CytoDirect poenostavlja štetje celic na Univerzi v Bernu

Povečanje natančnosti in produktivnosti pri raziskavah mRNA s števcem celic METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counter

CytoDirect poenostavlja štetje celic na Univerzi v Bernu, kjer laboratorij Mühlemann za napredek raziskav mRNA potrebuje natančne, ponovljive rezultate. Razumevanje, kako celice določajo, katera genetska sporočila so veljavna, kako se obdelujejo in ali se prevedejo v beljakovine, je temelj za razkrivanje molekularne osnove bolezni. Raziskave na tem področju zahtevajo zelo nadzorovane eksperimentalne pogoje v vsaki fazi. Nedosledno štetje celic uvaja napake, ki vplivajo na nadaljnje poskuse, ogrožajo celovitost podatkov in raziskovalcem vzamejo veliko časa. Laboratorij Mühlemann je uvedel števec celic METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counter, da bi odpravil to spremenljivost ter znatno izboljšal zanesljivost in učinkovitost svojih procesov.

O laboratoriju Mühlemann

Laboratorij Mühlemann preučuje posttranskripcijske mehanizme, ki uravnavajo izražanje genov v celicah sesalcev. Osrednje področje njegovih raziskav je nonsense-mediated mRNA decay (NMD), ključna pot nadzora RNA, ki odstranjuje okvarjene transkripte in natančno prilagaja izražanje številnih normalnih genov. Laboratorij prav tako preučuje, kako se novonastale pre-mRNA sestavljajo z RNA-vezavnimi proteini, procesi, ki vplivajo na spajanje, izvoz in stabilnost mRNA. Ekipa pri tem za natančno in ponovljivo štetje celic uporablja števec celic CytoDirect, kar bistveno izboljšuje točnost in učinkovitost vsakodnevnega dela.

Pomen natančnega štetja celic že prvič

Laboratorij Mühlemann potrebuje zanesljivo štetje celic na več stopnjah svojega delovnega procesa, tako pri rutinskem vzdrževanju človeških suspenzijskih kultur kot tudi pri zbiranju celic pred poskusi. Prej je ekipa za določanje gostote celic pri razdeljevanju in redčenju uporabljala svetlopoljsko, na sliki osnovano napravo za štetje celic. Vendar so začeli opažati precejšnje odstopanje in nedoslednosti v rezultatih štetja, kar je zmanjšalo zaupanje v izide. Nikolaos Kouvelas, doktorski študent v laboratoriju Mühlemann, je pojasnil: “Delamo s celicami, gojenimi v suspenziji, v velikih volumnih, in pri zbiranju za poskuse jih je izjemno pomembno prešteti čim bolj natančno, vendar smo pogosto ugotovili, da so bila naša štetja celic zelo nenatančna.”

V nekaterih primerih so se člani ekipe zatekli k temu, da so za en sam vzorec izvedli več ponovnih štetij, da bi imeli večje zaupanje v rezultate, kar je zahtevalo precej ročnega dela. Nicole Kleinschmidt, vodja laboratorija v laboratoriju Mühlemann, je pripomnila: “Štetje v suspenziji preprosto ni bilo dovolj natančno. Nekateri naši raziskovalci so v skrajnih primerih začeli izvajati pet do osem ponovnih štetij za eno celično linijo.”

Zaradi teh neučinkovitosti je ekipa začela ocenjevati alternativne tehnologije in je posebej iskala sistem, ki temelji na bistveno drugačnem principu štetja in bi lahko odpravil njihove težave z točnostjo in natančnostjo, hkrati pa izboljšal splošno produktivnost laboratorija.

Vrhunska tehnologija zagotavlja natančne rezultate

Ker jih je pritegnil inovativen pristop, ki združuje holografsko mikroskopijo in strojno učenje, se je laboratorij odločil preizkusiti števec celic Cytodirect, da bi odpravil omejitve glede natančnosti, s katerimi so se soočali pri prejšnjih sistemih. Števec celic CytoDirect zagotavlja zanesljivejše in bolj ponovljive rezultate. Pri vsakem merjenju analizira precej večjo površino v primerjavi s prejšnjim instrumentom laboratorija, kar zmanjšuje odstopanja v štetju in odpravlja potrebo po ponovnih meritvah za posamezen vzorec. Nikolaos je dejal: “Prej smo morali določiti eno območje za štetje, vendar je bilo med različnimi območji veliko odstopanje. Zato smo šteli različna območja in vzeli povprečje, vendar je bilo to zelo nenatančno. Pri CytoDirect je velika površina velika prednost. In pri poskusih, kjer je čas pomemben, je tudi dobro, da je hitrejši.”

CytoDirect poenostavlja štetje celic na Univerzi v Bernu

»Instrument je zelo enostaven za uporabo. Že ob prvi uporabi sem takoj vedel, kako ravnati z njim. Všeč mi je tudi, da celicam pred štetjem ni treba dodajati barvila; postopek je zelo hiter. In velika prednost je, da moramo prešteti le enkrat, namesto da bi to večkrat ponavljali.«
Marc Thierry Rotzetter, master’s student in the Mühlemann laboratory

Intuitiven uporabniški vmesnik in poenostavljen potek dela

Ekipa ceni intuitivno zasnovo instrumenta in preprost delovni tok. Njegov uporabniku prijazen vmesnik omogoča, da sistem z minimalnimi navodili uporabljajo tudi novi člani laboratorija, kar skrajša čas usposabljanja ter omogoča samozavestno in breznaporno uvedbo. Marc Thierry Rotzetter, študent magistrskega študija v laboratoriju Mühlemann, je pojasnil: “Instrument je zelo enostaven za uporabo. Že ob prvi uporabi sem takoj vedel, kako ga uporabljati. Všeč mi je tudi, da pred štetjem ni treba dodajati barvila celicam; je zelo hitro. In velika prednost je, da moramo šteti samo enkrat, namesto da bi postopek večkrat ponavljali.”

Karin Schranz, pooblaščenka za biološko varnost in vodja celične kulture v laboratoriju Mühlemann, je sklenila: “Danes ne dvomimo več o doslednosti štetja. Instrument smo temeljito preizkusili in zaupamo rezultatom.”

»Danes o doslednosti štetja nimamo nobenih dvomov. Instrument (CytoDirect) smo temeljito preizkusili in smo prepričani v rezultate.«
Karin Schranz, Biosafety Officer and Head of Cell Culture in the Mühlemann laboratory

Izkušnje laboratorija Mühlemann kažejo, da natančno štetje celic neposredno prispeva k boljši znanosti. Števec celic METTLER TOLEDO CytoDirect odstrani ključni vir spremenljivosti iz vsakodnevnih delovnih procesov ter raziskovalnim ekipam že od prvega štetja zagotovi popolno zaupanje v rezultate.

Povezani izdelki in rešitve