Tingkatkan Data Anda dengan Praktik Pemipetan yang Baik

Cairan bertekanan uap tinggi dapat menyebabkan pergeseran konsentrasi yang cepat jika terkena udara terlalu lama. Basahi ujungnya terlebih dahulu, kerjakan dengan cepat, dan tutup wadah bila memungkinkan. Teknik aspirasi yang konsisten, termasuk opsi pemipetan terbalik, dapat membantu menstabilkan volume.

Karena pipet perpindahan positif tidak memiliki celah udara, pipet ini lebih akurat dengan cairan dengan tekanan uap tinggi. Oleh karena itu, mereka direkomendasikan jika akurasi sangat penting untuk aplikasi. 

Memilih pipet yang tepat melibatkan evaluasi kebutuhan Anda. Pertama, jenis sampel apa yang Anda pipet? Apakah mereka berair? Atau apakah mereka kental, mudah menguap, berbusa, korosif, atau berbahaya? Untuk cairan berair dan mendekati air, pipet perpindahan udara yang paling umum (juga disebut pipet "bantalan udara") adalah pilihan yang baik. Untuk jenis cairan kental, mudah menguap, dan tidak biasa lainnya, pipet perpindahan positif akan menjadi pilihan yang lebih baik untuk akurasi dan keamanan. 

Berapa volume yang akan Anda pipet? Berapa banyak sampel yang Anda butuhkan untuk ditransfer dari satu kapal ke kapal lainnya? Lihat laporan resmi tentang pemilihan pipet ini untuk memahami pipet mana yang paling cocok tergantung pada cairan dan faktor lain yang unik untuk situasi Anda.

Uji mikrofluida menuntut akurasi tanpa kompromi. Stabilkan tangan pemipetan Anda, gunakan ujung berkualitas tinggi yang dirancang untuk volume sangat rendah, dan pertimbangkan pemipetan terbalik untuk meningkatkan konsistensi. Kalibrasi reguler, bersama dengan mengontrol faktor lingkungan seperti suhu, mendukung akurasi pada skala ini. 

Pipet Rainin, dipasangkan dengan ujung volume mikro yang direkayasa dengan halus, menawarkan kontrol yang tepat dan andal yang Anda butuhkan untuk mencapai hasil yang sangat baik dalam eksperimen mikrofluida mutakhir.

Saat memipetkan larutan tebal dengan pipet multisaluran, gelembung udara menimbulkan kesalahan volume dan mempersulit pengukuran. Untuk mengurangi risiko gelembung, basahi ujungnya terlebih dahulu dengan menyedot dan mengeluarkan perlahan 2-3 kali. Kemudian, sedot perlahan, pastikan ujungnya terendam sepenuhnya selama penarikan untuk mengurangi kantong udara. Pemipetan terbalik dapat memberikan kontrol tambahan pada sampel rawan gelembung. 

Karena pipet perpindahan positif tidak memiliki celah udara, gelembung cenderung tidak memengaruhi akurasinya. Saat memipetkan banyak alikuot cairan yang membentuk gelembung, pipet repeater elektronik seperti Nanorep akan membantu menghindari masalah. Pipet perpindahan positif manual juga membantu dengan eksperimen throughput yang lebih rendah di mana akurasi itu penting.

Saat menyedot, pegang pipet sedekat mungkin dengan vertikal, hindari sudut yang lebih besar dari 20° dari sumbu Y. Saat mengeluarkan, jika Anda menyentuh dinding bejana target untuk menarik semua cairan sepenuhnya dari ujungnya, tidak apa-apa untuk melebihi sudut 20°.

Pemipetan maju adalah teknik pemipetan standar dan pilihan terbaik untuk sampel berair. Untuk sampel kental dan mudah menguap, pemipetan terbalik memberikan akurasi yang lebih baik.

Untuk memajukan pipet, dorong pendorong ke bawah ke pemberhentian pertama sambil memegang pipet di luar cairan. Kemudian, rendam ujung sedalam 2-10mm ke dalam cairan yang Anda kerjakan – tidak lebih dalam. Lepaskan pendorong secara perlahan hingga ekstensi penuh untuk menyedot volume cairan lengkap. Untuk mengeluarkan ke bejana target Anda, pindahkan pipet ke dalam bejana, lalu tekan pendorong dengan kecepatan yang merata melalui pemberhentian pertama hingga pemberhentian kedua – sejauh pendorong berjalan. Dengan plunger ditekan sepenuhnya, seret perlahan ujung pipet ke atas dinding bejana untuk "menyentuh". Ini membantu mengeluarkan volume cairan penuh sepenuhnya. Lepaskan pendorong, keluarkan ujung pipet, muat ujung pipet baru, dan ulangi.

Untuk membalikkan pipet, dorong plunger sepenuhnya ke bawah melalui pemberhentian pertama ke pemberhentian kedua – sejauh pendorong berjalan. Kemudian, rendam ujungnya dalam cairan dan perlahan dan merata lepaskan pendorong untuk menyedot. Pindah ke bejana penerima dan tekan pendorong HANYA KE PEMBERHENTIAN PERTAMA untuk mengeluarkan volume yang benar. Volume sisa kecil akan tetap ada di ujung pipet. Gerakkan pipet di atas bejana pengeluaran buang dan tekan pendorong sepanjang jalan ke pemberhentian kedua, juga disebut penghentian "ledakan", untuk melepaskan sisa cairan. 

Lepaskan pendorong, keluarkan ujung pipet, muat ujung pipet baru, dan ulangi.

Mencari tips lebih lanjut tentang teknik pemipetan? Dapatkan poster bermanfaat ini untuk lab Anda hari ini! 

