Procédures types pour la préparation d'échantillons et d'étalons destinés à l'analyse chromatographique

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Défis de flux de travail dans la préparation des échantillons et des étalons pour les analyses chromatographiques

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Foire aux questions

Qu'est-ce que la chromatographie ?

Les techniques de chromatographie sont utilisées pour séparer des mélanges en leurs constituants afin que chaque partie puisse être analysée séparément.

La chromatographie liquide à haute performance (HPLC) peut être utilisée pour extraire des composants individuels d’une solution. Les composants d’un mélange se séparent ou s’éluent à des temps différents en HPLC. Les éluats provenant de la colonne HPLC sont ensuite acheminés vers divers détecteurs qui produisent un pic sur un graphique en fonction de leur concentration au moment où ils s’éluent de la colonne. Le type de détecteur le plus courant est le spectromètre ultraviolet-visible, car la plupart des substances couramment étudiées par HPLC, en particulier les produits pharmaceutiques, présentent une absorption UV.

La chromatographie en phase gazeuse (GC) remplit la même fonction que la chromatographie liquide, mais elle est utilisée pour les mélanges volatils. Le détecteur le plus universel en chromatographie en phase gazeuse, capable de fournir à la fois des informations quantitatives à l’état de traces et des informations qualitatives définitives, est le spectromètre de masse. Le détecteur à ionisation de flamme (FID) est le détecteur le plus utilisé pour les vapeurs organiques.

Quels sont les termes courants utilisés en chromatographie et que signifient-ils ?

Glossaire des termes courants en chromatographie :

  • Chromatographie ꟷ Technique analytique de laboratoire permettant de séparer un mélange en ses composants. Le mélange est dissous dans un gaz ou un liquide, appelé phase mobile, qui le transporte à travers un système (une colonne, un tube capillaire, une plaque ou une feuille) sur lequel est fixée une المادة appelée phase stationnaire.
  • HPLC ꟷ Chromatographie liquide à haute performance (anciennement chromatographie liquide à haute pression)
  • UPLC ꟷ Chromatographie liquide à ultra haute performance
  • GC ꟷ Chromatographie en phase gazeuse
  • Détecteur de chromatographie ꟷ Spectrométrie de masse (un détecteur, un spectromètre de masse sépare les ions ou les molécules selon leur rapport masse/charge)
  • MS ꟷ Spectrométrie de masse (un détecteur, un spectromètre de masse sépare les ions ou les molécules selon leur rapport masse/charge)
  • FID ꟷ Détecteur à ionisation de flamme, fréquemment utilisé en GC (détection des ions formés lors de la combustion de composés organiques dans une flamme d’hydrogène)
  • CDS ꟷ Système de données de chromatographie
  • Préparation des échantillons ꟷ Préparation des échantillons pour toute analyse (souvent utilisé comme terme générique pour tous les échantillons à analyser, y compris les étalons, les blancs, etc.)
  • Préparation des étalons ꟷ Préparation des étalons de calibration pour l’analyse

Quelles sont les tendances pour améliorer la chromatographie ?

Ces dernières années, beaucoup de temps a été consacré à l’amélioration de la vitesse d’analyse, de la résolution et de l’automatisation, ainsi qu’au développement et à l’amélioration des instruments analytiques. Cependant, l’un des principaux goulots d’étranglement du processus reste la préparation des échantillons et des étalons. Il n’est pas rare que les deux tiers du temps d’analyse soient consacrés à cette étape du processus. Les chromatographistes recherchent donc de meilleures techniques de préparation des échantillons afin d’améliorer la vitesse et la précision des analyses. Ils cherchent des procédures plus rapides, plus rentables, ainsi que des méthodes faciles à utiliser, pratiques et plus sûres. Une autre tendance est le recours accru à des volumes d’échantillon plus faibles. Accélérer ou automatiser la préparation des échantillons peut réduire le temps d’analyse et augmenter le débit d’échantillons tout en diminuant les tailles d’échantillon. Des interfaces intelligentes et des solutions logicielles ingénieuses accélèrent encore le processus et permettent un traitement des données sans erreur ainsi qu’une génération complète de rapports.

Quelle est la technique la plus fréquemment utilisée pour la préparation des échantillons ?

La pesée est évidemment la technique la plus couramment utilisée pour toute préparation d’échantillons, car presque toute méthode d’analyse quantitative nécessite la mesure de la masse de l’échantillon. Mais de nombreuses autres techniques de préparation sont utilisées dans les laboratoires d’analyse, telles que la dilution, la filtration, le pipetage, l’évaporation, la concentration, l’extraction, la centrifugation, le séchage, l’ajustement du pH, le broyage, la digestion, et bien d’autres encore.

Qu'est-ce qu'un étalon de référence ?

Les substances de référence sont utilisées pour identifier ou déterminer la concentration d’un analyte dans un échantillon de concentration inconnue. La substance de référence est préparée avec une concentration connue, afin que l’échantillon inconnu puisse être comparé à celle-ci pour déterminer la concentration réelle de l’échantillon.

Comment puis-je rendre plus rapide et plus efficace mon flux de travail de préparation des échantillons et des étalons pour les analyses chromatographiques ?

L’utilisation de systèmes d’automatisation, tels que les systèmes automatiques de distribution de poudres et de liquides ou de manipulation de liquides, peut grandement améliorer le débit des processus de préparation d’échantillons et de standards.

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