UV Vis Spektrofotométer Kalibrálása

Az UV/VIS Excellence spektrofotométerek tesztelése az Amerikai Egyesült Államok Gyógyszerkönyve (USP) 43 – NF 38 és az Európai Gyógyszerkönyv (Ph. Eur.) Ed. 10 által meghatározott eljárások szerint történik. A tesztek az alábbi paraméterekre terjednek ki:

• Hullámhosszpontosság
• Fotometrikus pontosság
• Fotometrikus ismétlőképesség
• Fotometrikus linearitás*
• Szórt fény
• Felbontás

Ezenfelül az USP és a Ph. Eur. által elő nem írt alábbi paramétereket is ellenőrizzük:

• Hullámhossz-ismétlőképesség
• Fotometrikus zaj
• Alapvonal egyenessége
• Fotometrikus eltolódás

A tesztek átfogó jellege jóvoltából a spektrofotométerek teljesítményének összes szempontja részt vesz az értékelésben. UV7 Excellence spektrofotométereink megfelelnek az alább részletesebben ismertetett szigorú követelményeknek.

*A fotometriai linearitást a 43. kiadás már nem említi kifejezetten. A fotometriai pontosságot a tervezett működési tartományban kell tesztelni. Ezért a METTLER TOLEDO továbbra is a fotometriai linearitás vizsgálatát javasolja.

A hullámhosszpontosság a műszernek a hullámhosszak hű reprodukálására vonatkozó képességét értékeli ki. A hullámhosszpontosság mérésével a hullámhossztengelytől való esetleges elmozdulási eltérések határozhatók meg.

A hullámhosszpontosság meghatározására való referenciaanyagoknak keskeny és jól elkülönülő csúcsokat kell mutatniuk. Erre a célra gyakran használnak holmium-oxidot.

Az USP és a Ph. Eur. a felhasznált referenciaanyagok és azok hullámhossztartománya tekintetében eltérő elfogadási feltételeket határoz meg. Folyékony referenciaanyagokra az alábbi feltételek érvényesek:

USP: 400 nm alatt ±1 nm; 400 nm fölött ±2 nm
Ph. Eur.: 400 nm alatt ±1 nm; 400 nm fölött ±3 nm

Az USP és a Ph. Eur. szerint a hullámhosszpontosság és ismétlőképesség vizsgálata array-alapú spektrofotométereknél nem követelmény. Az array-alapú műszerek a mozgó alkatrészek hiányának köszönhetően nincsenek kitéve a mérések közötti elállítódásnak.

A fotometrikus pontosság annak mértéke, hogy a műszer milyen pontosan képes mérni az abszorbanciát, és a valós értéket mennyire közelíti meg az általa jelzett érték.

A fotometrikus pontosság meghatározásához ismert koncentrációjú és abszorbanciaértékű szilárd vagy folyékony szűrő használható, összevetve az abszorbancia mért értékét a referenciaértékkel.

Az ibolyántúli tartományhoz kálium-dikromát (PDC) 60 mg/l-es oldata használható, míg a látható fénytartományt 0,5 A értékű semleges optikai sűrűség- (ND) szűrő fedi le. Az elfogadási feltételek a két gyógyszerkönyvnél azonosak és a referenciaanyag abszorbanciaszintjétől függenek.

PDC: 1,0 A alatt ±0,010 A; 1,0 A fölött ±1,0% (0.010*A)
ND: 1,0 A alatt ±0,008 A; 1,0 A fölött ±0,8% (0.008*A)

Az USP és a Ph. Eur. szerint a hullámhosszpontosság és ismétlőképesség vizsgálata array-alapú spektrofotométereknél nem követelmény. Az array-alapú műszerek a mozgó alkatrészek hiányának köszönhetően nincsenek kitéve a mérések közötti elállítódásnak.

A fotometrikus ismétlőképesség (az USP szerint fotometrikus precizitás) a spektrofotométer azon képessége, hogy több mérés után is megbízhatóan és megismételhetően mutassa az abszorbanciaértékeket.

A fotometrikus pontosság meghatározásához használtakkal azonos referenciaanyagokat kell itt is igénybe venni. A szűrőkön végzett hat mérés után az ismétlőképesség meghatározásához sor kerül az összes eredmény szórásának kiszámítására.

A szórás, mely 1 A alatt nem haladhatja meg az 5 mA-t, 1 A fölött pedig a 0,5%-ot, független a használt referenciaanyagtól és a hullámhossztartománytól.

