Vekstmedier er spesifikke blandinger av næringsstoffer og andre stoffer som støtter veksten av mikroorganismer som bakterier og sopp (gjær og muggsopp). Vektsmedier brukes til kvalitetskontrolltester av ikke-sterile råvarer og ferdige produkter, samt til mikrobielle kontamineringstester (sterilitet) i applikasjoner som hygieneovervåking, validering av steriliseringsprosesser og bestemmelse av effektiviteten til konserveringsmidler og antimikrobielle midler.
Mikrobielle opptellingstester for ikke-sterile produkter utføres i henhold til de harmoniserte testprosedyrene i europeiske, amerikanske og japanske farmakopéer. Disse testene, tidligere kjent som Microbial Limit Tests (MLT), bestemmer biobyrden til produktprøven. Dette oppnås ved å telle antall kolonidannende enheter som har vokst på kulturmediet for en kjent prøvestørrelse (CFU/g). Akseptkriterier er basert på Total Aerobic Microbial Count (TAMC), Total Yeast and Mold Count (TYMC). Videre utføres spesifikke tester for å bekrefte tilstedeværelsen eller fraværet av visse mikroorganismer som kan vise seg å være støtende.
Ingrediensene til vekstmediet varierer i henhold til testen som utføres og mikroorganismen av interesse. Oftest er vekstmedier basert på en næringsbuljong (væske), ofte blandet med agar og tilberedt i petriskåler (de kan være halvfaste eller faste). For berikede eller selektive medier tilsettes ytterligere spesifikke komponenter.
Forberedelse av kulturmedier må utføres nøyaktig for å sikre at mikrobiologisk vekst fremmes riktig. De enkelte ingrediensene i vekstmediet (pulver, geler og væsker) må veies nøye ut i henhold til oppskriften på vekstmedieformuleringen. En presisjonsvekt med lesbarhet fra 1 mg til 10 mg brukes vanligvis for hovedkomponentene. En analysevekt kan være nødvendig for å veie ut sporstoffer som kobber og sink. Hvis det er behov for en mindre mengde kulturmedier, må det utvises forsiktighet for å beregne ingrediensmengdene på nytt, og en vekt med høyere lesbarhet kan være nødvendig for å oppfylle nøyaktighetskravene.
Nøyaktig forberedelse av vekstmedier er avgjørende for å sikre at mikrobiologisk vekst støttes riktig. Se videoen for å se hvordan METTLER TOLEDOs XPR-presisjonsvekter ikke bare bidrar til å sikre at vekstmediene dine er formulert nøyaktig, men også forenkler prosessen for å spare tid og krefter.
Utarbeidelse av vekstmedieformuleringer, inkludert flytende vekstmedier er basert på næringsagar, er en vanlig prosedyre i ethvert mikrobiologisk laboratorium. Vekstmedieformuleringsprosessen involverer mange trinn og må utføres med forsiktighet for å unngå krysskontaminering og til slutt beskytte forbrukernes helse.
Avhengig av type produkt og formål, er det tre hovedkategorier av mikrobielle kvalitetskontrolltester som krever bruk av vekstmedier:
| Type produkt | Test | Hensikt |
|---|---|---|
| Ikke-sterile | Mikrobielle tellingstester | Teller totalt antall bakterier og/eller sopp i en produktprøve |
| Ikke-sterile | Tester for spesifikke organismer | Identifiserer støtende organismer, for eksempel Salmonella, i en produktprøve |
| Steril | Sterilitetstester | Kontrollerer steriliteten til en produktprøve |
Testprosedyrene for mikrobielle grenser utføres for å avgjøre om et ikke-sterilt produkt er i samsvar med gitte spesifikasjoner for mikrobiell kvalitet. Slike ikke-sterile produkter inkluderer kosmetiske, helse- og farmasøytiske produkter som kan inntas, påføres lokalt eller inhaleres. Effekten av slike produkter kan påvirkes eller til og med elimineres av tilstedeværelsen av visse mikroorganismer, og i tillegg kan noen mikroorganismer påvirke forbrukerens helse negativt. De mikrobielle opptellingstestene er en rekke tester produsenter kan bruke for å sikre at den biologiske belastningen av ferdigvarene deres holder seg innenfor sikre grenser.