Pipet perpindahan udara dapat digunakan untuk mepipet cairan yang sedikit kental, termasuk darah. Untuk mencapai akurasi maksimum, gunakan teknik pemipetan terbalik yang dijelaskan di atas. Untuk cairan yang lebih kental, seperti gliserol 85% atau Triton X-100, pipet perpindahan positif menawarkan akurasi dan konsistensi terbaik.

Cairan yang sedikit mudah menguap seperti etanol dapat dipipet dengan pipet perpindahan udara menggunakan teknik pemipetan terbalik yang disebutkan di atas. Namun, pipet perpindahan positif adalah pilihan yang lebih baik untuk cairan yang mudah menguap. 

Jika menggunakan pipet perpindahan udara, bilas ujung pipet terlebih dahulu (sedot dan keluarkan) setidaknya lima kali sebelum memipetkan volume Anda. Ini menyeimbangkan udara di dalam pipet, memperlambat laju penguapan cairan. Penguapan cepat cairan yang mudah menguap memperluas udara di dalam pipet dan memaksa cairan dari ujung tanpa tekanan apa pun yang ditempatkan pada pendorong, dan ini mengurangi pengiriman volume yang akurat.

Cairan yang mudah menguap seperti asetonitil umumnya lebih baik ditangani dengan pipet perpindahan positif.

Ya, pemipetan dengan pipet perpindahan udara dapat membuat aerosol. Aerosol dapat naik ke bagian dalam pipet dan mencemari dinding interior dan piston. Aerosol terjadi lebih mudah ketika pendorong dilepaskan terlalu cepat selama aspirasi dan juga dapat terjadi ke arah yang berlawanan di luar pipet dengan pengeluaran yang terlalu cepat. 

Untuk meminimalkan aerosol, sedot dan keluarkan secara perlahan dan merata. Gunakan tip yang difilter. 

Pipet perpindahan positif menggunakan ujung gaya jarum suntik yang mencegah aerosolisasi. Pipet perpindahan positif adalah pilihan terbaik untuk memipetkan cairan berbahaya dan cairan apa pun dengan viskositas atau volatilitas tinggi.

Cairan yang sangat dingin atau panas mengubah tekanan udara dalam pipet perpindahan udara, yang menyebabkan pemipetan yang tidak akurat. 

Pipet perpindahan positif, dengan ujung bergaya jarum suntik yang tidak memiliki kantong udara antara cairan dan piston, tidak terpengaruh oleh suhu cairan yang berbeda. Pipet perpindahan positif akan memberikan hasil yang akurat dengan cairan non-suhu kamar.

Jika Anda harus mepipet cairan yang sangat panas atau dingin dengan pipet perpindahan udara, jangan membilas ujung pipet terlebih dahulu—ini biasanya merupakan praktik terbaik untuk akurasi tertinggi. Sebagai gantinya, sedot dan keluarkan dengan cepat untuk meminimalkan efek suhu cairan pada celah udara bagian dalam pipet.

Untuk menghindari gelembung dan berbusa saat memipet, jangan merendam ujungnya lebih dari 10mm dalam reservoir cairan, dan sedot perlahan.

Pemipetan terbalik menawarkan perlindungan tambahan karena, sebelum menyedot, Anda menekan pendorong sepenuhnya ke pemberhentian ke-2, sehingga tidak ada kemungkinan menyuntikkan udara ke dalam sampel cairan. Untuk informasi lebih lanjut tentang pemipetan terbalik, kunjungi halaman ini. 

Pipet perpindahan positif tidak menciptakan gelembung atau busa saat berinteraksi dengan cairan karena ujung bergaya jarum suntiknya tidak menghadirkan udara untuk berinteraksi dengan cairan.

Dekontaminasi pipet dengan menyekanya dengan kain basah dan deterjen seperti isopropanol atau larutan pemutih 10%. Hindari jendela plastik bening mikrometer.

Autoklaf mungkin merupakan pilihan lain, tetapi periksa spesifikasi instrumen pipet Anda. Jika dapat diautoklaf, apakah seluruh instrumen diautoklaf atau hanya ujung  cair? Seringkali, hanya ujung cairan yang dapat diautoklaf.

Untuk lebih lanjut tentang membersihkan pipet, dapatkan poster Membersihkan Pipet.

Bahan kimia reaktif harus ditangani dengan hati-hati. Gunakan ujung segar dan lembam dan semprotkan bagian luar pipet dengan etanol secara teratur untuk menghilangkan percikan dan residu. Cegah kontak ujung dengan permukaan dan sesering mungkin ganti ujung pipet untuk mencegah kontak silang.

Dikenal luas karena keterlibatan ujungnya yang aman dan kontrol pendorong yang mulus, pipet Rainin mendukung transfer yang aman dan bebas kontaminasi bahkan saat bekerja dengan reagen reaktif yang menantang.

Akurasi pipet—atau kebenaran, seperti yang disebut sekarang—adalah perbedaan antara volume rata-rata dari semua pengukuran (4-10 pengukuran) dan volume yang ditetapkan. Ketika membahas ketepatan pipet, ini dijelaskan sebagai standar deviasi dari semua pengukuran yang dilakukan. 

Ketidakpastian pipet adalah istilah kuantitatif untuk akurasi keseluruhannya. Ini adalah kombinasi dari kebenaran (ukuran kesalahan sistematis) dan presisi (ukuran kesalahan acak). 

Persamaan untuk ketidakpastian adalah: 

Ketidakpastian = Kesalahan Sistematis + Kesalahan Acak * k. k (faktor cakupan atau Z-score) tergantung pada jumlah pengukuran. k=3,31 untuk empat pengukuran dan 2 untuk sepuluh pengukuran.

Untuk informasi lebih lanjut tentang ketidakpastian pipet dan memastikan akurasi, unduh laporan resmi ini.