Preverjanje in kalibracija pipet

Pipeta je laboratorijsko orodje za natančen prenos majhnih količin merilnih tekočin z zajemom in odmerjanjem vzorca. Danes je večina pipet batnih, ki ustvarijo delni vakuum nad tekočino, da tekočino zajamejo, s čimer se izognejo kontaktni mehaniki.

Več: Pipete Rainin

Pipeta je kalibrirana, kadar akreditirana ustanova določi razmerje med pričakovano in dejansko prostornino, ki jo prenese pipeta, skupaj s povezano meritvijo negotovosti. Namen je dokazati, da pipeta še vedno ustreza specifikacijam proizvajalca ali standarda ISO 8655 in zagotavlja točne rezultate. Pipete, ki so zunaj tolerance, je običajno mogoče servisirati, prilagoditi in znova kalibrirati.
Več: Storitve za pipete Rainin

Batne pipete se običajno uporabljajo v kemiji, biologiji, na kliničnih in medicinskih področjih, kjer se odvzemajo vzorci tekočin, ki jih je treba prenesti – pogosto v majhnih in natančnih količinah – za nadaljnje razredčenje, raziskave in analize.

Tukaj je opisanih nekaj zelo pogostih tehnik pipetiranja in napak, do katerih prihaja pri batnih pipetah, navedeno pa je tudi, kako se jim izogniti.

1. Napačna globina potopitve konice
   Pravilna globina potopitve konice lahko izboljša natančnost za največ 5 %. Konico pipet z mikroprostornino je treba potopiti 1–2 mm, pipet z običajno prostornino pa 3–6 mm, odvisno od velikosti konice. Če konico potopite pregloboko, je prostornina plina v konici stisnjena, kar povzroči zajem prevelike količine tekočine.
   
   
2. Napačen kot pipetiranja
   Kot potopitve konice pipete v vzorec mora biti čim bolj navpičen in ne sme odstopati od navpičnega za več kot 20 stopinj. Bolj položen kot povzroči zajem prevelike količine tekočine v konico, zaradi česar pride do nenatančnega zajema. Na primer pri kotu, ki za 30 stopinj odstopa od navpičnega, se lahko zajame do 0,7 % preveč tekočine.
   
   
3. Nedosledno odmerjanje
   Večjo natančnost in ponovljivost od vzorca do vzorca lahko dosežete tako, da zagotovite, da se zadnja preostala kapljica v celoti odmeri in se ne razleze po koncu konice. Pri večini načinov uporabe se priporoča, da se odmerjanje izvaja tako, da je konec konice naslonjen na steno posode, saj se na ta način zmanjša količina vzorca, ki ostane v konici, ali pa se to povsem prepreči. Ta tehnika lahko poveča natančnost za 1 % ali več.
   
   
4. Neizvajanje predizpiranja
   Ob odmerjanju tekočine iz pipete na konici ostane prevleka tekočine, zaradi česar je prostornina izločene tekočine nekoliko manjša, kot bi morala biti. Če boste novo konico najmanj dvakrat predizprali s tekočino, ki jo boste uporabljali, se bo znotraj konice ustvarila prevleka.
   
   
5. Nedosleden ritem pipetiranja
   Od vzorca do vzorca uporabljajte dosleden ritem pipetiranja. Izogibajte se hitenju in hitremu delu ter ustvarite določen ritem za vsak korak ciklusa pipetiranja.
   
   Več: Dobra praksa pipetiranja (GPP)

Natančnost pipet je treba med kalibracijami redno preverjati, da se v obdobju med kalibracijami izognete rezultatom, ki bi bili zunaj tolerance. Preverjanje pipete izvedete tako, da najmanj nazivno prostornino 4–6-krat odmerite v posodo na natančni analitični tehtnici, nato pa s formulami iz standarda ISO 8655 izračunate povprečno prostornino in odklon. Tehtnice z vgrajeno aplikacijo ali programsko opremo za osebni računalnik v le nekaj sekundah samodejno prikažejo, ali je rezultat uspešen ali neuspešen.

Več: Preverjanje pipet

Natančnost pipet je treba med kalibracijami redno preverjati, da se v obdobju med kalibracijami izognete rezultatom, ki bi bili zunaj tolerance. Preverjanje pipete izvedete tako, da najmanj nazivno prostornino 4–6-krat odmerite v posodo na natančni analitični tehtnici, nato pa s formulami iz standarda ISO 8655 izračunate povprečno prostornino in odklon. Tehtnice z vgrajeno aplikacijo ali programsko opremo za osebni računalnik v le nekaj sekundah samodejno prikažejo, ali je rezultat uspešen ali neuspešen.  

Kalibracija pipet prikaže razliko med pričakovano in dejansko prostornino, ki mora biti znotraj dane tolerance. Če je zunaj tolerance, lahko povzroči napačno redčenje in na koncu celo napačne analitične rezultate. Posledično rezultatov ni mogoče ponoviti in je treba znova opraviti celotno analizo. Za zgodnje odkrivanje pipete, ki je zunaj tolerance, se priporoča izvajanje preverjanja natančnosti pipete med kalibracijami, da ne bi pipet zunaj tolerance odkrili šele ob naslednji kalibraciji.

Pri kalibraciji pipete akreditirana ustanova določi razmerje med pričakovano in dejansko prostornino, ki jo prenese pipeta, skupaj s povezano meritvijo negotovosti. Namen je dokazati, da pipeta še vedno ustreza specifikacijam proizvajalca ali standarda ISO 8655 in zagotavlja točne rezultate. Pipete, ki so zunaj tolerance, je običajno mogoče servisirati, prilagoditi in znova kalibrirati.

Pred začetkom čiščenja najprej vedno preverite priročnik proizvajalca, saj se odpornost materiala razlikuje glede na blagovno znamko. Batne pipete je treba za temeljito čiščenje razstaviti. Pipeto lahko običajno odprete tako, da ročno odvijete roko sistema za izmet konice in valj. Bodite previdni: sila vzmeti lahko povzroči, da ti deli izskočijo. Dele lahko običajno očistite s krpo, rahlo namočeno v blago milnico, pripravljeno z destilirano vodo, ali pa uporabite izopropilni alkohol oziroma raztopino etanola. Preprečite vstop tekočin v cevko (tudi med pipetiranjem), da ne bi prišlo do kontaminacije bata in tesnila. Ko izvajate sterilizacijo ali avtoklaviranje, v priročniku preverite, če je to dovoljeno za posamezni model pipete in kako naj se postopek izvaja. Po čiščenju preverite, ali je pipeta še vedno znotraj tolerance. Po servisu običajno servisni tehnik za pipete izvede kalibracijo, da preveri in potrdi, da je pipeta znotraj tolerance.