UV Vis spektrofotometar

UV/VIS spektroskopija jednostavna je i često korištena tehnika koja se temelji na apsorpciji svjetla u određenom uzorku. Ovisno o količini svjetla i valnoj duljini koje uzorak apsorbira, mogu se dobiti korisne informacije kao što su koncentracija ili čistoća uzorka, na primjer u spektru kofeina u nastavku. Osim toga, s obzirom na to da svaka tvar apsorbira svjetlo na drugačiji način, postoji jedinstveni i specifičan odnos između tvari i njezinog UV/VIS spektra. Spektrofotometrija se može koristiti za prepoznavanje tvari.

UV Vis spektrofotometar mjeri jačinu svjetla koje prolazi kroz otopinu uzorka u kiveti i uspoređuje je s jačinom svjetla prije prolaska kroz uzorak. Glavne sastavnice UV Vis spektrofotometra su izvor svjetla, držač uzorka, uređaj za disperziju koji razdvaja različite valne duljine svjetla i odgovarajući detektor, primjerice detektor s fotodiodama.

Pet je glavnih razloga zbog kojih se UV Vis spektri mjere:

• UV Vis spektri omogućavaju prepoznavanje komponenti u otopini uzorka. Točnije, vršna vrijednost, i do određene mjere profil spektra, omogućavaju prepoznavanje specifičnih spojeva.
  
• Vršne vrijednosti apsorpcije mogu se koristiti za kvantifikaciju uzorka koji se ispituje. Primjerice, koncentracija u uzorku može se izračunati iz vršne vrijednosti apsorbancije.
  
• Na temelju odnosa između apsorbancije i koncentracije u uzorku, UV Vis spektrofotometar koristi se za kvantitativne analitičke tehnike u segmentima tržišta kao što su biotehnološka, farmaceutska i kozmetička industrija, prehrambena industrija i industrija pića te ispitivanje kemikalija i vode.
  
• Spektar može otkriti specifična fizička svojstva molekula iz uzorka i omogućava izračun koeficijenta ekstinkcije uzorka, izračun točke taljenja proteina i nukleinskih kiselina mjerenjem UV Vis spektra na različitim temperaturama i određivanje brzine reakcije praćenjem apsorpcijskog spektra kao funkcije vremena.
  
• Položaj i profil vršnih vrijednosti spektra pružaju informacije o mikroskopskom okruženju molekula iz uzorka.

• Mjerenje pri fiksnoj valnoj duljini najjednostavnija je primjena spektrofotometra. Radi se o jednostrukom ili višestrukom mjerenju valne duljine i rezultat se može zabilježiti kao apsorbancija ili transmitancija.
  
• Kvantifikacija ili određivanje koncentracije neke tvari UV Vis spektrofotometrom temelji se na Beer-Lambertovom zakonu koji tvrdi da je apsorbancija otopine izravno proporcionalna koncentraciji tvari koja se apsorbira u otopini i duljini puta kivete. Stoga se UV Vis spektrofotometar može upotrebljavati za određivanje koncentracije u uzorku.
  
• Spektralnim mjerenjima metodom skeniranja određuje se apsorbancija ili transmitancija uzorka u određenom rasponu valnih duljina ili u rasponu čitavog spektra, obično od 190 do 1100 nm. Uobičajena analiza nakon toga određivanje je najviših i najnižih točaka.
  
• UV Vis spektrofotometar često se koristi za praćenje promjene u koncentraciji reaktanta ili proizvoda mjerenjem apsorbancije na određenoj valnoj duljini tijekom vremena. Te kinetičke metode često se koriste za proučavanje brzina enzimskih reakcija ili za utvrđivanje koncentracije specifičnih ugljikohidrata kao što su glukoza, fruktoza ili laktoza.

• Skenirajući spektrofotometar mjeri svaku valnu duljinu posebno i zbog toga mjerenje traje znatno duže. Spektrofotometar s nizom dioda mjeri cijeli spektar u kratkom vremenu jer se sve valne duljine mjere detektorom s nizom dioda.
  
• Skenirajući spektrofotometar skenira spektar s pomoću elemenata koji se mehanički rotiraju. To može dovesti do pogrešaka u ponovljivosti valnih duljina. Skenirajući instrument za spektroskopiju stoga zahtijeva redovito ponovno umjeravanje da bi se osigurala točnost valnih duljina. Spektrofotometar s nizom dioda nema pomičnih optičkih dijelova što znači da se tijekom vremena ne događaju odstupanja u radu zbog mehaničkih nepreciznosti.
  
• Za spektrofotometar s nizom dioda nije potreban zatvoreni spremnik za uzorke jer je otporan na okolno svjetlo zbog svog optičkog dizajna.

Naš asortiman za spektrofotometriju osmišljen je kako bi se uklapao u nekoliko industrijskih grana:

• Spektrofotometri UV5Bio i UV5Nano obično se koriste u farmaceutskoj industriji, bioznanosti, biotehnološkoj industriji i akademskoj zajednici.
  
• Spektrofotometri UV7 i UV5 obično se koriste u farmaceutskoj industriji, prehrambenoj industriji i industriji pića, kemijskoj, kozmetičkoj i petrokemijskoj industriji te u akademskoj zajednici.

Spektrofotometar za mikrovolumene izvodi mjerenja koristeći male količine uzorka (od samo 1 mikrolitre). Visokokoncentrirani uzorci također se mogu mjeriti bez dodatnog razrjeđivanja zahvaljujući tehnologiji LockPath na instrumentu UV5Nano tvrtke METTLER TOLEDO koja omogućuje postavljanje duljine puta od 0,1 ili 1 mm.

• Spektrofotometri UV5Nano i UV5Bio tvrtke METTLER-TOLEDO omogućavaju razne primjene u području bioznanosti, kao što su:
  
  • kvalitativna analiza DNK-a, RNK-a i proteina
    
  • kvantitativna analiza DNK-A, RNK-A i proteina
    
  • protokoli BCA, Bradford, Lowry i drugi kolorimetrijski proteinski testovi
    
  • prethodno konfigurirane boje i opcija za dodavanje prilagođenih boja
    
  • kalkulator oligonukleotida za utvrđivanje koncentracije DNK i RNK oligonukleotida
    
  • OD600 za žive stanice
    
• Osim toga, spektrofotometri UV5Bio i UV7 uključuju kinetičke metode za kinetička ispitivanja enzima
  
• Za više informacija o uporabi spektrofotometara tvrtke METTLER-TOLEDO u području bioznanosti preuzmite komplet alata za primjene u bioznanosti.

Tvrtka METTLER TOLEDO nudi rješenje za provjeru performansi u obliku jedinice CertiRef™ koja je najučinkovitiji način za provjeru radi li vaš spektrofotometar u skladu s propisima farmakopeje. Ovaj dodatak automatski izvodi testove točnosti i ponovljivosti valne duljine, fotometrijske točnosti i ponovljivosti, razlučivosti, ometajućeg svjetla, fotometrijskog šuma i pomaka, kao i uravnoteženosti osnovne linije.

Softver LabX tvrtke METTLER TOLEDO omogućava korisnicima veću fleksibilnost stvaranjem prilagođenih tijekova rada koji odgovaraju potrebama korisnika. Pogreške u izračunu i u transkripciji u potpunosti se izbjegavaju. Također osigurava integritet podataka jer su sve informacije spremljene u sigurnu bazu podataka, uključujući sve provjere performansi i servis. Sigurnosne značajke kao što su elektronički potpis i opcije upravljanja korisnicima omogućavaju usklađivanje s propisom 21 CFR, dio 11. agencije FDA.