbindes til LabX for at sikre sporbarhed og dataintegritet.
Til pH-målinger på flade overflader som agarplader anbefales specialiserede overfladeelektroder som InLab Surface Pro-ISM .
Har du nogensinde ønsket, at indvejnings- og dokumentationsprocesser for medieformulering var mindre komplicerede? Er en udfordring med at gengive optimeret medieformulering bekendt for dig? Læs vores vejledning, og få mere at vide om, hvordan skræddersyede instrumenter, software og tilbehør kan hjælpe forsknings- og udviklingslaboratorier med at opnå en høj grad af vejepålidelighed, mediekonsistens, overordnet omkostningseffektivitet og produktkvalitet for formuleringsprocesserne.
For at undgå risikoen for fejl er den bedste måde at genberegne fejl på elektronisk. Hvis opskriftsmængderne er tilgængelige i et regneark, kan de nye værdier beregnes hurtigt. Når du bruger en XPR-præcisionsvægt, kan du indstille din dyrkningsmedieformuleringsmetode til at bede dig om at indtaste den ønskede volumen, og målmængderne beregnes automatisk. Saldoen vil bede dig om de nødvendige beløb.
Vejetolerancerne skal defineres i din SOP til forberedelse af dyrkningsmedier. De kan angives præcist eller angives i procent. Hvis du har brug for at ændre opskriftens volumen, er der den ekstra udfordring også at genberegne de øvre og nedre vægtgrænser relateret til tolerancerne. Med XPR-præcisionsvægte medtages tolerancerne som en procentdel, når opskriften på dyrkningsmediet oprettes. De øvre og nedre vægtgrænser beregnes automatisk for enhver målvolumen. Den indbyggede vejevejledning hjælper dig med at dosere til målet og viser grønt, hvis du er inden for toleranceområdet.
Den enkleste måde er at organisere dine dyrkningsmedieingredienser i henhold til listen og afkrydse dem en efter en, når du tilføjer dem. Denne proces skal dog udføres omhyggeligt for at undgå fejl. Ved at gemme din SOP for dyrkningsmedier som en metode på din XPR-vægt, vil vægten bede dig om hver ingrediens ved navn og med den nødvendige mængde. Når du har vejet ingrediensen, gemmes vægtresultatet og ingrediensnavnet automatisk i den indbyggede resultatprotokol, som du til enhver tid kan se. Vægten tarer automatisk og beder dig om den næste ingrediens.
På vores XPR-vægte gemmes vægten af ingredienserne i dyrkningsmediet automatisk i den indbyggede resultatprotokol og kan ses når som helst. De endelige resultater kan udskrives eller overføres til en pc.
Den bedste vægt afhænger af din applikation og dine krav til nøjagtighed. Når du vælger din vægt, skal du overveje:
I metrologimæssige termer er disse overvejelser nødvendige for at definere minimumsvægtkravet, vægtens kapacitet og det sikre vejeområde. METTLER TOLEDOs gratis GWP-anbefalingsservice® hjælper dig med at vælge den rigtige vægt til dine behov og afgøre, om din eksisterende vægt er egnet til formålet.
XPR-vægte indeholder kvalitetssikringsfunktioner, så du kan være sikker på, at vægten er i vater, og rutinetest er opdaterede, før du begynder at veje. Vægtens status angives af StatusLight™ indbygget i fronten af vægtterminalen. Med et blik kan du se, at grøn betyder, at det er sikkert at veje, gul er en advarsel, og fejl vises med rødt.
Det indbyggede rutinetestbibliotek indeholder skabeloner, der kan tilpasses, til excentricitets-, repeterbarheds- og følsomhedstest. Der føres en fortegnelse over alle rutinemæssige tests for at sikre sporbarhed.
LabX-laboratoriesoftware giver maksimal understøttelse af overholdelse. Ved at implementere dine SOP'er i LabX kan du være sikker på, at alle brugere følger de samme procedurer for forberedelse af kulturmedier. Softwaren kan også styre alle kvalitetssikringsfunktioner, herunder planlægning af rutinemæssige tests og blokering af vægten fra brug, hvis det er nødvendigt. Alle resultater og procesoplysninger gemmes sikkert i en central database for at sikre sporbarhed og hjælpe med FDA CFR del 11-overholdelse.
Når en vægt ikke sætter sig, er der stor chance for, at vejecellen påvirkes af elektrostatiske ladninger eller lufttræk.
Elektrostatiske ladninger kan opbygges på beholdere og prøver ved normal håndtering, så du ikke gør noget forkert. Nogle gange er vægten i stand til at sætte sig, men vægtværdien, der vises på vægten, er muligvis ikke den sande mængde af det tilsatte stof, hvilket kan forklare, hvorfor reproducerbarheden er dårlig. For at fjerne elektrostatiske ladninger fra dine beholdere og prøver kan fritstående ionisatorer placeres ved siden af din vægt.
Løsningsproblemer kan også opstå ved brug af et sikkerhedsskab eller stinkskab.
I sådanne miljøer kan turbulente eller laminære lufttræk påføre vejecellen en kraft, der forhindrer vægten i at sætte sig og påvirker repeterbarheden.
SmartPan-vejepladen på XPR-præcisionsvægte minimerer virkningerne af lufttræk på vejecellen. SmartPan giver højere stabilitet end en standard vejeplade, hvilket gør det muligt at levere resultater op til dobbelt så hurtigt og forbedre repeterbarheden.
XPR-vægte indeholder funktioner til konfiguration af prøveetiketter med alle de oplysninger, du har brug for, herunder automatisk beregning af udløbsdatoen. Selv stregkoder kan tilføjes. Etiketten kan udskrives automatisk ved afslutningen af forberedelsesproceduren for dyrkningsmediet. METTLER TOLEDOs etiketter kan modstå temperaturerne i autoklavesteriliseringsprocesser.
En god idé er at inkludere stregkodeetiketter på dine ingredienser for entydigt at identificere hver prøve. XPR-vægte understøtter stregkodelæsere; Ingrediensstregkoden scannes, før den tilsættes til dyrkningsmedieblandingen, så det er nemt at kontrollere, at du har den rigtige ingrediens. Ved at tilslutte din XPR-vægt til LabX, vil der blive givet en advarsel, hvis du scanner den samme stregkode igen, så det ikke er muligt at tilføje den samme ingrediens to gange.
LabX-laboratoriesoftware integreres nemt med din LIMS for at muliggøre tovejsoverførsel af information mellem din LIMS og de instrumenter, der er tilsluttet LabX, herunder enhver vægt, der bruges til forberedelse af dyrkningsmedier.
