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Espectroscopia UV/Vis en aplicaciones bio
Acelere su investigación con mediciones precisas para ácidos nucleicos, proteínas y cultivos celulares. Descubra cómo nuestros espectrofotómetros resuelven los desafíos diarios de su laboratorio.
Espectroscopia UV/Vis en aplicaciones bio es una forma rápida y fiable de medir cómo las muestras biológicas absorben la luz. Al analizar ácidos nucleicos, proteínas y cultivos celulares, los investigadores pueden evaluar rápidamente la concentración, la pureza y la calidad de la muestra en los flujos de trabajo diarios de ciencias de la vida.
Las mediciones bio típicas incluyen la cuantificación de ADN y ARN, el análisis de la concentración de proteínas y mediciones de densidad óptica como OD600 para el monitoreo de cultivos celulares. Estos resultados ayudan a los científicos a verificar la calidad de la muestra antes de los experimentos posteriores, preparar ensayos con confianza y monitorizar el crecimiento celular y la biomasa.
Este método analítico permite mediciones rápidas, precisas y reproducibles, ayudando a los investigadores a mantener su trabajo eficiente, consistente y fiable.
Por favor, describa su proyecto. /content/mx/es/home/applications/Application_Browse_Laboratory_Analytics/uv-vis-spectroscopy/uv-vis-bio-applications.fb.1.c.11.html
¿Por qué es importante la espectroscopia UV/Vis en aplicaciones bio?
La espectroscopia UV/Vis ofrece a los investigadores una forma rápida y fiable de evaluar muestras biológicas sin una preparación compleja. Ayuda a ahorrar tiempo en el laboratorio al proporcionar información inmediata que respalda una mejor toma de decisiones durante los experimentos. Como es versátil y fácil de usar, se ha convertido en una herramienta de confianza para el análisis rutinario en muchos flujos de trabajo de ciencias de la vida.
Sus desafíos diarios en el laboratorio
Entendemos las presiones a las que se enfrenta. Así es como le ayudamos.
Preparación de muestras que consume mucho tiempo
Pasar horas en diluciones y preparación de muestras es propenso a errores y desperdicia valioso tiempo de investigación y muestras valiosas.
UV5Nano: medición directa de 0.5-2 µL
Resultados inconsistentes
Las variaciones entre mediciones y operadores comprometen la confiabilidad y la reproducibilidad de los datos.
Los métodos OneClick™ garantizan la consistencia
Volumen limitado de muestra
Las muestras valiosas requieren múltiples análisis, pero apenas tiene suficiente material para una sola prueba.
La capacidad de microvolumen ahorra muestras
Documentación de cumplimiento
Cumplir con los requisitos normativos con una gestión adecuada de los datos resulta abrumador sin las herramientas correctas.
Software LabX®: preparado para 21 CFR Parte 11
Desarrollo de métodos
Crear y validar nuevos métodos lleva demasiado tiempo cuando se necesitan resultados inmediatos.
Métodos preprogramados y listos para usar
Aplicaciones
Descubra cómo investigadores como usted están logrando resultados innovadores.
Análisis de DNA y RNA
Cuantificación de ácidos nucleicos
Asegure el éxito de sus aplicaciones posteriores con una cuantificación precisa de ácidos nucleicos. Las mediciones de mala calidad conducen a experimentos fallidos.
Mida con confianza:
Concentración de ADN/ARN (A260)
Pureza de ADN/ARN (relaciones 260/280, 260/230)
Determinación de la concentración de oligos (ssDNA)
Análisis de proteínas
Concentración y pureza
Desde la expresión de proteínas hasta la purificación, una cuantificación precisa en cada paso garantiza resultados reproducibles en su investigación de biología estructural y terapéutica.
Trabajo integral con proteínas:
Ensayos de Bradford, BCA, Biuret, Lowry
Medición directa de A280
Actividad enzimática
Cinética y ensayos
Comprenda el comportamiento de las enzimas en tiempo real con capacidades de monitoreo continuo y control de temperatura.
Mediciones dinámicas:
Cinética de Michaelis-Menten
Aplicaciones de cultivo celular
Crecimiento y viabilidad
El monitoreo en tiempo real del cultivo evita el sobrecrecimiento, optimiza el momento de la cosecha y garantiza la consistencia entre experimentos.
Monitoree sus cultivos:
Densidad celular (OD600)
Análisis de la curva de crecimiento
Elija la solución UV/Vis adecuada para su flujo de trabajo biológico
Si su laboratorio necesita...
