Pipetten

Er zijn twee soorten pipetten: positive displacement pipetten en air displacement pipetten. Positive displacement pipetten worden vaak gebruikt voor monsters met een hoge viscositeit, zoals glycerol, of met een hoge dampdruk, zoals vluchtige stoffen als alcohol. Air displacement pipetten zijn geschikt voor de meeste laboratoriumtoepassingen.

Moderne pipetten, ook wel micropipetten genoemd, werken met een piston-slagprincipe. Hierbij wordt de vloeistof gemeten met een zuiger-cilindersysteem in het handvat van de pipet. Door de zuiger in te drukken en langzaam los te laten, ontstaat er door de beweging van de zuiger een vacuüm in de pipetpunt, waardoor vloeistof wordt opgezogen, een proces dat aspiratie wordt genoemd.

Doordat de zuiger in de pipet ver van het vloeistofmonster verwijderd is, kan het luchtkussen tussen de zuiger en de vloeistof invloed hebben op de nauwkeurigheid van dit proces, afhankelijk van het type vloeistof. Bij het indrukken van de zuiger met een pipetpunt vol vloeistof wordt de vloeistof uit de punt gedoseerd.

Positive displacement pipetten werken volgens een soortgelijk principe, maar de punt van het uitwerpsysteem bevat zijn eigen zuiger en daarom is er een minimaal luchtkussen tussen de zuiger, wat een deel van de pipetpunt is, en het vloeistofoppervlak. Dit maakt ze uitermate geschikt voor nauwkeurige dosering van vloeistoffen met afwijkende eigenschappen.

De nauwkeurigheid van pipetten is het vermogen van een pipet om het volume af te geven dat is gespecificeerd op het ingestelde volume. Met andere woorden, de juistheid van een meting tot de werkelijke waarde hangt af van het samenspel van de elementen in het systeem.

Pipetteerprecisie is het vermogen van een pipet om consistent vloeistofvolumes van dezelfde grootte af te geven over meerdere aliquots. Een pipet kan nauwkeurig zijn met betrekking tot het keer op keer doseren van hetzelfde volume, maar onnauwkeurig omdat het niet lukt om het juiste volume af te geven. Een nauwkeurige en precieze pipet doseert bij elke dosering volumes op het beoogde volume.

De pipet, pipetpunt en de persoon die de pipet bedient, vormen een 3-delig systeem. De operator, de persoon die de pipet gebruikt om onderzoek te doen, heeft een hoge mate van invloed op de nauwkeurigheid van de resultaten. Daarom is het belangrijk dat operators worden getraind in het gebruik van een pipet. Enkele krachtige maar eenvoudige technieken kunnen de nauwkeurigheid van het pipetteren aanzienlijk verbeteren. De Rainin Pipetting Technique Poster biedt een goede samenvatting. Daarnaast biedt Rainin het online seminar Good Pipetting Practice aan om u te helpen bij het leren van de juiste manier om te pipetteren.

RAININ biedt een breed scala aan handmatige en elektronische pipetten met één kanaal (monochannel), meerdere kanalen (multichannel) of hoge doorvoer, maar ook kalibratieservices om ervoor te zorgen dat uw resultaten nauwkeurig blijven. De pipetten van RAININ zijn wereldwijd verkrijgbaar. Geïnteresseerd in de aanschaf van een pipet? Vraag bovenaan deze pagina een offerte aan.

Hoeveel een pipet kost, hangt af van het type pipet: mono- of multichannel, handmatig of elektronisch. De prijs van de pipet varieert op basis van precisie (specificaties), materialen en vakmanschap.

Pipetten worden wereldwijd ingezet in diverse laboratoria, waaronder laboratoria voor biowetenschappelijk onderzoek, chemische analyse, aardolie en voedselproductie. Ze zijn essentieel in elke industrie waar biologische tests een vereiste zijn.