Mens mange land har sine egne retningslinjer for å etablere sikkerheten til ikke-sterile produkter, er det harmonisering av de viktige standardene i det europeiske, amerikanske og japanske markedet som vist i tabellen nedenfor.
| Europeisk farmakopé (EP) | Amerikansk farmakopé (USP) | Japansk farmakopé (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.12: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Mikrobielle opptellingstester | <61>: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Mikrobielle opptellingstester | 4.05 I: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Mikrobielle opptellingstester |
| 2.6.13: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Tester for spesifiserte mikroorganismer | <62>: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Tester for spesifiserte mikroorganismer | 4.05 II: Mikrobiell undersøkelse av ikke-sterile produkter: Tester for spesifiserte mikroorganismer |
| 5.1.4: Mikrobiologisk kvalitet på ikke-sterile farmasøytiske preparater og stoffer til farmasøytisk bruk | <1111>: Mikrobiologisk undersøkelse av ikke-sterile produkter: Akseptkriterier for farmasøytiske preparater og stoffer til farmasøytisk bruk | 12: Mikrobiologisk undersøkelse av ikke-sterile produkter: Akseptkriterier for farmasøytiske preparater og stoffer til farmasøytisk bruk |
Sterilitetstesting bekrefter at produktene er fri for levedyktige mikroorganismer og er av avgjørende betydning for medisinsk utstyr, legemidler, vevsmaterialer og andre materialer som hevder å være sterile eller fri for levedyktige mikroorganismer. I tillegg til å identifisere potensiell kontaminering, brukes sterilitetstesting også til å bestemme antimikrobiell effektivitet og til å validere steriliseringsprosedyrer.
| Europeisk farmakopé (EP) | Amerikansk farmakopé (USP) | Japansk farmakopé (JP) |
|---|---|---|
| 2.6.1: Sterilitet | <71>: Sterilitetstester | 4.06: Sterilitetstest |
Bufferløsninger er svært viktige i et bredt spekter av applikasjoner. Bufferforberedelse er imidlertid tidkrevende og arbeidskrevende og må gjøres med forsiktighet for å unngå feil. Hvis du trenger hjelp med bufferklargjøring eller ønsker råd om hvilken vekt som oppfyller dine nøyaktighetskrav, er vårt team av eksperter her for deg. Ikke nøl med å kontakte oss for hjelp eller råd.
Vekstmedier består ofte av mer enn fem ingredienser, noen ganger så mange som 30. Slike komplekse formuleringsprosesser krever mye omsorg og oppmerksomhet, og selv den raskeste laboratorieteknikeren kan trenge 1,5 time for å tilberede en slik blanding.
Beregninger av vekstmedier
Den typiske vekstmedieoppskriften produserer 1 liter vekstmedieløsning. Når det kreves et annet volum enn 1 liter, er det nødvendig å beregne alle ingrediensmengdene på nytt og registrere alle de nye verdiene. Eventuelle feil i beregningene eller i loggføringen av de nye verdiene kan resultere i et vekstmedium som ikke fungerer som nødvendig, noe som potensielt kan føre til alvorlige konsekvenser.
Veiing og registrering av vektresultater
Når du følger en oppskrift på vekstmedier, eller de omberegnede verdiene, må laboratorieteknikeren være sikker på at riktig mengde av hver ingrediens brukes, og at alle ingrediensene faktisk er tilsatt. Dette kan ofte bety å krysse av ingrediensene fra en liste etter hvert som de veies inn. Det må utvises forsiktighet for å unngå transkripsjonsfeil når du logger de faktiske vektene eller når du overfører dem til en datamaskin. Bruken av to vekter i forberedelsesprosessen for vekstmedier øker kompleksiteten, reduserer effektiviteten og øker risikoen for feil.