Solución recomendada
Por qué
Mediciones rutinarias basadas en cubeta
UV5Bio
Ideal para aplicaciones biológicas estándar, cinética, barrido, longitud de onda fija y cuantificación
Muestras valiosas con volumen limitado
UV5Nano
Requiere solo 1 µL de muestra y admite mediciones de microvolumen
Flujos de trabajo tanto de microvolumen como basados en cubeta
UV5Nano
Combina mediciones de microvolumen y basadas en cubeta en un solo instrumento compacto
Alto rendimiento de muestras con métodos consistentes
UV5Bio o UV5Nano + métodos OneClick™
Admite métodos predefinidos, accesos directos y gestión de datos
Resumen de las soluciones UV/Vis recomendadas según las necesidades comunes de aplicaciones biológicas, el volumen de muestra y los requisitos del flujo de trabajo.
Desplácese por la Biblioteca de aplicaciones UV/Vis
El grupo de soporte de mercado de METTLER TOLEDO ofrece una amplia gama de aplicaciones UV/Vis probadas y validadas, listas para descargar. En nuestra biblioteca de aplicaciones encontrará notas de aplicación y métodos correspondientes que pueden descargarse e importarse en sus instrumentos.
La cantidad mínima de muestra requerida para un análisis fiable es 1 μL. La muestra pura se pipetea simplemente sobre la plataforma de medición. Dependiendo del método y del instrumento utilizado, la longitud de trayectoria requerida se ajusta automáticamente o de forma manual.
Reducción de errores
La espectroscopía UV/Vis de microvolumen ofrece una cantidad significativa de ventajas que contribuyen a la reducción general de errores en el flujo de trabajo. Un beneficio importante es que las concentraciones de las muestras pueden medirse sin dilución previa. Las mediciones son más confiables y precisas al analizar ácidos nucleicos y/o proteínas altamente concentrados que al analizar preparaciones de muestra más diluidas.
Tiempo hasta el resultado
El siguiente estudio tiene como objetivo demostrar las diferencias significativas en el tiempo hasta el resultado obtenidas con los siguientes flujos de trabajo analíticos de medición UV/Vis. Como verá, la medición de microvolumen mediante la tecnología adecuada permite procesar 100 muestras en poco más de 100 minutos. Esto resulta bastante favorable, en términos de ahorro de tiempo y esfuerzo, tanto frente al procesamiento manual como al uso de cubetas desechables, al tiempo que reduce significativamente la cantidad de residuos generados por el proceso.
Las tecnologías comparadas fueron:
Fotometría automática de microvolumen (AMVP). El principio de medición utilizado es la compresión de la muestra.
Fotometría manual de microvolumen (MMVP) mediante un dispositivo manual de microvolumen disponible comercialmente, que puede montarse en un portacubetas de un espectrofotómetro convencional de cubetas. El principio de medición utilizado en este dispositivo es la técnica de compresión de la muestra.
Fotometría de macrovolumen utilizando una cubeta de cuarzo semimicro de 10 mm de longitud de trayectoria.
Fotometría de macrovolumen utilizando una cubeta semimicro desechable de 10 mm de longitud de trayectoria.
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El siguiente estudio tiene como objetivo demostrar las diferencias significativas en el tiempo hasta el resultado obtenidas con los siguientes flujos de trabajo analíticos de medición UV/Vis. Como verá, la medición de microvolumen mediante la tecnología adecuada permite procesar 100 muestras en poco más de 100 minutos. Esto resulta bastante favorable, en términos de ahorro de tiempo y esfuerzo, tanto frente al procesamiento manual como al uso de cubetas desechables, al tiempo que reduce significativamente la cantidad de residuos generados por el proceso.
Las tecnologías comparadas fueron:
Fotometría automática de microvolumen (AMVP). El principio de medición utilizado es la compresión de la muestra.
Fotometría manual de microvolumen (MMVP) mediante un dispositivo manual de microvolumen disponible comercialmente, que puede montarse en un portacubetas de un espectrofotómetro convencional de cubetas. El principio de medición utilizado en este dispositivo es la técnica de compresión de la muestra.
Fotometría de macrovolumen utilizando una cubeta de cuarzo semimicro de 10 mm de longitud de trayectoria.
Fotometría de macrovolumen utilizando una cubeta semimicro desechable de 10 mm de longitud de trayectoria.
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Eliminación de residuos
El siguiente estudio analiza la acumulación de residuos debida a consumibles desechables (puntas de pipeta y cubetas de plástico) en los distintos pasos del flujo de trabajo involucrados en los análisis de tiempo hasta el resultado. La figura ilustra la generación total de residuos plásticos (según el peso acumulado) por flujo de trabajo analítico para 6 mediciones consecutivas en una serie de muestras, extrapolada a 100 muestras.
