Pipetta ellenőrzés és pipetta kalibrálás

A pipetta egy olyan laboratóriumi eszköz, amellyel kis mennyiségű mért folyadék szállítható pontosan a minta felszívásával és adagolásával. Napjainkban a pipetták többsége dugattyús pipetta, amely részleges vákuumot hoz létre a folyadék felett a folyadék felszívásához, ezáltal nincs mechanikus érintkezés.

További információk: Rainin pipetták

A pipetta kalibrálását akkreditált intézmény végzi. A kalibrálás során meghatározzák a várt térfogatot és a pipettával leszállított tényleges térfogatot, figyelembe véve a hozzá tartozó mérési bizonytalanságot. A cél annak igazolása, hogy a pipetta a gyártói specifikációnak vagy az ISO8655 előírásainak megfelelően továbbra is pontos eredményeket biztosít. A tűréshatáron kívül eső pipetták esetében gyakran lehetőség van szervizésre, beállításra és újrakalibrálásra.
További információk: Rainin pipettaszerviz

A dugattyús pipettákat jellemzően kémiai, biológiai, klinikai és orvosi területeken használják, ahol folyadékmintákat kell venni, majd gyakran pontos és kis mennyiségekben további célokra szállítani kell (pl. hígítás, kutatás, elemzés).

Íme néhány, a dugattyús pipettákkal kapcsolatos gyakori pipettázási technika és jellemző hiba, valamint kiküszöbölési módjuk.

1. Helytelen merülési mélység
   Helyes merülési mélységgel akár 5%-kal javítható a pontosság. A hegyet mikrotérfogatú pipetták esetében 1-2 mm-re, normál tartományú pipetták esetében legfeljebb 3-6 mm-re szabad bemeríteni a hegyméret függvényében. Ha a hegy merülési mélysége túl nagy, akkor a hegyben lévő gáz térfogata összetömörül, ami túl sok folyadék felszívásához vezet.
   
   
2. Hegytelen pipettázási szög
   A mintában lévő pipettahegy merülési szögének a lehető legközelebb kell lennie a függőlegeshez, és nem térhet el ettől 20 foknál nagyobb mértékben. Vízszintes szög esetében túl sok folyadék kerül a hegybe, ami pontatlan felszívást eredményez. 30 fokos függőlegestől történő eltérés esetén akár 0,7%-kal több folyadék felszívására kerülhet sor.
   
   
3. Következetlen adagolás
   Nagyobb fokú pontosság és minták közötti jobb reprodukálhatóság úgy érhető el, ha ügyel arra, hogy az utolsó megmaradt csepp is elhagyja a pipettát, ne maradjon a hegy végében. A legtöbb alkalmazás esetében a hegy végével történő adagolás javasolt úgy, hogy a hegy a tartály falának van támasztva. Így minimalizálható a hegyben maradt minta mennyisége, illetve teljesen kiküszöbölhető a hiba. Ez a módszer legalább 1%-kal növelheti a pontosságot.
   
   
4. Előzetes öblítés elmaradása
   Amikor pipettával adagol folyadékot, a hegyen vékony folyadékréteg rakódik le, aminek következtében a szükségesnél kevesebb lesz a kiadagolt térfogat. Használat előtt legalább kétszer öblítse át az új pipettát a használni kívánt folyadékkal, így kondicionálhatja a hegy belsejét a folyadékhoz.
   
   
5. Következetlen pipettázási ritmus
   Állandó pipettázási ritmust kövessen minden minta esetében. Kerülje a sietős vagy gyors tevékenységet, és tartsa ugyanazt a ritmust a pipettázási ciklus minden lépésében.
   
   További információk: Helyes pipettázási gyakorlat

A pipetta pontosságát rendszeresen ellenőrizni kell a kalibrálások között, így elkerülhető, hogy tűréshatáron kívül eső eredmények szülessenek két kalibrálás között. A pipetta ellenőrzéséhez legalább a névleges térfogatot ki kell adagolni 4-6 alkalommal egy pontos analitikai mérlegen lévő főzőpohárba. Az átlagos térfogat és az eltérés az ISO8655 szabvány szerinti képletekkel számítható ki. A beépített alkalmazással vagy számítógépes szoftverrel rendelkező mérlegek alig néhány másodperc alatt automatikusan rendelkezésre bocsátják a megfelelőségi értéket.

További információk: Pipetta-ellenőrzés

A pipetta pontosságát rendszeresen ellenőrizni kell a kalibrálások között, így elkerülhető, hogy tűréshatáron kívül eső eredmények szülessenek két kalibrálás között. A pipetta ellenőrzéséhez legalább a névleges térfogatot ki kell adagolni 4-6 alkalommal egy pontos analitikai mérlegen lévő főzőpohárba. Az átlagos térfogat és az eltérés az ISO8655 szabvány szerinti képletekkel számítható ki. A beépített alkalmazással vagy számítógépes szoftverrel rendelkező mérlegek alig néhány másodperc alatt automatikusan rendelkezésre bocsátják a megfelelőségi értéket.  

A pipetta kalibrálása kimutatja a várt és a tényleges térfogat közötti eltérést, amelynek adott tűréshatáron belül kell lennie. Tűréshatáron kívül eső pipetta nem megfelelő híguláshoz és végül helytelen elemzési eredményekhez vezethet. Ennek következtében az eredményeket nem lehet reprodukálni, és a teljes elemzést újra végre kell hajtani. Tűréshatáron kívül eső pipetta korai észleléséhez javasolt a pipetta pontosságát kalibrálások között is ellenőrizni, így elkerülhető, hogy a probléma csak a következő kalibráláskor derüljön ki.

A pipetta kalibrálását akkreditált intézmény végzi. A kalibrálás során meghatározzák a várt térfogatot és a pipettával leszállított tényleges térfogatot, figyelembe véve a hozzá tartozó mérési bizonytalanságot. A cél annak igazolása, hogy a pipetta a gyártói specifikációnak vagy az ISO8655 előírásainak megfelelően továbbra is pontos eredményeket biztosít. A tűréshatáron kívül eső pipetták esetében gyakran lehetőség van szervizésre, beállításra és újrakalibrálásra.

A tisztítás megkezdése előtt először olvassa el a gyártói kézikönyvet, mivel az anyag ellenállása márkánként eltérő lehet. A megfelelő tisztításhoz a dugattyús pipettákat szét kell szedni. A hegyledobó kar és a henger általában egyszerűen lecsavarozható kézzel a pipetta kinyitásához. Vigyázat: a rugónyomás miatt az alkatrészek kiugorhatnak. Az alkatrészek általában enyhe szappanos, desztillált vízbe mártott törlőkendővel, illetve izopropil-alkoholos vagy etanolos oldat használatával tisztíthatók meg. Ügyeljen rá, hogy a folyadékok ne kerüljenek be a szárba, és pipettázás során is kerülje a dugattyú és a tömítés szennyeződését. Sterilizáláshoz vagy autoklávozáshoz tekintse meg a kézikönyvet, hogy az eljárás az adott pipettamodell esetén elvégezhető-e. A pipetta megtisztítása után ellenőrizni kell, hogy a tűréshatáron belül van-e. Szerviz után általában egy pipetta-szervizelési szakember elvégzi a kalibrálást, hogy ellenőrizze és igazolja, hogy a pipetta a tűréshatáron belül van.