Kalibrasi UV VIS

Spektrofotometer UV/VIS Excellence diuji berdasarkan prosedur yang ditentukan dalam Farmakope Amerika Serikat (USP) 43 – NF 38 dan Farmakope Eropa (Ph. Eur.) Ed. 10. Pengujian mencakup parameter berikut:

• Keakuratan panjang gelombang
• Keakuratan fotometrik
• Kemampuan pengulangan fotometrik
• Linearitas fotometrik*
• Cahaya bias
• Resolusi

Selain itu, parameter yang tidak diperlukan baik pada USP atau Ph. Eur. juga diuji:

• Kemampuan pengulangan panjang gelombang
• Suara fotometrik
• Kerataan dasar
• Penyimpangan fotometrik

Pengujian lengkap dilakukan untuk memastikan bahwa semua aspek performa spektrofotometer dinilai. Spektrofotometer UV7 Excellence kami mematuhi persyaratan ketat yang dijelaskan secara lebih rinci di bawah ini.

*Linearitas fotometrik tidak lagi secara eksplisit disebutkan dalam edisi ke-43. Keakuratan fotometrik harus diuji pada rentang operasional yang dimaksud. Oleh karena itu, METTLER TOLEDO masih merekomendasikan uji linearitas fotometrik.

Keakuratan panjang gelombang menilai kemampuan instrumen untuk memproduksi kembali panjang gelombang dengan tetap. Pengukuran keakuratan panjang gelombang dapat mengetahui adanya ketidakselarasan pada sumbu panjang gelombang.

Penentuan keakuratan panjang gelombang pada materi referensi yang tepat harus menunjukkan puncak yang sempit dan jelas. Solusi oksida holmium sering digunakan untuk tujuan ini.

USP dan Ph. Eur. menyatakan kriteria persetujuan yang berbeda, tergantung pada materi referensi yang digunakan dan kisaran panjang gelombangnya. Untuk materi referensi cairan, kriteria berikut berlaku:

USP: ±1 nm di bawah 400 nm; ±2 nm di atas 400 nm
Ph. Eur.: ±1 nm di bawah 400 nm; ±3 nm di atas 400 nm

Berdasarkan USP dan Ph. Eur., presisi panjang gelombang, atau kemampuan pengulangan, tidak diperlukan untuk spektrofotometer berbasis susunan. Karena ketiadaan komponen bergerak, instrumen berbasis susunan tidak terpengaruh oleh ketidakselarasan di antara pengukuran.

Keakuratan fotometrik adalah ukuran kemampuan instrumen untuk mengukur penyerapan secara tepat, lalu mengembalikan nilai penyerapan sedekat mungkin dengan nilai aslinya.

Keakuratan fotometrik dapat ditentukan dengan mengukur penyaring padat atau cair nilai konsentrasi dan penyerapan yang diketahui, lalu membandingkan penyerapan yang diukur terhadap nilai referensi penyerapan.

Solusi 60 mg/L potasium dikromat (PDC) digunakan untuk bagian ultraviolet, sementara penyaring kepadatan netral (ND) 0,5 (ND) mencakup kisaran yang terlihat. Kriteria persetujuan untuk kedua farmakope sama dan bergantung pada tingkat penyerapan materi referensi.

PDC: ±0,010 A di bawah 1,0 A; ±1,0% (0.010*A) di atas 1,0 A
ND: ±0,008 A di bawah 1,0 A; ±0,8% (0.008*A) di atas 1,0 A

Berdasarkan USP dan Ph. Eur., presisi panjang gelombang, atau kemampuan pengulangan, tidak diperlukan untuk spektrofotometer berbasis susunan. Karena ketiadaan komponen bergerak, instrumen berbasis susunan tidak terpengaruh oleh ketidakselarasan di antara pengukuran.

Kemampuan pengulangan fotometrik, yang juga disebut sebagai presisi fotometrik oleh USP, adalah kapasitas spektrofotometer untuk mengembalikan nilai penyerapan terhadap beberapa pengukuran dengan cara yang andal dan dapat diulang.

Materi referensi yang sama digunakan untuk menentukan keakuratan fotometrik yang digunakan. Penyaring diukur enam kali dan penyimpangan standar terhadap semua pengukuran dihitung untuk menilai kemampuan pengulangan.

Penyimpangan standar, yang tidak boleh melebihi 5 mA di bawah 1 A atau 0,5% di atas 1 A, apa pun materi referensi atau kisaran panjang gelombang yang digunakan.

