파이펫팅의 오류는 qPCR실험 결과 값에 큰 영향을 미칩니다.

- 아래의 연구 결과를 살펴 보면 qPCR실험에서 올바른 파이펫팅 방법이 매우 중요함을 알 수 있습니다.

Real-time PCR 기술

RT PCR 또는 qPCR은 핵산의 정량분석을 하는데 있어 가장 많이 쓰이고 있으며, 타겟 DNA 분자의 증폭을 
같이 하기도 합니다. 이러한 민감한 실험 과정에서
Serial dilution을 통해 표준 그래프를 볼 수 있습니다.
각각 Serial dilution의 과정에서 파이펫팅의 단계가
있으며, 이때 파이펫팅의 작은 오류는 실험의
결과값을 완전히 다르게 나타낼 수 있습니다.

파이펫팅 오류로 인한
qPCR실험의 결과에 미치는 영향

RAININ는 qPCR실험에서 10번의 Serial Dilution통해 파이펫팅 오류에 대한 영향을 조사하였습니다.
그림 2에서와 같이 -20%의 파이펫팅 오류는 약 86% 효율을 보이며, 그림  3에서와 같이 +20%에 대한
파이펫팅 오류는 118.7%의 효율을 보입니다.
이런 결과로 알 수 있듯이 두 경우 모두 실험을 다시 해야 하는 상황이며, 올바는 파이펫팅 방법에 의한
표준 곡선은 95~105% 증폭 효율이 나온 것을 볼 수
있습니다.

- qPCR 실험에서 가장 이상적인 증폭 효율은 90~110%정도 이며, 이것보다 높거나 낮은 것은 제대로 수행되지 않은 실험이라고 간주할 수 있습니다