Proces pripreme uzorka pomoću METTLER TOLEDO alata za utvrđivanje tališta:
Korak 1: Prvo, uzorak je potrebno osušiti u eksikatoru. Zatim se mali dio uzorka fino samelje u mužaru.
Korak 2: Nekoliko kapilara priprema se istovremeno za mjerenje instrumentom METTLER TOLEDO. Alat za punjenje kapilara savršeno pomaže u punjenju jer se prazne kapilare sigurno drže u držaču poput klina. Uzimanje malog uzorka iz žbuke lako se izvodi uz pomoć alata.
Korak 3: Mala količina uzorka na vrhu kapilare zatim se pomiče niz kapilaru otpuštanjem držača i laganim odbijanjem kapilara o stol nekoliko puta. Ova radnja čvrsto pakira uzorak u dno kapilare. 'Efekt odbijanja' uzrokuje čvrsto pakiranje tvari i izbjegava stvaranje zračnih džepova.
Korak 4: Ispravna visina punjenja može se provjeriti ugraviranim ravnalom na alatu za kapilarno punjenje. Općenito, visina ispune ne smije prelaziti 3 mm.
7. Postavljanje instrumenta
Uz pravilnu pripremu uzorka, postavke na instrumentu također su bitne za točno određivanje tališta. Točan odabir početne temperature, krajnje temperature i stope rampe zagrijavanja nužni su kako bi se spriječile netočnosti zbog porasta topline u uzorku koji je netočan ili prebrz:
a) Početna temperatura
Određivanje tališta počinje na unaprijed definiranoj temperaturi blizu očekivanog tališta. Do početne temperature postolje za grijanje se brzo predgrijava. Na početnoj temperaturi kapilare se uvode u peć, a temperatura počinje rasti pri definiranoj brzini zagrijavanja.
Uobičajena formula za izračunavanje početne temperature:
Početna temperatura = očekivani MP – (5 min * brzina zagrijavanja)
b) Stopa rampe grijanja
Brzina rampe grijanja je fiksna stopa porasta temperature između početne i krajnje temperature za rampu grijanja.
Rezultati jako ovise o brzini zagrijavanja - što je veća brzina zagrijavanja, viša je opažena temperatura tališta.
Farmakopeje primjenjuju stalnu brzinu zagrijavanja od 1 °C/min. Za najveću točnost i uzorke koji se ne raspadaju koristite 0,2 °C/min. Kod tvari koje se raspadaju treba primijeniti brzinu zagrijavanja od 5 °C/min. Za eksplorativna mjerenja može se koristiti brzina zagrijavanja od 10 °C/min.
c) Zaustavna temperatura
Maksimalna temperatura koju treba postići u određivanju.
Uobičajena formula za izračunavanje temperature zaustavljanja:
Zaustavna temperatura = očekivani MP + (3 min * brzina zagrijavanja)
d) Termodinamički / farmakopejski način
Postoje dva načina za procjenu tališta: Farmakopejsko talište i termodinamičko talište. Način farmakopeje zanemaruje da je temperatura peći različita (viša) tijekom procesa zagrijavanja od temperature uzorka, što znači da se mjeri temperatura peći, a ne temperatura uzorka. Kao posljedica toga, farmakopejsko talište jako ovisi o brzini zagrijavanja. Stoga su mjerenja usporediva samo ako se primjenjuje ista brzina zagrijavanja.
S druge strane, termodinamičko talište dobiva se oduzimanjem matematičkog produkta termodinamičkog faktora 'f' i kvadratnog korijena brzine zagrijavanja od farmakopejskog tališta. Termodinamički faktor je empirijski određen faktor specifičan za instrument. Termodinamičko talište je fizički ispravno talište. Ova vrijednost ne ovisi o brzini zagrijavanja ili drugim parametrima. Ovo je vrlo korisna vrijednost jer omogućuje usporedbu tališta različitih tvari neovisno o postavkama eksperimenta.
9. Utjecaj brzine zagrijavanja na mjerenje tališta
Rezultati jako ovise o brzini zagrijavanja - što je veća brzina zagrijavanja, viša je opažena temperatura tališta. Razlog je taj što se temperatura tališta ne mjeri izravno unutar tvari, već izvan kapilare na grijaćem bloku, zbog tehničkih razloga. Stoga temperatura uzorka zaostaje za temperaturom peći. Što je veća brzina zagrijavanja, to je brži porast temperature peći, povećavajući razliku između izmjerene točke taljenja i stvarne temperature taljenja.
Zbog ovisnosti o brzini porasta topline, mjerenja tališta su međusobno usporediva samo ako se uzimaju istim brzinama.
12. Mješovito određivanje tališta
Ako se dvije tvari tale na istoj temperaturi, mješovito određivanje tališta može otkriti jesu li to jedna te ista tvar. Temperatura taljenja smjese dviju komponenti obično je niža od temperature bilo koje čiste komponente. Ovo ponašanje je poznato kao depresija tališta.
Za miješano određivanje tališta, uzorak se miješa s referentnom tvari u omjeru 1:1. Kad god se talište uzorka snizi miješanjem s referentnom tvari, dvije tvari ne mogu biti identične. Ako talište smjese ne padne, uzorak je identičan referentnoj tvari koja je dodana.
Obično se određuju tri tališta: uzorak, referenca i omjer miješanja uzorka i reference 1:1. Tehnika mješovite točke taljenja važan je razlog zašto svi visokokvalitetni strojevi za točku taljenja imaju najmanje tri kapilare u svojim grijaćim blokovima.