Kontrola a kalibrácia pipety

Pipeta je laboratórna pomôcka na prenos malých množstiev nameranej kvapaliny presným nasatím a dávkovaním vzorky. V súčasnosti tvoria väčšinu pipiet piestové pipety, ktoré vytvárajú čiastkové vákuum nad kvapalinou na účely nasatia kvapaliny, čím sa predchádza kontaktu s mechanickými súčasťami.

Viac: Pipety Rainin

Pipeta sa kalibruje vtedy, keď akreditovaná inštitúcia porovnáva očakávaný objem so skutočným objemom dodaným pipetou spolu so sprievodnou odchýlkou merania. Účelom je v záujme presných výsledkov preukázať, že pipeta si uchováva výrobné špecifikácie a špecifikácie podľa normy ISO8655. Pipety mimo tolerančného rozsahu sa často dajú opraviť, nastaviť a rekalibrovať.
Viac: Servis pipiet Rainin

Piestové pipety sa zvyčajne používajú v chémii, biológií, klinických a zdravotníckych odvetviach, v ktorých dochádza k odberu tekutých vzoriek, ktoré je potrebné prenášať v často malých a presných množstvách na ďalšie riedenie, prípadne výskum či analýzu.

V ďalšej časti uvádzame zaužívané pipetovacie techniky a chyby pri používaní piestových pipiet spolu s radami, ako im predchádzať.

1. Nesprávna hĺbka ponorenia hrotu
   Správna hĺbka ponorenia hrotu môže zvýšiť presnosť až o 5 %. Hrot by sa mal ponoriť v rozsahu od 1 do 2 mm pri mikroobjemových pipetách a 3 až 6 mm pri pipetách s normálnym rozsahom, v závislosti od veľkosti hrotu. Ak sa hrot ponorí príliš hlboko, dôjde k stlačeniu objemu plynu obsiahnutého v hrote, v dôsledku čoho sa nasaje priveľké množstvo kvapaliny.
   
   
2. Nesprávny uhol pipetovania
   Uhol ponorenia hrotu pipety do vzorky by mal byť čo najvertikálnejší a nemal by sa o viac než 20 stupňov odchyľovať od vertikálnej polohy. Horizontálnejší uhol spôsobí, že sa do hrotu dostane priveľa kvapaliny, čoho výsledkom bude nepresné nasatie. Príklad: Pri uhle 30 stupňov od vertikálnej polohy môže dôjsť k nasatiu až o 0,7 % viac kvapaliny.
   
   
3. Nekonzistentné dávkovanie
   Vyššia presnosť a reprodukovateľnosť medzi vzorkami sa dá dosiahnuť zaistením toho, že sa posledná zostávajúca kvapôčka kompletne dávkuje tak, aby nepriľnula ku koncu hrotu. Pri väčšine spôsobov použitia sa odporúča dávkovať s koncom hrotu opretým o stenu nádoby, keďže sa tým znižuje alebo eliminuje množstvo vzorky zostávajúcej na hrote. Táto technika môže zvýšiť presnosť o 1 % alebo viac.
   
   
4. Ak nedôjde k predbežnému opláchnutiu
   Dávkovanie kvapaliny z pipety zanechá na hrote kvapalinový povlak, v dôsledku čoho je vylúčený objem o niečo nižší ako by mal byť. Predbežné dvakrát opakované opláchnutie nového hrotu kvapalinou, ktorá sa bude používať, ustáli vnútorný priestor hrotu.
   
   
5. Nekonzistentný rytmus pipetovania
   Pri každej vzorke zachovávajte rovnaký rytmus pipetovania. Neponáhľajte sa ani nerobte prudké pohyby, aby ste rytmicky vykonávali všetky kroky pipetovacieho cyklu.
   
   Viac: Náležité pipetovacie postupy

Presnosť pipety by sa mala kontrolovať pravidelne medzi kalibráciami, aby sa medzi kalibráciami zabránilo získavaniu výsledkov, ktoré sú mimo tolerančného rozsahu. Ak chcete skontrolovať pipetu, nominálny objem by ste do pohárika na presnej analytickej váhe mali dávkovať aspoň 4- až 6-krát a následne by ste podľa vzorcov z normy ISO8655 mali vypočítať priemerný objem a odchýlku. Váhy so vstavanou aplikáciou alebo PC softvérom v priebehu pár sekúnd automaticky zobrazujú výsledok Pass (Absolvoval) alebo Fail (Neabsolvoval).

Viac: Kontrola pipety

Presnosť pipety by sa mala kontrolovať pravidelne medzi kalibráciami, aby sa medzi kalibráciami zabránilo získavaniu výsledkov, ktoré sú mimo tolerančného rozsahu. Ak chcete skontrolovať pipetu, nominálny objem by ste do pohárika na presnej analytickej váhe mali dávkovať aspoň 4- až 6-krát a následne by ste podľa vzorcov z normy ISO8655 mali vypočítať priemerný objem a odchýlku. Váhy so vstavanou aplikáciou alebo PC softvérom v priebehu pár sekúnd automaticky zobrazujú výsledok Pass (Absolvoval) alebo Fail (Neabsolvoval).  

Kalibrácia pipety vypovedá o rozdiele medzi očakávaným a skutočným objemom, ktorý musí byť v určitom tolerančnom rozsahu. Pokiaľ sa dostane mimo tolerančný rozsah, môže vytvárať nenáležité roztoky a v konečnom dôsledku dokonca nesprávne analytické výsledky. V dôsledku toho výsledky nie je možné reprodukovať a celú analýzu je potrebné opakovať. Ak chcete byť schopný včas rozpoznať pipetu mimo tolerančného rozsahu, odporúča sa presnosť pipety kontrolovať aj medzi kalibráciami, aby nedošlo k tomu, že sa nepresnosti zistia až pri ďalšej kalibrácii.

Pri kalibrácii pipety akreditovaná inštitúcia porovnáva očakávaný objem so skutočným objemom dodaným pipetou spolu so sprievodnou odchýlkou merania. Účelom je v záujme presných výsledkov preukázať, že pipeta si uchováva výrobné špecifikácie a špecifikácie podľa normy ISO8655. Pipety mimo tolerančného rozsahu sa často dajú opraviť, nastaviť a rekalibrovať.

Kým začnete s čistením, najskôr si vždy naštudujte príručku od výrobcu, pretože odolnosť materiálu sa líši v závislosti od konkrétnej značky. V záujme dobrého vyčistenia je piestové pipety potrebné rozobrať. Rameno vysúvacieho mechanizmu hrotu a valček sa často dajú jednoducho ručne odskrutkovať, čím sa pipeta otvorí. Dávajte si pozor: tlak pružiny môže spôsobiť, že diely vyskočia von. Diely sa zvyčajne môžu čistiť tkaninou zľahka navlhčenou v jemnom roztoku mydla a destilovanej vody alebo pomocou roztoku izopropyl alkoholu či etanolu. Nedovoľte, aby sa kvapaliny dostali do hriadeľa, ani počas pipetovania, aby nedošlo ku kontaminácii piestu a tesnenia. Pri sterilizácii alebo používaní autoklávu nahliadnite do príručky, aby ste si overili, či sú tieto úkony povolené a ako sa majú vykonávať v závislosti od príslušného modelu pipety. Po vyčistení je potrebné overiť, či je pipeta v tolerančnom rozsahu. Servisný technik pipiet zvyčajne po servise vykoná kalibráciu, aby si overil a zároveň potvrdil, že pipeta sa neodkláňa od tolerančného rozsahu.