Efficiëntere celtelling aan de Universiteit van Bern met CytoDirect

Meer precisie en productiviteit in mRNA-onderzoek met de METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counter

CytoDirect stroomlijnt het tellen van cellen aan de Universiteit van Bern, waar het Mühlemann-laboratorium afhankelijk is van nauwkeurige en reproduceerbare resultaten om onderzoek naar mRNA verder te ontwikkelen. Inzicht in hoe cellen genetische informatie herkennen, verwerken en al dan niet vertalen naar eiwitten is essentieel voor het ontrafelen van de moleculaire mechanismen achter ziekten. Dergelijk onderzoek vereist in elke fase strikt gecontroleerde experimentele omstandigheden.

Variaties in celtellingen kunnen leiden tot fouten die zich door het volledige onderzoeksproces verspreiden, de betrouwbaarheid van gegevens verminderen en kostbare onderzoekstijd verloren laten gaan. Om deze variabiliteit te elimineren, implementeerde het Mühlemann-laboratorium de CytoDirect Cell Counter van METTLER TOLEDO. Hierdoor werden zowel de nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid van de resultaten als de efficiëntie van de dagelijkse workflows aanzienlijk verbeterd.

Over het Mühlemann-laboratorium

Het Mühlemann-laboratorium onderzoekt posttranscriptionele mechanismen die de genexpressie in zoogdiercellen reguleren. Een belangrijk onderzoeksgebied is nonsense-mediated mRNA decay (NMD), een essentieel bewakingssysteem dat defecte mRNA-transcripten afbreekt en tegelijkertijd de expressie van talrijke normale genen reguleert. Daarnaast bestudeert het laboratorium hoe nieuw gevormde pre-mRNA-moleculen interageren met RNA-bindende eiwitten, processen die van invloed zijn op mRNA-splicing, export en stabiliteit.

Voor dit onderzoek zijn nauwkeurige en reproduceerbare celtellingen onmisbaar. Daarom maakt het team gebruik van de CytoDirect Cell Counter van METTLER TOLEDO. Door variabiliteit in celtellingen te minimaliseren, ondersteunt het systeem betrouwbare experimentele resultaten en draagt het bij aan efficiëntere dagelijkse workflows in het laboratorium.

Het belang van een celtelling in één keer goed uitvoeren

Het Mühlemann-laboratorium heeft in verschillende fasen van de workflow betrouwbare celtellingen nodig, zowel voor het routinematig onderhouden van humane suspensieculturen als voor het oogsten van cellen voorafgaand aan experimenten. Voorheen gebruikte het team een beeldgebaseerde Cell Counter in helder veld om de celdichtheid te bepalen voor het verdelen en verdunnen van cellen. Na verloop van tijd werden echter aanzienlijke variaties en inconsistenties in de resultaten waargenomen, waardoor het vertrouwen in de nauwkeurigheid van de tellingen afnam.

Nikolaos Kouvelas, promovendus in het Mühlemann-laboratorium, licht toe: “We werken met cellen die in suspensie groeien in grote volumes. Wanneer we deze cellen oogsten voor experimenten, is het cruciaal dat de tellingen zo nauwkeurig mogelijk zijn. Toch merkten we regelmatig dat de resultaten onvoldoende betrouwbaar waren.”

Om meer zekerheid te krijgen over de uitkomsten, voerden onderzoekers in sommige gevallen meerdere tellingen uit voor hetzelfde monster. Dit vergrootte de werklast aanzienlijk en kostte waardevolle onderzoekstijd. Nicole Kleinschmidt, laboratoriummanager van het Mühlemann-laboratorium, zegt: “Het tellen van suspensiecellen was simpelweg niet nauwkeurig genoeg. In extreme gevallen voerden onderzoekers vijf tot acht herhaaltellingen uit voor één enkele cellijn.”