Catatan: kemampuan pengulangan fotometrik tidak diwajibkan oleh Ph. Eur.

Linearitas fotometrik adalah ukuran linearitas nilai yang diukur (mis. penyerapan) sebagai fungsi peningkatan konsentrasi. Hal ini penting terutama untuk aplikasi kuantitatif.

Linearitas fotometrik dapat ditentukan dengan prosedur dan penyaring sama yang digunakan untuk menentukan keakuratan fotometrik, namun tidak sama pada tiga konsentrasi/penyaring berbeda yang mencakup 0 A dan 2 A.

USP dan Ph. Eur. menyatakan kriteria persetujuan yang berbeda untuk linearitas fotometrik:

Ph. Eur.: korelasi koefisien R2 harus melebihi 0,999.
USP: nilai yang diukur pada semua konsentrasi/penyaring harus memenuhi kriteria keakuratan fotometrik.

Cahaya bias adalah cahaya yang mencapai detektor, yang bukan bagian dari analisis. Cahaya ini menyebabkan bias pada panjang gelombang terkait, namun tidak berasal dari kontribusi sampel yang diukur. Oleh sebab itu, penyerapan sampel diubah dengan cahaya bias dan hasil sampel menyertakan kesalahan sistematis.

Cahaya bias ditentukan dengan mengukur penyaring cut-off (solusi potasium klorida cair) menggunakan metode panjang gelombang tertentu (SWM) dan metode rasio penyaringan solusi (SFRM).

Kriteria persetujuan yang dinyatakan USP dan Ph. Eur. untuk KCl adalah sebagai berikut:

SWM: Amax ≥ 2,0 A
SFRM: Amax ≥ 0,7 A

Resolusi adalah daya pisah spektrofotometer UV Vis dan kemampuannya untuk membedakan struktur yang bersebelahan dalam spektrum.

Resolusi ditentukan dengan mengukur solusi Toluena dalam n-Heksana. Penyerapan minimum maupun maksimum puncak yang tajam dan tampak jelas digunakan untuk penilaian resolusi.

USP menyatakan bahwa rasio antara penyerapan minimum dan maksimum pada masing-masing panjang gelombang 267 maupun 269 nm harus melebihi 1,3 untuk memberikan resolusi yang cukup, sebagaimana dinyatakan pada kriteria persetujuan Ph. Eur. pada monograf individu.

Tidak seperti pemindaian spektrofotometer UV Vis, instrumen berbasis susunan tidak memiliki celah fisik, yang secara mekanis menentukan bandwidth spektral (SBW) instrumen. SBW pada instrumen susunan yang setara dapat dihitung dari resolusi instrumen.
Misalnya, resolusi spektrofotometer UV7 Excellence adalah ≥ 1,9, yang berkaitan dengan SBW ≤ 1,0 nm.

Pengujian yang dijelaskan di atas dapat dilakukan, baik secara manual maupun otomatis, namun metode manual memiliki risiko penurunan keakuratan bawaan. Alur kerja manual menghabiskan banyak waktu dan rentan terhadap kesalahan. Verifikasi performa otomatis menawarkan manfaat berikut:

• Hasil lebih cepat dengan dokumentasi dan validasi hasil yang dapat dilacak.
• Pelaksanaan alur kerja dan kesalahan transkripsi data dapat dihindari, sehingga pengujian tidak perlu diulang.
• Kepatuhan terhadap standar data integritas. Ini adalah manfaat signifikan terkait manajemen data sesuai FDA.
• Laba atas investasi yang cepat berkat meningkatnya produktivitas dan keamanan.

Kepatuhan terhadap regulasi adalah tujuan utama bagi semua produsen farmasi dan penyuplainya. Berdasarkan GMP, metode pemrosesan dan analisis produksi harus divalidasi, sementara di saat yang sama peralatan yang digunakan untuk produksi dan kontrol kualitas memerlukan kualifikasi.

Guna mendukung pelanggan dalam memenuhi persyaratan kepatuhan ini, METTLER TOLEDO menawarkan EQPac untuk Spektrofotometer UV/VIS Excellence. EQPac adalah solusi servis yang khusus dirancang untuk menangani masalah kepatuhan di lingkungan regulasi yang semakin ketat dewasa ini. EQPac memberikan pemasangan dan servis kualifikasi di lokasi serta didokumentasikan sepenuhnya untuk memastikan kepatuhan terhadap regulasi dan pengoperasian yang andal.

Ketahui lebih lanjut tentang servis kualifikasi peralatan dan servis kalibrasi spektrofotometer UV/VIS kami.