Mikropipete

Pipete koje dispenziraju 1 – 1000 μL često se nazivaju mikropipetama. Mikropipete su osmišljene u različitim stilovima radi optimizacije rada s određenim vrstama tekućina i mogu maksimizirati produktivnost i zdravu ergonomiju. Stilovi mikropipeta uključuju ručne i elektroničke pipete koje rade na principu istiskivanja zraka i pozitivnog istiskivanja, koje se mogu pojaviti i u jednokanalnim i višekanalnim formatima te u stolnim platformama visokog protoka. Sve su dizajnirane za precizno aspiriranje i dispenziranje mikrolitarskih mjera tekućina.  

I u mikropipetama koje rade na principu istiskivanja zraka i u onima koje rade na principu pozitivnog istiskivanja, promjer klipa i duljina hoda klipa određuju volumen tekućine koja se aspirira i dispenzira.

Mikropipete upotrebljavamo za točan prijenos malih volumena tekućine iz jedne posude u drugu. Na primjer, upotrebljavamo mikropipetu za premještanje tekućine iz boce za staničnu kulturu u pojedinačne jažice u mikrotitarskoj pločici. Mikropipete se koriste u ekološkim znanostima, kemiji, farmaceutskom razvoju, forenzičkim znanostima, biološkim laboratorijima i mnogim drugim područjima.

Mnoge mikropipete imaju vrlo dobre specifikacije točnosti. Ti instrumenti mogu isporučiti volumene uz vrlo rijetke sustavne i slučajne greške. Međutim, tehnika korisnika mikropipete može uvelike utjecati na točnost. Na ponovljivost mogu utjecati svi sljedeći faktori: pravilno podešavanje volumena, prethodno ispiranje nastavka pipete, dubina uranjanja nastavka pipete, vertikalnost pipetiranja i ritam pipetiranja.  

Mikropipete su precizni instrumenti koji se u laboratoriju često podvrgavaju intenzivnoj upotrebi, pa je, uz dobre specifikacije i pravilnu tehniku, najpreciznija mikropipeta ona koja se redovito umjerava. Intervali održavanja obično odražavaju intenzitet upotrebe mikropipete.

Da biste koristili mikropipetu, prvo postavite i fiksirajte volumen. Zatim spustite kraj mikropipete s tekućinom u čist, prazan nastavak pipete. Pobrinite se da nastavak pipete bude čvrsto postavljen na mikropipetu radi hermetičkog zatvaranja. Nakon postavljanja nastavka pipete na ručnu mikropipetu pritisnite klip do prvog graničnika. Kod elektroničkih modela, kada se postavi volumen i stavi nastavak, pipeta je spremna za aspiraciju.  

Držeći mikropipetu okomito, uronite nastavak u tekućinu na ispravnoj dubini s obzirom na veličinu nastavka. Ako se nastavak preduboko uroni, povećava se tlak i nastavak se može prepuniti. Ako ga uronite preplitko, riskirate aspiraciju zraka.  

Na ručnoj mikropipeti, polako otpustite tlak na klipu kako biste aspirirali postavljeni volumen tekućine. Na elektroničkoj verziji pritisnite gumb za aspiriranje.

Kada se tekućina nalazi u nastavku, pomaknite mikropipetu nad ciljnu posudu. Na ručnim mikropipetama pritisnite klip do prvog graničnika kako biste dispenzirali. Na elektroničkoj mikropipeti jednostavno pritisnite gumb za dispenziranje.  

Na kraju, kako biste ispustili svu preostalu tekućinu, pomaknite mikropipetu nad željenu posudu za izbacivanje i, na ručnim mikropipetama, pritisnite klip do drugog graničnika za „ispuhivanje” (eng. blowout). Na elektroničkim mikropipetama s pomoću gumba ispušite svu preostalu tekućinu.

Kako bi se minimizirala mogućnost grešaka pri radu s mikropipetom, započnite s cijelim sustavom mikropipete i nastavka kako biste osigurali ispravno hermetičko prianjanje.  

Tijekom rada mikropipetu držite u što okomitijem položaju. Na ručnim mikropipetama postavite volumen tako što ćete mikrometar namjestiti malo iznad predviđenog volumena. Zatim ga spustite na željeni broj. Svaki put kad umetnete novi nastavak, prethodno ga isperite kako biste optimizirali uvjete unutar njega radi vrlo točnog pipetiranja. Tijekom aspiriranja i dispenziranja održavajte brzinu stalnom te održavajte ritam tijekom cijelog koraka protokola.  

I dispenziranje ispod ciljne površine tekućine, kada je to moguće, i dodirno brisanje nastavka na unutrašnjoj stijenci posude kada završite s dispenziranjem predstavljaju načine maksimiziranja točnosti volumena koji dispenzirate.

Isti se nazivi upotrebljavaju za obje vrste instrumenata, ovisno o osobi koja koristi te pojmove: neke ih zovu pipetama, a druge mikropipetama. Uslijed široke upotrebe ti se pojmovi koriste za iste instrumente, iako se mikropipete mogu uže definirati kao instrumenti koji mogu mikroubrizgati tekućinu izravno u stanice. Pipete, širi pojam, obuhvaća instrumente od kapaljki za oči i epruveta kojima se upravlja ustima do seroloških pipeta i visokoprotočnih sustava za pipetiranje.

Mikropipete su pipete koje mogu služiti za mjerenje i dispenziranje tekućih otopina u rasponu volumena od 1 μL do 1000 μL. Obično se upotrebljavaju u istraživanjima u području bioznanosti kod kojih je potrebno precizno mjerenje i dispenziranje otopina.