Veiing påvirker
Vekstmedieingredienser kan veies ut i en rekke forskjellige beholdere, alt fra veiing av båter opp til fem liters beger. Alle beholdere, så vel som selve vekten, kan være utsatt for ytre påvirkninger, for eksempel bevegelse av luft, elektrostatiske ladninger eller magnetfeltet fra en rører, noe som kan gi opphav til vanskeligheter som tarering av vekten, drivende og ustabile avlesninger, og lengre sedimenteringstider. Slike utfordringer forlenger tiden det tar å lage kulturen til medier, noe som påvirker produktiviteten.
Vanskelighetene med å veie i et sikkerhetsskap eller avtrekkshette
Effektene av bevegelse av luft i et sikkerhetsskap eller avtrekkshette kan lindres ved bruk av et trekkvern for å beskytte vekten og beholderen. Selv om et trekkskjold er en utmerket måte å forhindre veiefeil på, er det noen praktiske ulemper:
Dokumentasjon
Ikke bare må vekstmediet være fullstendig merket for å unngå forveksling, alle data knyttet til kulturmediet må logges og lagres sikkert for fremtidig referanse og sporbarhet. Manuell håndtering av store mengder data er tidkrevende og medfører høy risiko for feil.
METTLER TOLEDOs XPR-presisjonsvekter tilbyr et høyt nivå av nøyaktighet og løser mange av utfordringene ved klargjøring av vekstmedier, forenkler prosesser og reduserer arbeidsmengden for laboratorieteknikere. Med lesbarheter fra 0,1 mg til 100 mg og kapasitet på opptil 10 kg, er XPR-presisjonsvekter perfekte for et bredt spekter av bruksområder for forberedelse av vekstmedier.
Oppskrifter direkte på vekten
Opptil 50 oppskrifter på tilberedning av vekstmedier kan lagres på vekten som veiemetoder, slik at teknikere raskt kan få tilgang til oppskriften som trengs og begynne å jobbe. Trinnvise instruksjoner er gitt på vektdisplayet, slik at det er enkelt for teknikere å holde styr på hvor de er i forberedelsesprosessen for vekstmedier.
Automatiske beregninger og resultatlagring
I begynnelsen av vekstmedieoppskriften legger teknikeren ganske enkelt inn ønsket volum, og mengdene av ingrediensene beregnes automatisk på nytt. Vekten ber teknikeren om å veie inn hver ingrediens, lagrer det faktiske vektresultatet og tarer automatisk før neste ingrediens tilsettes. Det er ikke nødvendig å registrere resultater manuelt, og resultatene kan skrives ut automatisk på slutten.
Ingen trekkskjold nødvendig
Alle XPR-presisjonsvekter er utstyrt med SmartPan-veieskålen™. SmartPan gir ekstraordinær stabilitet ved å minimere effekten av luftstrømmer på veiecellen, noe som gjør det mulig å veie inn med 1 mg lesbarhet uten trekkvern. SmartPan gjør det mulig å levere resultater opptil dobbelt så raskt som en standard veiepanne.
Enkel rengjøring
Rent utstyr er avgjørende for å redusere risikoen for krysskontaminering. SmartPan-veieskålen beholder eventuelt søl på pannebunnen, noe som muliggjør sikker avhending. Pannen og bunnen fjernes enkelt for rengjøring i oppvaskmaskin. Et beskyttende deksel på kroppen beskytter ikke bare vekten ved å forhindre at søl kommer inn i veiecellen, men den glatte overflaten er enkel å rengjøre og forhindrer opphopning av smuss. Kjemisk motstandsdyktige deksler er tilgjengelige for vektdisplayet som enkelt kan løftes av etter bruk og kastes for å unngå krysskontaminering.
