Espectrofotômetro UV/VIS

A espectroscopia UV/VIS é uma técnica simples e comumente usada com base na absorção de luz em uma determinada amostra. Dependendo da quantidade de luz e comprimento de onda absorvida pela amostra, podem ser obtidas informações valiosas, como a concentração ou pureza de uma amostra, por exemplo, no espectro de cafeína abaixo. Além disso, como cada substância absorve a luz de maneira diferente, existe uma relação única e específica entre a substância e seu espectro UV/VIS. A espectrofotometria pode, então, ser usada para identificar uma substância.

Um espectrofotômetro UV/Vis mede a intensidade da luz que passa através de uma solução de amostra em uma cubeta e a compara com a intensidade da luz antes de passar pela amostra. Os principais componentes de um espectrofotômetro de UV/VIS são uma fonte de luz, suporte de amostra, dispositivo dispersivo para separar os diferentes comprimentos de onda da luz e um detector adequado, por exemplo, um detector de fotodiodo.

Existem cinco motivos principais pelos quais os espectros de UV/Vis são medidos:

• Os espectros de UV/VIS identificam os componentes presentes em uma solução de amostra. Mais precisamente, a posição do pico, e até certo ponto o perfil do espectro, permite a identificação de compostos específicos.
  
• Os picos de absorção podem ser usados para quantificar a amostra investigada. Por exemplo, a concentração da amostra pode ser calculada a partir do valor de absorbância do pico.
  
• Com base na relação entre a absorbância e a concentração da amostra, um Espectrofotômetro UV/VIS é usado para técnicas analíticas quantitativas em segmentos de mercado como Biotecnologia, Farmacêutica, Cosméticos, Alimentos e Bebidas, Ensaios Químicos e de Água.
  
• O espectro pode revelar propriedades físicas específicas das moléculas da amostra e torna possível calcular o coeficiente de extinção da amostra, calcular o ponto de fusão de proteínas e ácidos nucleicos medindo os espectros de UV/VIS a diferentes temperaturas e determinar a taxa de uma reação. monitorando os espectros de absorção em função do tempo.
  
• A posição e o perfil dos picos no espectro podem fornecer informações sobre o ambiente microscópico das moléculas da amostra.

• O comprimento de onda fixo é a aplicação mais simples de um espectrofotômetro. É uma medição de comprimento de onda único ou múltiplo e o resultado pode ser relatado em absorbância ou transmitância.
  
• A determinação da quantificação ou concentração de uma substância por um espectrofotômetro de UV/VIS baseia-se na Lei de Lambert-Beer, que estabelece que a absorbância de uma solução é diretamente proporcional à concentração da substância absorvente na solução e ao percurso óptico da cubeta. Assim, um espectrofotômetro UV/VIS pode ser usado para determinar a concentração de uma amostra.
  
• As medições de varredura espectral determinam a absorbância ou transmitância de uma amostra ao longo de um intervalo de comprimento de onda especificado ou ao longo da faixa completa do espectro, normalmente de 190 a 1.100 nm. A análise mais comum é a detecção de picos e vales.
  
• Utiliza-se frequentemente um espectrofotômetro de UV/VIS para monitorizar a alteração da concentração do reagente ou do produto medindo a absorbância a um comprimento de onda específico ao longo do tempo. Estes métodos cinéticos são frequentemente usados para estudar as taxas de reação enzimática ou para determinar a concentração de carboidratos específicos, como glicose, frutose ou lactose.

• Um espectrofotômetro de varredura mede cada comprimento de onda separadamente e, portanto, leva um tempo significativamente maior. Um espectrofotômetro de matriz mede o espectro total em um curto período de tempo, pois todos os comprimentos de onda são medidos pelo detector de matriz.
  
• Um espectrofotômetro de varredura varre o espectro com elementos de rotação mecânica. Isso pode levar a erros na reprodutibilidade do comprimento de onda. Um instrumento de espectroscopia de varredura, portanto, requer uma recalibração regular para garantir a precisão do comprimento de onda. Um espectrofotômetro de matriz não inclui nenhuma peça óptica móvel, o que significa desvios de desempenho ao longo do tempo devido a imprecisões mecânicas não ocorrerão.
  
• Um espectrofotômetro de matriz não requer um compartimento de amostra fechado porque é imune à luz ambiente devido ao seu design ótico.

Nosso portfólio de espectrofotometria foi projetado para se encaixar em vários segmentos da indústria:

• Os espectrofotômetros UV5Bio e UV5Nano são normalmente usados em Farmacêutica, Biociências, Biotecnologia e Academia.
  
• Os espectrofotômetros UV7 e UV5 são normalmente usados em produtos Farmacêuticos, Alimentos e Bebidas, Produtos Químicos, Cosméticos, Petroquímica e Academia.

Um espectrofotômetro de microvolume realiza medições usando pequenos volumes de amostra (tão baixo quanto 1 microlitro). Amostras altamente concentradas também podem ser medidas sem diluição adicional devido à tecnologia LockPath no UV5Nano da METTLER TOLEDO, que pode definir o comprimento do caminho em 0,1 ou 1 mm.

• Os Espectrofotômetros UV5Nano e UV5Bio da METTLER TOLEDO oferecem uma grande coleção de aplicações de Biociências, como:
  
  • Análise qualitativa de DNA, RNA e proteínas
    
  • Análise quantitativa de DNA, RNA e proteínas
    
  • BCA, Bradford, Lowry e outros testes de proteína colorimétrica
    
  • Corantes pré-configurados e opção para adicionar corantes personalizados
    
  • Calculadora Oligo para a determinação da concentração de oligos de DNA e RNA
    
  • OD600 para células vivas
    
• Além disso, os espectrofotômetros UV5Bio e UV7 oferecem métodos cinéticos para a realização de cinética enzimática.
  
• Para obter mais informações sobre aplicações de Biociências com os espectrofotômetros da METTLER TOLEDO, faça o download da caixa de ferramentas de Biociências.

A METTLER TOLEDO oferece uma solução para verificação de desempenho na forma da unidade CertiRef™, que é a maneira mais eficiente de verificar se o seu espectrofotômetro está funcionando de acordo com a regulamentação da farmacopeia. Este acessório executa automaticamente testes de precisão e repetibilidade de comprimento de onda, precisão e repetibilidade fotométrica, resolução, luz difusa, ruído fotométrico e desvio, bem como nivelamento da linha de base.

O software LabX da METTLER TOLEDO permite que os usuários tenham maior flexibilidade criando fluxos de trabalho personalizados exatamente para as necessidades do usuário. Erros de cálculo e transcrição são completamente evitados. Ele também garante a integridade dos dados com todas as informações armazenadas com segurança em um banco de dados seguro, incluindo todas as verificações e serviços de desempenho. Com recursos de segurança, como assinaturas eletrônicas e gerenciamento de usuários, ele ajuda a cumprir os regulamentos 21 CFR Parte 11 do FDA.