Megjegyzés: az Európai Gyógyszerkönyv (Ph. Eur.) nem írja elő a fotometrikus ismétlőképesség tesztelését.

A fotometrikus linearitás a mért értékek (pl. abszorbancia) linearitásának mértéke a növekvő koncentráció függvényében. Ez mennyiségi alkalmazásoknál különösen fontos.

A fotometrikus linearitás ugyanazokkal az eljárásokkal és szűrőkkel határozható meg, mint a fotometrikus pontosság, bár a 0 A és 2 A közötti tartományt három koncentráció/különböző szűrők fedik le.

A fotometrikus linearitás esetében az USP és a Ph. Eur. eltérő elfogadási feltételeket határoz meg:

Ph. Eur.: az R2 korrelációs együtthatónak 0,999 fölött kell lennie.
USP: a mért értékeknek minden koncentráció/szűrő esetén teljesíteniük kell a fotometrikus pontosság feltételeit.

A szórt fény az a detektort elérő fény, ami nem része az analízisnek. Olyan torzulást okoz az adott hullámhosszon, ami nem a mért minta hozzájárulásából származik. A minta abszorbanciáját a szórt fény megváltoztatja, így az eredmény rendszerszintű hibát tartalmaz.

A szórt fény elválasztószűrő (kálium-klorid vizes oldata) mérésével határozható meg az adott hullámhosszú módszer (SWM) és az oldatszűrési arányra épülő módszer (SFRM) segítségével.

Az USP és a Ph. Eur. elfogadási feltételei a KCl tekintetében a következők:

SWM: Amax ≥ 2,0 A
SFRM: Amax ≥ 0,7 A

A felbontás az UV/VIS spektrofotométer felbontási teljesítményét és a szomszédos struktúrák felbontásának képességét határozza meg a spektrumon belül.

A felbontás toluol n-hexánban készített oldatának mérésével határozható meg. A felbontás megállapításához egy éles és jól elkülönülő abszorpciós csúcs minimuma és maximuma használható.

Az elégséges felbontáshoz az USP előírásai szerint a minimális és maximális abszorbancia arányának a 267 és 269 nm-es hullámhosszon meg kell haladnia az 1,3-et, míg a Ph. Eur. elfogadási feltételeit az egyéni monográfia tartalmazza.

Az array-alapú műszerek a pásztázó UV/VIS spektrofotométerekkel ellentétben nem rendelkeznek a műszer spektrális sávszélességét (SBW) meghatározó fizikai réssel. Az ekvivalens SBW-érték az array-műszer felbontásából számítható ki.
Az UV7 Excellence spektrofotométer felbontása például ≥ 1,9, ami SBW ≤ 1,0 nm értéknek felel meg.

A fent megadott tesztek elvégezhetők manuálisan és automatikusan is, bár a manuális módszerek a kisebb pontosság velejáró kockázatát hordozzák. A manuális munkafolyamatok időigényesek és hibára hajlamosak. Az automatikus teljesítmény-ellenőrzés az alábbi előnyökkel jár:

• Gyorsabb eredmények követhető dokumentációval és eredményhitelesítéssel.
• Elkerülhetők vele a munkafolyamat-végrehajtási és adatátírási hibák, a teszteket nem kell megismételni.
• Megfelelés az adatintegritási előírásoknak. Az FDA-kompatibilis adatkezelés szempontjából ez jelentős előny.
• A nagyobb termelékenységnek és biztonságnak köszönhetően gyorsan megtérülő beruházás.

A jogszabályi előírásoknak való megfelelés minden gyógyszeripari gyártó és beszállítóik számára egyaránt alapvető fontosságú. A GMP szerint a gyártási eljárásokat és analitikai módszereket hitelesíteni, a gyártáshoz és minőség-ellenőrzéshez használt berendezéseket pedig minősíteni kell.

A jogszabályoknak való megfelelésben ügyfelei támogatására a METTLER TOLEDO az EQPac megoldást kínálja az Excellence UV/VIS spektrofotométerekhez. Az EQPac egy kifejezetten a mai, nagy igényeket támasztó szabályozási környezeteknek való megfeleléshez készített szolgáltatási megoldás. Helyszíni, teljesen dokumentált, professzionális üzembe helyezési és minősítési szolgáltatáscsomag, amely a jogszabályi megfelelőséget és a megbízható működést egyaránt biztosítja.

Tudjon meg többet berendezésminősítési szolgáltatásunkról és UV/VIS spektrofotométer-kalibrálási szolgáltatásunkról.