CytoDirect egyszerűsíti a sejtszámlálást a Berni Egyetemen

A pontosság és a termelékenység növelése az mRNS-kutatásban a METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counterrel

A CytoDirect egyszerűsíti a sejtszámlálást a Berni Egyetemen, ahol a Mühlemann laboratórium a pontos, reprodukálható eredményekre támaszkodik az mRNS-kutatás előmozdítása érdekében. Annak megértése, hogy a sejtek miként döntik el, mely genetikai üzenetek érvényesek, hogyan dolgozzák fel azokat, és hogy fehérjékké fordítódnak-e le, alapvető fontosságú a betegségek molekuláris alapjainak feltárásához. Az e területen végzett kutatás minden szakaszban rendkívül szigorúan kontrollált kísérleti feltételeket igényel. Az inkonzisztens sejtszámolás hibákat visz a downstream kísérletekbe, veszélyezteti az adatintegritást, és jelentős időveszteséget okoz a kutatóknak. A Mühlemann laboratórium a METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Countert vezette be ennek a változékonyságnak a kiküszöbölésére, jelentősen javítva folyamatai megbízhatóságát és hatékonyságát.

A Mühlemann laboratóriumról

A Mühlemann laboratórium olyan poszttranszkripciós mechanizmusokat vizsgál, amelyek az emlőssejtekben szabályozzák a génexpressziót. Kutatásainak központi témája az értelmetlen mRNS lebomlás (nonsense-mediated mRNA decay, NMD), egy kulcsfontosságú RNS-felügyeleti útvonal, amely eltávolítja a hibás транszkripteket, és finomhangolja számos normál gén kifejeződését. A labor azt is tanulmányozza, hogyan állnak össze az újonnan szintetizált pre-mRNS-ek RNS-kötő fehérjékkel, olyan folyamatok, amelyek befolyásolják az mRNS-szlicinget, -exportot és -stabilitást. A csapat a CytoDirect Cell Countert használja a pontos és reprodukálható sejtszámláláshoz, hogy támogassa ezt a munkát, jelentősen javítva a napi működés pontosságát és hatékonyságát.

A pontos sejtszámlálás fontossága már elsőre

A Mühlemann laboratóriumnak a munkafolyamat több szakaszában is megbízható sejtszámlálásra van szüksége, beleértve a rutin emberi szuszpenziós sejttenyészetek fenntartását és a kísérletek előtti sejtbegyűjtést is. Korábban a csapat egy brightfield képalapú sejtszámlálót használt a sejtsűrűség meghatározására osztáshoz és hígításhoz. Idővel azonban jelentős szórást és következetlenségeket kezdtek tapasztalni a számlálásokban, ami csökkentette az eredményekbe vetett bizalmat. Nikolaos Kouvelas, a Mühlemann laboratórium PhD-hallgatója így magyarázta: „Nagy térfogatú, szuszpenzióban növesztett sejtekkel dolgozunk, és rendkívül fontos, hogy a lehető legpontosabban számoljuk meg őket, amikor kísérletekhez begyűjtjük őket, de gyakran azt tapasztaltuk, hogy a sejtszámaink nagyon pontatlanok voltak.”

Bizonyos esetekben a csapattagok több ismételt számlálást is végeztek ugyanarra a mintára, hogy nagyobb biztonsággal ítélhessék meg az eredményeket, ami jelentős kézi munkát igényelt. Nicole Kleinschmidt, a Mühlemann laboratórium laborvezetője megjegyezte: „A szuszpenziós számlálás egyszerűen nem volt elég pontos. Néhány kutatónk szélsőséges esetben elkezdett öt-nyolc ismételt számlálást végezni egyetlen sejtvonalnál.”

Ezeknek a hatékonysági hiányosságoknak a következtében a csapat alternatív technológiák értékelésébe kezdett, kifejezetten egy olyan rendszert keresve, amely alapvetően eltérő számlálási elven működik, és képes áthidalni a pontossággal és precizitással kapcsolatos kihívásaikat, miközben javítja a labor általános termelékenységét.

Csúcstechnológia pontos eredményeket nyújt

Az innovatív, holografikus mikroszkópiát és gépi tanulást ötvöző megközelítés felkeltette az érdeklődésüket, ezért a labor úgy döntött, hogy kipróbálja a Cytodirect Cell Countert, hogy kezelje a korábbi rendszereknél tapasztalt pontossági korlátokat. A CytoDirect Cell Counter megbízhatóbb és reprodukálhatóbb eredményeket ad. Egy mérés során sokkal nagyobb felületet elemez, mint a labor korábbi műszere, így csökkenti a számlálások szórását, és megszünteti a mintánkénti ismételt mérések szükségességét. Nikolaos így fogalmazott: „Korábban ki kellett választanunk egy területet a számláláshoz, de a különböző területek között nagy eltérés volt. Ezért különböző területeket számoltunk meg, majd átlagoltunk, de ez nagyon pontatlan volt. A CytoDirect esetében a nagy felület nagy előny. És időérzékeny kísérletekben az is jó, hogy gyorsabb.”

CytoDirect egyszerűsíti a sejtszámlálást a Berni Egyetemen

„A műszer nagyon könnyen használható. Már az első használatkor azonnal tudtam, hogyan kell kezelni. Az is tetszik, hogy a sejtek megszámlálása előtt nem kell festéket adni a mintához; így nagyon gyors. És óriási előny, hogy csak egyszer kell megszámolnunk, nem pedig több alkalommal megismételni.”
Marc Thierry Rotzetter, master’s student in the Mühlemann laboratory

Intuitív felhasználói felület és egyszerűsített munkafolyamat

A csapat nagyra értékeli a műszer intuitív kialakítását és egyszerű munkafolyamatát. A felhasználóbarát kezelőfelület lehetővé teszi, hogy még az új laboratóriumi tagok is minimális betanítással használják a rendszert, csökkentve a képzési időt, és magabiztos, könnyed bevezetést téve lehetővé. Marc Thierry Rotzetter, a Mühlemann laboratórium mesterképzéses hallgatója így magyarázta: „A műszer nagyon könnyen használható. Már az első alkalommal is azonnal tudtam, hogyan kell kezelni. Tetszik az is, hogy számlálás előtt nem kell festéket adni a sejtekhez; ez nagyon gyors. És óriási előny, hogy csak egyszer kell megszámolnunk őket, ahelyett hogy többször megismételnénk.”

Karin Schranz, biológiai biztonsági felelős és a sejttenyésztés vezetője a Mühlemann laboratóriumban, így vonta le a következtetést: „Manapság nincs kétségünk a számlálás következetességét illetően. A műszert alaposan teszteltük, és bízunk az eredményekben.”

„Manapság már nincs kétségünk a számlálás konzisztenciáját illetően. A (CytoDirect) műszert alaposan leteszteltük, és bízunk az eredményekben.”
Karin Schranz, Biosafety Officer and Head of Cell Culture in the Mühlemann laboratory

A Mühlemann laboratórium tapasztalatai azt mutatják, hogy a pontos sejtszámlálás közvetlenül hozzájárul a jobb tudományos munkához. A METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counter kiküszöböl egy fontos változékonysági forrást a mindennapi munkafolyamatokból, így a kutatócsoportok már az első számlálástól teljes bizalommal bízhatnak az eredményeikben.

Kapcsolódó termékek és szolgáltatások