如何测量pH值-含TRIS的样品
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提示和技巧

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TRIS缓冲液,通常存在于生物样品中,可能会对pH测量造成一定程度的挑战。 选择合适的参比系统可以有效的提高电极的精度和寿命。

pH测量应用指南-TRIS样品
pH测量应用指南-TRIS样品

pH 测量概述

TRIS缓冲液,通常存在于生物样品中,可能会对pH测量造成一定程度的挑战。这是因为传统的电解质溶液和TRIS关键成分间的相互作用会导致液络部堵塞和电极寿命降低。选择合适的参比系统可以有效的提高电极的精度和寿命。

目录:

  1. 标准Ag/AgCl参比系统
  2. 含TRIS样品的测量挑战
  3. 如何测量含TRIS样品
  4. The ARGENTHAL™ 参比系统
在含蛋白质样品中如何获得准确的pH值

1. 标准Ag/AgCl参比系统

任何pH测量都需要两根电极:一根pH指示电极,一根参比电极。现在通常使用的是二合一复合电极,同时包含指示电极和参比电极。

图1 :参比和测量二合一复合电极
图1 :参比和测量二合一复合电极

pH测量中最常用的参比系统是Ag/AgCl参比系统。常规的Ag/AgCl参比系统由一根涂敷AgCl涂层的银导线和能通过液络部与样品相通的参比液组成。对于这种结构,重要的是参比液必须是饱和的AgCl溶液,以确保银导线上涂敷的AgCl涂层不会被消耗和分解。为了保持一个稳定的电位,AgCl涂层一定不能消耗尽,并且液络部必须保证参比液能够持续流入样品。

2. 含TRIS样品的测量挑战


一般的Ag/AgCl电极不能用来测量TRIS样品。已知许多成分会和Ag离子结合生成更大的分子或沉淀。事实上,AgCl本身也是一种沉淀,在水溶液中的溶解度相当有限。另外,Ag离子和TRIS分子也会生成一种类似的化合物。标准参比液中的Ag离子流入样品时,如果样品中含有TRIS缓冲液,这两种物质会相互结合并生成一种稳定的沉淀物。不幸的是,生成沉淀的位置恰好位于液络部处(带有多孔的陶瓷芯)。该沉淀反应会堵塞液络部的多孔结构,导致参比液无法流出。一旦这种状况发生,样品溶液和参比系统间的连通会被隔绝,并且参比系统无法再产生一个稳定的电位。最终导致pH读数不稳和读数错误。

图2:从左到右:黑色温度探头前干净的液络部(白“点”)和受到污染的液络部(黑“点”)
图2:从左到右:黑色温度探头前干净的液络部(白“点”)和受到污染的液络部(黑“点”)
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