Door deze beperkingen ging het team op zoek naar een alternatief. Daarbij lag de focus op een systeem dat gebaseerd is op een fundamenteel ander telprincipe en dat zowel de nauwkeurigheid als de reproduceerbaarheid van celtellingen zou verbeteren. Daarnaast zocht het laboratorium naar een oplossing die de efficiëntie van de dagelijkse werkzaamheden kon verhogen en onderzoekers meer vertrouwen kon geven in hun resultaten.

CytoDirect stroomlijnt celtelling aan de Universiteit van Bern

Geavanceerde technologie levert nauwkeurige resultaten

Geïnspireerd door de innovatieve combinatie van holografische microscopie en machine learning besloot het laboratorium de CytoDirect Cell Counter te evalueren als oplossing voor de nauwkeurigheidsbeperkingen die zij met eerdere systemen hadden ervaren. De CytoDirect Cell Counter levert betrouwbaardere en beter reproduceerbare resultaten doordat per meting een aanzienlijk groter analyseoppervlak wordt onderzocht dan met het vorige instrument. Hierdoor neemt de variatie tussen tellingen af en zijn meerdere metingen per monster niet langer noodzakelijk.

Nikolaos licht toe: "Voorheen moesten we een specifiek gebied selecteren voor de telling, terwijl er vaak aanzienlijke verschillen waren tussen de verschillende gebieden. Daarom voerden we meerdere tellingen uit en berekenden we een gemiddelde, maar dat bleef relatief onnauwkeurig. Met de CytoDirect is het grote analyseoppervlak een belangrijk voordeel. Bovendien is het instrument sneller, wat vooral waardevol is bij tijdkritische experimenten."

“Het instrument is zeer gebruiksvriendelijk. Zelfs toen ik het voor het eerst gebruikte, wist ik meteen hoe ik ermee om moest gaan. Ik vind het ook prettig dat je geen kleuring aan de cellen hoeft toe te voegen vóór het tellen; het gaat heel snel. Een groot voordeel is dat we slechts één keer hoeven te tellen, in plaats van dit meerdere keren te moeten herhalen..”
Marc Thierry Rotzetter, master’s student in the Mühlemann laboratory

Intuïtieve gebruikersinterface en gestroomlijnde workflow

Het team waardeert het intuïtieve ontwerp en de efficiënte workflow van het instrument. Dankzij de gebruiksvriendelijke interface kunnen zelfs nieuwe laboratoriummedewerkers na een minimale introductie zelfstandig aan de slag. Dit verkort de trainingstijd en zorgt voor een snelle en betrouwbare ingebruikname.

Marc Thierry Rotzetter, masterstudent in het Mühlemann-laboratorium, licht toe: “Het instrument is zeer eenvoudig te gebruiken. Zelfs de eerste keer wist ik direct hoe ik ermee moest werken. Daarnaast is het een groot voordeel dat er geen kleurstof aan de cellen hoeft te worden toegevoegd vóór het tellen. Het proces verloopt daardoor snel en efficiënt. Ook hoeven we slechts één meting uit te voeren, terwijl we voorheen meerdere tellingen moesten herhalen.”

Karin Schranz, biosafety officer en hoofd celkweek in het Mühlemann-laboratorium, benadrukt het vertrouwen in de prestaties van het systeem: “Wij twijfelen niet langer aan de consistentie van de resultaten. We hebben het instrument uitgebreid geëvalueerd en hebben volledig vertrouwen in de nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid van de celtellingen.”

“Tegenwoordig twijfelen we niet meer aan de consistentie van het tellen. We hebben het instrument (CytoDirect) grondig getest en hebben vertrouwen in de resultaten.”
Karin Schranz, Biosafety Officer and Head of Cell Culture in the Mühlemann laboratory

De ervaring van het Mühlemann-laboratorium laat zien dat nauwkeurige celtelling direct bijdraagt aan betere wetenschap. De METTLER TOLEDO CytoDirect Cell Counter neemt een belangrijke bron van variatie weg uit de dagelijkse workflows, waardoor onderzoeksteams vanaf de eerste telling volledig vertrouwen hebben in hun resultaten.

Bijbehorende producten en oplossingen