El flujo de trabajo de microvolumen elimina la dependencia de las cubetas desechables y mantiene un tiempo hasta el resultado similar, aunque ligeramente más largo. Según la escala de los análisis realizados, esto puede traducirse no solo en muchos menos residuos plásticos, sino también en costos reducidos. Por lo tanto, junto con un tiempo de procesamiento favorable y el ahorro de sustancia de muestra, el cambio de mediciones UV/Vis de macrovolumen a microvolumen cuando sea apropiado mejora la rentabilidad y la sostenibilidad ambiental del flujo de trabajo.
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El siguiente estudio analiza la acumulación de residuos debida a consumibles desechables (puntas de pipeta y cubetas de plástico) en los distintos pasos del flujo de trabajo involucrados en los análisis de tiempo hasta el resultado. La figura ilustra la generación total de residuos plásticos (según el peso acumulado) por flujo de trabajo analítico para 6 mediciones consecutivas en una serie de muestras, extrapolada a 100 muestras.
El flujo de trabajo de microvolumen elimina la dependencia de las cubetas desechables y mantiene un tiempo hasta el resultado similar, aunque ligeramente más largo. Según la escala de los análisis realizados, esto puede traducirse no solo en muchos menos residuos plásticos, sino también en costos reducidos. Por lo tanto, junto con un tiempo de procesamiento favorable y el ahorro de sustancia de muestra, el cambio de mediciones UV/Vis de macrovolumen a microvolumen cuando sea apropiado mejora la rentabilidad y la sostenibilidad ambiental del flujo de trabajo.
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Tecnología LockPath™: mediciones confiables de microvolúmenes
El análisis de microvolumen ayuda a proteger muestras biológicas valiosas, pero para obtener resultados fiables se requiere una longitud de trayectoria óptica precisa y repetible. Con la tecnología LockPath™, el UV5Nano bloquea automáticamente el brazo de medición en una longitud de trayectoria definida, lo que ayuda a los usuarios a obtener resultados consistentes con un volumen mínimo de muestra.
La tecnología admite mediciones precisas con longitudes de trayectoria de 0,1 mm y 1 mm, fija el brazo durante la medición y ayuda a reducir el secado de la muestra durante el análisis. Esto facilita la medición de muestras concentradas de ADN, ARN o proteínas sin dilución y con mayor confianza.
Principales beneficios:
Ayuda a asegurar mediciones precisas de microvolumen
Reduce la variabilidad causada por diferencias en la longitud de trayectoria
Permite resultados fiables con solo 1 µL de muestra
Ayuda a evitar errores relacionados con la dilución
Permite medir con confianza muestras biológicas valiosas
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El análisis de microvolumen ayuda a proteger muestras biológicas valiosas, pero para obtener resultados fiables se requiere una longitud de trayectoria óptica precisa y repetible. Con la tecnología LockPath™, el UV5Nano bloquea automáticamente el brazo de medición en una longitud de trayectoria definida, lo que ayuda a los usuarios a obtener resultados consistentes con un volumen mínimo de muestra.
La tecnología admite mediciones precisas con longitudes de trayectoria de 0,1 mm y 1 mm, fija el brazo durante la medición y ayuda a reducir el secado de la muestra durante el análisis. Esto facilita la medición de muestras concentradas de ADN, ARN o proteínas sin dilución y con mayor confianza.
Principales beneficios:
Ayuda a asegurar mediciones precisas de microvolumen
Reduce la variabilidad causada por diferencias en la longitud de trayectoria
Permite resultados fiables con solo 1 µL de muestra
Ayuda a evitar errores relacionados con la dilución
Permite medir con confianza muestras biológicas valiosas
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Longitudes de trayectoria óptica óptimas según la concentración de la muestra
Longitud de trayectoria óptica [mm]
Límite
Concentración de dsDNA [ng/μL]
Concentración de BSA [mg/mL]
10 (cubeta)
Bajo
0.5
0.015
Alto
100
4,500
1 (plataforma de microvolumen)
Bajo
5
0.15
Alto
1,000
45
0.1 (plataforma de microvolumen)
Bajo
50
1.5
Alto
10,000
450
Resumen de los límites de cuantificación dependientes de la longitud de trayectoria óptica para muestras de ácidos nucleicos y proteínas.
¿Por qué elegir el espectrofotómetro Excellence UV5Bio y UV5Nano?