METTLER TOLEDOs XPR-presisjonsvekter kan kobles til vår proprietære LabX-laboratorieprogramvare for å skape en komplett arbeidsflytløsning som tilbyr omfattende databehandlingsfunksjoner. En sentralisert database gir alle tilkoblede brukere tilgang til de samme SOP-ene for forberedelse av vekstmedier, og sikrer at hver tekniker følger de samme prosedyrene. Programvaren tar seg av all prosessinformasjon og beregninger automatisk. Resultatene lagres sikkert i databasen og kan når som helst nås for videre analyse og rapportgenerering. Programvaren eliminerer praktisk talt behovet for manuell registrering av data – selv detaljerte etiketter kan skrives ut automatisk.
Løsningen kan integreres med eksisterende ERP/LIMS-systemer, noe som muliggjør toveis overføring av resepter og resultater. Instrumenter, oppgaver og brukere kan alle administreres sentralt; Laboratorieledere kan overvåke fremdriften til oppgaver i sanntid uten å måtte være tilstede i laboratoriet. For sterkt regulerte miljøer hjelper programvaren med samsvar med FDA ALCOA+ dataintegritetskrav.
Enten du bare trenger raske og pålitelige pH-målinger eller må oppfylle strenge forskrifter, kan METTLER TOLEDO hjelpe deg.
Den førsteklasses SevenExcellence-serien tilbyr intuitiv OneClick-berøringsskjermbetjening ™, slik at lagrede metoder kan startes direkte fra en snarvei på startskjermen. Intelligent sensorstyring sikrer at pH-elektrodene alltid er i topp stand for nøyaktige resultater. Seven Excellence-serien kan kobles til LabX for å sikre sporbarhet og dataintegritet.
For pH-målinger på flate overflater som agarplater, anbefales spesialiserte overflateelektroder som InLab Surface Pro-ISM .
For å unngå risikoen for feil er den beste måten å beregne feil på nytt elektronisk. Hvis oppskriftsmengdene er tilgjengelige i et regneark, kan de nye verdiene beregnes raskt. Når du bruker en XPR-presisjonsvekt, kan du sette opp metoden for formulering av vekstmedier slik at du blir bedt om å angi ønsket volum, og målmengdene beregnes automatisk. Saldoen vil be deg om de nødvendige beløpene.
Veietoleransene bør defineres i SOP-programmet for forberedelse av kulturmedier. De kan spesifiseres nøyaktig eller angis i prosent. Hvis du trenger å endre oppskriftsvolumet, er det den ekstra utfordringen å også beregne de øvre og nedre vektgrensene knyttet til toleransene. Med XPR-presisjonsvekter inkluderes toleransene som en prosentandel når oppskriften på kulturmediet opprettes. De øvre og nedre vektgrensene beregnes automatisk for ethvert målvolum. Den innebygde veieguiden hjelper deg med å dosere til målet, og viser grønt hvis du er innenfor toleranseområdet.
Den enkleste måten er å organisere vekstmedieingrediensene dine i henhold til listen og krysse dem av en etter en når du legger dem til. Denne prosessen må imidlertid utføres flittig for å unngå feil. Ved å lagre SOP for vekstmedier som en metode på XPR-vekten din, vil vekten be deg om hver ingrediens ved navn og med ønsket mengde. Når du har veid ingrediensen, lagres vektresultatet og ingrediensnavnet automatisk i den innebygde resultatprotokollen som du kan se når som helst. Vekten tarer automatisk og ber deg om neste ingrediens.
På XPR-vektene våre lagres vektene til vekstmedieingrediensene automatisk i den innebygde resultatprotokollen og kan vises når som helst. De endelige resultatene kan skrives ut eller overføres til en PC.
