
1. Chuẩn bị dung dịch chuẩn hiệu chuẩn
1.1 Chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc
Các dung dịch chuẩn gốc riêng lẻ thường được chuẩn bị ở nồng độ 1 mg/mL. Lượng dung dịch chuẩn tham chiếu thuốc bảo vệ thực vật nguyên chất cần thiết (thường là 10 - 50 mg) nên được cân bằng cân điện tử hoặc cân phân số 4 hoặc 5 chữ số thập phân, tùy thuộc vào phương pháp. Chuyển vào bình định mức thích hợp, hòa tan trong dung môi thích hợp và thêm nước đến thể tích cần thiết để đạt được nồng độ mong muốn. Ghi nhãn bình với tất cả thông tin liên quan. Dung dịch chuẩn tham chiếu dạng lỏng có thể được phân phối theo khối lượng, trực tiếp vào dung môi. Cũng có thể mua dung dịch chuẩn tham chiếu thuốc bảo vệ thực vật đã pha sẵn, nếu chúng được chứng nhận bởi nhà sản xuất hoặc bởi một nguồn độc lập.
1.2 Chuẩn bị dung dịch trung gian/ dung dịch chuẩn làm việc
Dung dịch chuẩn làm việc thường có nồng độ rất thấp, trong khoảng 0,005 – 0,01 µg/mL. Để đạt được nồng độ thấp như vậy, có thể cần phải tạo dung dịch trung gian và pha loãng thêm để đạt được nồng độ cần thiết. Đối với phương pháp đa dư lượng, cần pha trộn nhiều dung dịch chuẩn thuốc trừ sâu. Trộn các lượng dung dịch chuẩn gốc thích hợp để tạo ra nồng độ cần thiết để so sánh với mẫu cần phân tích.
2. Chuẩn bị chiết xuất của mẫu
Chuẩn bị mẫu để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật là một quy trình phức tạp và phụ thuộc vào loại mẫu, thuốc trừ sâu đang được điều tra và nguy cơ lây nhiễm chéo. Trong một ma trận mẫu phức tạp, cần phải loại bỏ các nhiễu không mong muốn để tập trung vào hàm lượng thuốc trừ sâu. Các kỹ thuật chuẩn bị chiết xuất phổ biến để phân tích dư lượng thuốc trừ sâu là QuEChERS (Nhanh, Dễ dàng, Giá rẻ, Hiệu quả, Chắc chắn và An toàn) và Chiết xuất dung môi tăng tốc (ASE).
Chuẩn bị mẫu để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật là một quy trình phức tạp và phụ thuộc vào loại mẫu, loại thuốc trừ sâu đang được nghiên cứu và nguy cơ nhiễm chéo. Trong một nền mẫu phức tạp, cần phải loại bỏ các tạp chất không mong muốn để tập trung vào hàm lượng thuốc trừ sâu. Các kỹ thuật chuẩn bị chiết xuất phổ biến để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật là QuEChERS (Nhanh, Dễ, Rẻ, Hiệu quả, Chắc chắn và An toàn) và Chiết xuất dung môi tăng tốc (ASE).
3. Đo bằng GC-MS / LC-MS
Mẫu thường được phân tích bằng sắc ký khí (GC) hoặc sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) kết hợp với khối phổ (MS) để xác định và định lượng thuốc trừ sâu hiện diện. Các mẫu đã chiết được đưa vào máy phân tích theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
4. Đánh giá và lưu trữ dữ liệu
Kết quả từ mẫu được so sánh với kết quả từ dung dịch chuẩn làm việc để xác định và định lượng thuốc bảo vệ thực vật trong mẫu. Việc này thường được thực hiện tự động bởi máy phân tích, cho kết quả theo đơn vị mg/kg. Để tuân thủ các quy định về giới hạn thuốc trừ sâu, hàm lượng của mỗi dư lượng không được vượt quá MRL tương ứng của thị trường mục tiêu. Kết quả phải được ghi chép đầy đủ để đảm bảo khả năng truy xuất nguồn gốc.