Bij het kiezen van de juiste pipet voor uw taak is het belangrijk om rekening te houden met verschillende factoren: het type vloeistof, het aantal replicaten, de tijdsgevoeligheid en het benodigde pipetteervolume.

Type vloeistof:

• Gebruik een air displacement pipet voor waterige of bijna waterige vloeistoffen.
• Voor stroperige of vluchtige vloeistoffen is een positive displacement pipet geschikt. Dit type pipet heeft een zuiger die tot aan de opening van de punt reikt, waardoor er geen luchtkussen tussen de zuiger en de vloeistof zit. Dit voorkomt nauwkeurigheidsverlies door uitrekking of compressie van lucht, zoals bij air displacement pipetten kan voorkomen.

Aantal replicaten en type vaten:

• Voor een klein aantal doseringen in buisjes of platen is een handmatige monochannel pipet geschikt. 
• Voor meerdere wells of buisjes zijn multichannel pipetten en elektronische pipetten efficiënter en verminderen ze de belasting van de hand.
• Adjustable multichannel pipetten maken het eenvoudig om te schakelen tussen vaten met verschillende tussenafstanden, zoals buizen en platen.
• Elektronische pipetten bieden extra voordelen zoals het doseren van meerdere aliquots vanuit één aspiratie, zelfs in een reeks van verschillende volumes, en het bijhouden van protocollen via een cyclusteller.
• Bij hoge doorvoer en grote aantallen replicaten is een semi-geautomatiseerd pipetteerwerkstation aan te raden.

Tijdsgevoeligheid:

• Multichannel pipetten en pipetteersystemen met hoge doorvoer versnellen het werkproces, vooral in elektronische uitvoeringen, wat tijd bespaart bij tijdsgevoelige protocollen.  

Pipetteervolume:

• Werk bij voorkeur tussen 10 en 100% van het nominale volume van een pipet voor optimale nauwkeurigheid.
• Het beste resultaat wordt behaald bij volumes dicht bij het  nominale volume van een pipet.
• Vermijd het gebruik van een pipet met een veel te groot volume voor kleine hoeveelheden, bijvoorbeeld 20 μl pipetteren met een 1.000 μl pipet. Gebruik in plaats daarvan een pipet die geschikt is voor dat volume.
• De pipetgroottes variëren van 1 μl tot 20 ml, en grotere volumes kunnen nauwkeurig worden overgebracht met serologische pipetten.  

Contaminatie kan experimenten ernstig verstoren, daarom is het cruciaal om een strikt beleid te hanteren waarbij voor elk monster een nieuwe pipetpunt wordt gebruikt. Gefilterde pipetpuntenhelpen daarbij door aërosolen te blokkeren, terwijl het regelmatig reinigen van de pipet met ethanol oppervlakteresten verwijdert en zo de hygiëne waarborgt. Daarnaast draagt een schone en ordelijke werkplek, gecombineerd met het correct opbergen van pipetten, bij aan het minimaliseren van contaminatierisico's.

De multichannel pipetten van Rainin zijn ontworpen met een veilige pasvorm en comfortabele bediening, wat het toepassen van deze hygiëneprocedures vergemakkelijkt. Hierdoor wordt elke monsteroverdracht geïsoleerd gehouden, waardoor verontreiniging wordt voorkomen en betrouwbare resultaten worden gegarandeerd.

Bij het werken met lage volumes kan zelfs een minuscuul druppeltje achtergebleven reagens de resultaten beïnvloeden. Zorg daarom altijd voor een nauwkeurige wisseling van de pipetpunten tussen verschillende reagentia.  Gebruik bij voorkeur gefilterde pipetpunten om te voorkomen dat aërosolen de pipet besmetten. Daarnaast blijft uw pipet schoon en vrij van residu door deze regelmatig schoon te vegen met ethanol.

De laboratoriumpipetten van RAININ, met pipetpunten die perfect passen en soepel en met minimale kracht worden uitgeworpen, maken het eenvoudiger om strenge reinheidsnormen te handhaven voor elk nieuw reagens dat u hanteert.