Den beste vekten avhenger av applikasjonen din og dine nøyaktighetskrav. Når du velger vekt, må du vurdere:
I metrologitermer er disse hensynene nødvendige for å definere minimumsvektkravet, vektens kapasitet og det sikre veieområdet. METTLER TOLEDOs gratis GWP-anbefalingstjeneste® hjelper deg med å velge riktig vekt for dine behov og avgjør om din eksisterende vekt er egnet til formålet.
XPR-vekter har kvalitetssikringsfunksjoner, slik at du kan være sikker på at vekten er i vater og at rutinetester er oppdatert før du begynner å veie. Vektstatusen indikeres av statuslyset™ som er innebygd foran på vektterminalen. Med et øyeblikk kan du se at grønt betyr at det er trygt å veie, gult er en advarsel og feil vises i rødt.
Det innebygde rutinetestbiblioteket inneholder tilpassbare maler for eksentrisitet, repeterbarhet og sensitivitetstester. En oversikt over alle rutinemessige tester opprettholdes for å gi sporbarhet.
LabX-laboratorieprogramvare gir maksimal støtte for samsvar. Ved å implementere SOP-ene dine i LabX kan du være sikker på at alle brukere følger de samme prosedyrene for forberedelse av vekstmedier. Programvaren kan også administrere alle kvalitetssikringsfunksjoner, inkludert planlegging av rutinemessige tester og blokkering av vekten fra bruk om nødvendig. Alle resultater og prosessinformasjon lagres sikkert i en sentral database for å sikre sporbarhet og hjelpe til med FDA CFR del 11-samsvar.
Når en vekt ikke setter seg, er det stor sjanse for at veiecellen blir påvirket av elektrostatiske ladninger eller lufttrekk.
Elektrostatiske ladninger kan bygge seg opp på beholdere og prøver gjennom normal håndtering, slik at du ikke gjør noe galt. Noen ganger er vekten i stand til å sette seg, men vektverdien som vises på vekten er kanskje ikke den sanne mengden av stoffet som er tilsatt, noe som kan forklare hvorfor reproduserbarheten er dårlig. For å fjerne elektrostatiske ladninger fra beholdere og prøver, kan frittstående ionisatorer plasseres ved siden av vekten.
Løsningsproblemer kan også oppstå ved bruk av sikkerhetsskap eller avtrekkshette.
I slike miljøer kan turbulente eller laminære lufttrekk påføre veiecellen en kraft som hindrer vekten i å sette seg og påvirke repeterbarheten.
SmartPan-veieskålen på XPR-presisjonsvekter minimerer effekten av lufttrekk på veiecellen. SmartPan gir høyere stabilitet enn en standard veiepanne, slik at resultatene kan leveres opptil dobbelt så raskt og forbedre repeterbarheten.
XPR-vekter inneholder funksjoner for å konfigurere prøveetiketter med all informasjonen du trenger, inkludert automatisk beregning av utløpsdatoen. Til og med strekkoder kan legges til. Etiketten kan skrives ut automatisk på slutten av forberedelsesprosedyren for kulturmediet. METTLER TOLEDOs etiketter tåler temperaturene i autoklavsteriliseringsprosesser.
En god idé er å inkludere strekkodeetiketter på ingrediensene dine for å identifisere hver prøve unikt. XPR-vekter støtter strekkodelesere; Ingrediensstrekkoden skannes før den tilsettes vekstmedieblandingen, slik at det er enkelt å sjekke at du har riktig ingrediens. Ved å koble XPR-saldoen din til LabX, vil det bli gitt en advarsel hvis du skanner den samme strekkoden på nytt, slik at det ikke er mulig å tilsette den samme ingrediensen to ganger.
LabX-laboratorieprogramvaren integreres enkelt med LIMS for å muliggjøre toveis overføring av informasjon mellom LIMS og instrumentene som er koblet til LabX, inkludert vekter som brukes til forberedelse av vekstmedier.
