如何正確使用移液器?

準確的移液需要掌握一些基本技術。這些包括:

  • 根據吸頭尺寸和液體類型,將移液器吸頭浸入液體中的正確深度
  • 用要吸出的液體預沖洗新鮮的吸頭
  • 將移液器保持在適當的角度(垂直方向偏離不超過 20°) 
  • 以最大程度地減少氣泡形成的速度吸液和分配
  • 休息一下,以避免儀器的手部過熱,這可能是由於長時間使用而導致的,並且會因使移液器內的空氣膨脹而影響準確性


為什麼準確移液很重要?

大多數生命科學應用都包括關鍵的液體處理步驟,在這些步驟中,移液體積直接影響結果。如果移液不一致且不準確,那麼時間、金錢和材料就會被浪費掉。準確的移液構成了可重複工作的基礎,而可重複工作對於生成有意義的數據至關重要。

如何提高移液準確性並減少錯誤?

提高移液準確性的第一步是選擇正確類型的移液器和適當的量程範圍。對於尺寸,請選擇容量最小的移液器,以適應您正在移液的體積。例如,如果您要移取 2 μL 移液器,並使用 5 μL 移液器和 20 μL 移液器,則使用 5 μL 移液器將獲得更高的準確度。 

查看這份關於移液器選擇 的白皮書 ,瞭解哪種移液器最適合液體以及適合您情況的其他獨特因素: 選擇合適的移液器

一旦您有了合適的儀器,就可以將您良好的移液技術付諸實踐。制定常規測試計劃,以最大限度地提高對結果的信任度,並且與任何精密儀器一樣,確保制定定期的專家服務和校準方案。

快速測試移液器準確性的最簡單方法可能是Rainin SmartCheck。在 mt.com/SmartCheck 上瞭解更多資訊

我怎麼知道要使用哪種移液器?

選擇合適的 移液器 需要評估您的需求。首先,您正在移液哪種樣品?它們是水性的嗎?或者它們是粘性的、揮發性的、起泡的、腐蝕性的或危險的?對於水性液體和近水性液體,最常見的空氣置換式移液器(也稱為“氣墊”移液器)是一個不錯的選擇。對於粘性、揮發性和其他不尋常的液體類型,外置活塞式移液器在準確性和安全性方面都是更好的選擇。 

您將進行多大體積的移液?從一個容器轉移到另一個容器需要多少個樣品?查看這份 關於移液器選擇的白皮書 ,瞭解哪種移液器效果最好,具體取決於液體和適合您情況的其他因素。

如何移液小體積?

盡可能小的移液體積涉及專門的儀器和技術。連續移液器可能是重複分液體積低至 100 nL 的最佳選擇。另一支移液器也可以只用於幾次分液。確保使用最小尺寸的移液器,以適應您希望移液的體積。 

在非常小的體積下,移液技術對準確性和可重複性的影響成比例地更大。浸入深度、移液角度和抽吸速率對於控制很重要。Rainin的 「移液技術」海報 可以提供説明。

Rainin NanoRep 可重複分配低至 100 nL 的等分試樣。在此處瞭解更多資訊: mt.com/NanoRep

如何使用多通道移液器?

準確、可重複的多通道移液中,最重要的因素是移液器每個通道的密封完整性。這意味著每個尖端都完美地安裝在每個軸上,並且不會漏氣。不同的製造商以不同的方式實現這一目標,具有不同的人體工程學易用性和密封一致性水準。Rainin 的 LTS LiteTouch 系統移液器吸頭從多通道載入和彈出時需要的力最小,並且每次都能始終如一地密封。

點擊此處查看Rainin的各種多通道移液器。

握住移液器的正確方法是什麼?

吸吸時,將移液器盡可能靠近垂直方向,避免與 Y 軸成 20° 以上的任何角度。分配時,如果您要接觸目標容器的壁以完全從尖端拉出所有液體,則可以超過 20° 角。

什麼是正向和反向移液?

正向移液是標準的移液技術,也是水性樣品的最佳選擇。對於粘性和揮發性樣品,反向移液可提供更高的準確度。

要向前移液器,請將柱塞向下推至第一個停止點,同時將移液器保持在液體之外。然後,將尖端浸入您正在使用的液體中 2-10 毫米深 - 不要更深。慢慢釋放柱塞至完全伸展,以吸出全部液體體積。要分配到目標容器中,請將移液器移入容器中,然後以均勻的速率通過第一個擋塊一直按壓到第二個擋塊 - 只要柱塞走得遠。在柱塞完全按下的情況下,輕輕地將移液器的尖端拖到容器壁上以“接觸”。這有助於完全分配全部液體體積。鬆開柱塞,彈出移液器吸頭,裝入新的移液器吸頭,然後重複。

要反向移液器,將柱塞完全向下推,穿過第一個擋塊到第二個擋塊 - 只要柱塞走得遠。然後,將尖端浸入液體中,緩慢而均勻地釋放柱塞以吸出。移動到接收容器並將柱塞按至第一個停止以分配正確的體積。一小塊殘留量將留在移液器吸頭中。將移液器移到丟棄容器上,然後將柱塞的其餘部分向下壓至第二個擋塊,也稱為「吹氣」擋塊,以釋放任何剩餘的液體。 

鬆開柱塞,彈出移液器吸頭,裝入新的移液器吸頭,然後重複。

如何移液粘稠液體?