UV5Bio Excellence Spectrophotometer
UV5Nano Excellence Spectrophotometer
Tecnología diseñada en torno a su flujo de trabajo ✅
Incorpore su espectrofotómetro UV-VIS a la red del laboratorio
Respuestas a sus preguntas frecuentes
¿Cómo se utiliza la espectroscopía UV/Vis en aplicaciones biológicas?
La espectroscopía UV/Vis es una de las técnicas analíticas más utilizadas en los laboratorios de ciencias de la vida porque ofrece resultados rápidos, precisos y no destructivos a partir de volúmenes de muestra muy pequeños. Las aplicaciones clave incluyen:
Cuantificación de ácidos nucleicos: las concentraciones de ADN y ARN se miden a 260 nm. La pureza de la muestra se evalúa mediante la relación de absorbancia 260/280 nm; una relación de ~1.8 indica ADN puro, mientras que valores inferiores pueden señalar contaminación por proteínas o disolventes.
Análisis de proteínas: la concentración de proteínas se determina a 280 nm o mediante ensayos colorimétricos (Bradford, BCA), lo que respalda la preparación de muestras y los flujos de trabajo posteriores.
Monitoreo de la densidad celular (OD600): el crecimiento bacteriano en cultivo se rastrea midiendo la densidad óptica a 600 nm, lo que permite condiciones de cultivo reproducibles.
Mediciones de microvolumen: con apenas 1 µL de muestra, los espectrofotómetros modernos eliminan la necesidad de dilución y preservan el valioso material biológico.
Control de calidad de muestras: la espectroscopía UV/Vis ayuda a verificar que las muestras biológicas cumplan los umbrales de calidad antes de su uso en PCR, secuenciación u otras aplicaciones posteriores sensibles.
¿Cuál es la diferencia entre el UV5Nano y el UV5Bio?
Ambos instrumentos están diseñados específicamente para aplicaciones de ciencias de la vida y comparten los mismos métodos preprogramados para ácidos nucleicos, proteínas y densidad celular. La diferencia clave es el modo de medición: el UV5Nano permite determinar la concentración y la pureza de muestras de ácidos nucleicos y proteínas con tan solo 1 µL mediante una plataforma de microvolumen, mientras que el UV5Bio es un instrumento dedicado a mediciones estándar en cubeta para ciencias de la vida, con una amplia gama de aplicaciones de medición directa predefinidas. Si su laboratorio trabaja habitualmente con muestras valiosas o de bajo volumen, el UV5Nano es la mejor opción.
¿Qué volumen de muestra se necesita para una medición de microvolumen?
El UV5Nano solo requiere 1 µL de muestra para realizar mediciones confiables. La muestra pura se pipetea sobre la superficie de medición y el brazo se bloquea automáticamente en una trayectoria de paso de luz precisamente definida; se garantiza la precisión de la medición y se evitan errores, ya que la muestra no necesita diluirse. Esto lo hace ideal para extractos biológicos valiosos en los que la conservación de la muestra es fundamental.
¿Qué rango de concentración puedo medir sin diluir mi muestra?
El UV5Nano mide automáticamente en dos trayectorias de paso de luz precisamente definidas, lo que permite cubrir un amplio rango de concentraciones. Las muestras de dsDNA con concentraciones de 6 ng/µL a 15,000 ng/µL pueden medirse sin diluciones adicionales en 2 segundos por trayectoria de paso de luz. Para ARN y BSA, el rango óptimo de medición es de 10–10,000 ng/mL para dsDNA y ARN, y de 0.5–400 mg/mL para BSA.
¿Es el UV5Nano adecuado para entornos biofarmacéuticos regulados?
Sí. La automatización opcional y el cumplimiento con la Parte 11 del CFR Título 21 satisfacen las necesidades de los laboratorios de ciencias de la vida y biotecnología. El UV5Nano puede operarse con el software LabX™ UV/Vis, que ofrece trazabilidad completa de auditoría, gestión de usuarios y firmas electrónicas. Combinado con el módulo CertiRef™ para la verificación automatizada del rendimiento conforme a la farmacopea, el instrumento se integra sin problemas en flujos de trabajo GLP y GMP.
¿Qué puedo medir con espectroscopía UV/Vis en aplicaciones biológicas?
Con la espectroscopía UV/Vis, puede medir parámetros clave de la muestra, como la concentración de ácidos nucleicos, el contenido de proteínas, las relaciones de pureza y la densidad celular. Estas mediciones ayudan a evaluar la calidad de la muestra y a decidir si está lista para análisis adicionales. Es una técnica versátil para muchos flujos de trabajo bio comunes en laboratorios de investigación y biotecnología.
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