空氣置換式移液器可用於移液輕微粘稠的液體,包括血液。為獲得最大準確度,請使用上述反向移液技術。對於更粘稠的液體,如85%甘油或Triton X-100,外置活塞式移液器可提供最佳的準確性和一致性。

如何移液揮發性液體?

輕微揮發的液體(如乙醇)可以使用上述反向移液技術使用空氣置換式移液器進行移液。然而,外置活塞式移液器是揮發性液體的更好選擇。 

如果使用空氣置換式移液器,請在移液體積之前至少預沖洗移液器吸頭(吸液和分液)五次。這樣可以平衡移液器內的空氣,減慢液體的蒸發速度。揮發性液體的快速蒸發會膨脹移液器內的空氣,並迫使液體從吸頭流出,而不會對柱塞施加任何壓力,這降低了準確的體積輸送。

揮發性液體(如乙腈)通常最好使用外置活塞式移液器處理。

移液會產生氣溶膠嗎?

是的,使用空氣置換式移液器進行移液會產生氣溶膠。氣溶膠會上升到移液器內部,並污染內壁和活塞。當柱塞在抽吸過程中釋放得太快時,更容易發生氣溶膠,並且如果分液速度過快,也可能在移液器外的相反方向發生氣溶膠。 

為盡量減少氣溶膠,請緩慢而均勻地吸吸和分配。使用過濾過的提示。 

外置活塞式移液器使用注射器式吸頭,可防止氣溶膠。外置活塞式移液器是移液危險液體和任何粘度或揮發性較高的液體的最佳選擇。

液體的溫度如何影響移液?

非常冷或非常熱的液體會改變空氣置換式移液器內的氣壓,導致移液不準確。 

外置活塞式移液器具有注射器式吸頭,液體和活塞之間沒有氣穴,不受液體不同溫度的影響。外置活塞式移液器可在處理非室溫液體時提供準確的結果。

如果您必須使用空氣置換式移液器移液非常熱或非常冷的液體,請不要預先沖洗移液器吸頭,這通常是獲得最準確度的最佳實踐。相反,應迅速吸出和分液,以盡量減少液體溫度對移液器內部氣隙的影響。

移液時如何避免氣泡?

為避免移液時產生氣泡和起泡,請勿將吸頭浸入儲液器中超過 10 毫米,並緩慢吸出。

反向移液提供了額外的保護,因為在吸氣之前,您將柱塞完全壓到第 2 檔,因此無法將空氣注入液體樣品。有關反向移液的更多資訊,請訪問 此頁面。 

外置活塞式移液器在與液體相互作用時不會產生氣泡或泡沫,因為其注射器式吸頭不會為液體提供空氣以與之相互作用。

對移液器進行消毒的最佳方法是什麼?

用濕布和清潔劑(如異丙醇或 10% 漂白劑溶液)擦拭移液器,對移液器進行去汙。避免使用千分尺的透明塑膠視窗。

高壓滅菌可能是另一種選擇,但請檢查移液器的儀器規格。如果是可高壓滅菌的,是整個儀器進行高壓滅菌還是僅對液體端進行高壓滅菌?  通常,只有液體端可以進行高壓滅菌。

有關清潔移液器的更多資訊,請獲取 清潔移液器 海報。

如何校准移液器?

校準是對移液器的系統誤差率(準確度)和隨機誤差率(精度)的受控和記錄測量。在許多實驗室環境中,移液器的性能必須根據法律在由認可機構認證的特定條件下進行定期測試和記錄。 

經過 ISO 認證的供應商在受控環境中校准移液器。結果安全地記錄在校準證書上,為每台儀器增加了可審計的性能歷史記錄。當需要調整時,ISO 認證的校準實驗室會提供製造商推薦的零件和潤滑劑的專家服務。 

Rainin和梅特勒-托利多是全球最大的移液器服務組織,提供從 郵寄到現場服務選項的快速周轉。服務實驗室已通過 ISO 17025 認證,程式遵循 2022 年 ISO 8655 更新。 

如何計算移液器的準確度和精密度?

移液器準確度(或現在稱為真實度)是所有測量值(4-10 次測量)的平均體積與設定體積之間的差值。 

精度是所執行的所有測量的標準偏差。其他讀數與每個讀數相距多遠?

如何計算移液器的不確定性?

移液器的不確定度是其整體準確性的定量術語。它是真實度(系統誤差的量度)和精度(隨機誤差的量度)的組合。 

不確定性方程為: 

不確定度 = 系統誤差 + 隨機誤差 * k. k(覆蓋因數或 Z 分數)取決於測量次數。K=3.31 四次測量,2 次測量 10 次。

存放移液器的最佳方法是什麼?

將移液器垂直存放,掛在架子或移液器支架上。保持移液器清潔,無任何污染物。保持移液器吸頭架關閉。