为什么 UV/Vis 光谱在生物应用中很重要？
UV/Vis 光谱为研究人员提供了一种快速且可靠的方式，无需复杂样品制备即可评估生物样品。它通过提供即时洞察，帮助节省实验室时间，并支持在实验过程中做出更好的决策。由于其用途广泛且易于使用，它已成为许多生命科学工作流程中常规分析值得信赖的工具。
生物应用中的 UV/Vis 光谱
通过精确测量核酸、蛋白质和细胞培养，加快您的研究进程。了解我们的分光光度计如何解决您日常实验室中的挑战。
您的日常实验室挑战
我们了解您面临的压力。以下是我们的帮助方式。
耗时的样品制备
花费数小时进行稀释和样品制备不仅容易出错，还会浪费宝贵的研究时间和有价值的样品。
UV5Nano：0.5-2 µL 直接测量
结果不一致
测量之间以及不同操作人员之间的差异会影响数据的可靠性和可重复性。
OneClick™ 方法确保一致性
有限样品体积
珍贵样品需要进行多项分析，但你几乎只有足够做一次测试的材料。
微量能力可节省样品
合规文档
在没有合适工具的情况下，要满足监管要求并妥善管理数据令人倍感压力。
LabX® 软件：符合 21 CFR Part 11 要求
方法开发
当你需要立刻得到结果时，创建并验证新方法会耗费太多时间。
预先编程、即用型方法
应用
了解像您这样的研究人员如何取得突破性成果。
DNA 和 RNA 分析
核酸定量
通过准确的核酸定量确保您的下游应用成功。质量不佳的测量会导致实验失败。
精准测量：
- DNA/RNA 浓度（A260）
- DNA/RNA 纯度（260/280、260/230 比值）
- 寡核苷酸（ssDNA）浓度测定
蛋白质分析
浓度与纯度
从蛋白表达到纯化，在每一步都进行准确定量，确保您的结构生物学和治疗研究获得可重复的结果。
全面的蛋白质工作流程：
- Bradford、BCA、Biuret、Lowry 测定法
- 直接 A280 测量
酶活性
动力学与测定
借助持续监测功能和温度控制，实时了解酶的行为。
动态测量：
- 米氏-曼腾动力学
细胞培养应用
生长与活力
实时培养监测可防止过度生长，优化收获时机，并确保各实验之间的一致性。
监测您的培养物：
- 细胞密度（OD600）
- 生长曲线分析
为您的生物工作流程选择合适的 UV/Vis 解决方案
| 如果您的实验室需要... | 推荐方案 | 原因 |
| 常规比色皿测量 | UV5Bio | 适用于标准生物应用、动力学、扫描、固定波长和定量分析 |
| 样品珍贵且体积有限 | UV5Nano | 仅需 1 µL 样品，并支持微量体积测量 |
| 同时需要微量体积和比色皿工作流程 | UV5Nano | 在一台紧凑型仪器中结合了微量体积和比色皿测量 |
| 在保持方法一致性的同时实现高样品通量 | UV5Bio or UV5Nano + OneClick™ 方法 | 支持预定义方法、快捷方式和数据处理 |
根据常见生物应用需求、样品体积和工作流程要求，对推荐的 UV/Vis 解决方案进行概述。
浏览 UV/Vis 应用库
METTLER TOLEDO 的市场支持团队提供了大量经过验证和测试的 UV/Vis 应用，现已可供下载。在我们的应用库中，您可以找到应用说明及相应的方法，这些内容可下载并导入到您的仪器中。
微量分光光度法的优势
少量样品
可靠分析所需的最小样品量为 1 μL。只需将纯样品移液至测量平台上。根据所使用的方法和仪器，所需光程会自动或手动调节。
误差降低
微量 UV/Vis 光谱技术具有多项显著优势，可帮助整体流程降低误差。其中一大优点是无需预先稀释即可测定样品浓度。与检测较稀释的样品制备相比，在检测高浓度核酸和/或蛋白质时，测量结果更加可靠、准确。
结果时间
以下研究旨在展示采用下述 UV/Vis 分析测量流程在获得结果所需时间方面的显著差异。您将看到，使用适当技术进行微量测量，仅需略多于 100 分钟即可处理 100 个样品。与手动处理和使用一次性比色皿相比，这在节省时间和人力方面都更具优势，同时还能显著减少该过程产生的废弃物。
比较的技术包括：
- 自动化微量光度法（AMVP）。所使用的测量原理为样品压缩。
- 使用市售手动微量装置的手动微量光度法（MMVP），该装置可安装在常规比色皿分光光度计的比色皿支架中。该装置所采用的测量原理为样品压缩技术。
- 使用光程为 10 mm 的半微量石英比色皿进行宏量光度测量。
- 使用光程为 10 mm 的一次性半微量比色皿进行宏量光度测量。
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废弃物处理
以下研究分析了在结果时间分析所涉及的各个流程步骤中，由一次性耗材（移液枪头和塑料比色皿）带来的废弃物累积。图中展示了在一个样品系列中连续 6 次测量的情况下，按分析流程计算并外推至 100 个样品后的每个分析流程产生的塑料废弃物总量（基于累积重量）。
微量流程在保持相近、即便略长的结果时间的同时，消除了对一次性比色皿的依赖。根据所进行分析的规模，这不仅可显著减少塑料废弃物，还能降低成本。因此，在适用情况下，由宏量 UV/Vis 测量改为微量 UV/Vis 测量，除可获得较好的处理时间并节省样品物质外，还能提升该流程的成本效率和环境可持续性。
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LockPath™ 技术：可靠的微量测量
微量分析有助于保护珍贵的生物样品，但要获得可靠结果，需要精确且可重复的光程。借助 LockPath™ 技术，UV5Nano 可自动将测量臂锁定在设定的光程上，帮助用户在最小样品体积下获得一致的结果。
该技术支持在 0.1 mm 和 1 mm 光程下进行准确测量，在测量过程中固定测量臂，并有助于减少分析过程中的样品干燥。这使得无需稀释即可更轻松地测量高浓度 DNA、RNA 或蛋白质样品，并增强测量信心。
主要优势：
- 有助于确保微量测量的准确性
- 减少由光程差异引起的变异
- 仅需 1 µL 样品即可获得可靠结果
- 有助于避免与稀释相关的误差
- 可更有把握地测量珍贵的生物样品
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根据样品浓度优化光程
| 光程长度 [mm] | 限制 | dsDNA 浓度 [ng/μL] | BSA 浓度 [mg/mL] |
|---|---|---|---|
| 10 (比色皿) | 低 | 0.5 | 0.015 |
| 高 | 100 | 4,500 | |
| 1 (微量样品平台) | 低 | 5 | 0.15 |
| 高 | 1,000 | 45 | |
| 0.1 (微量样品平台) | 低 | 50 | 1.5 |
| 高 | 10,000 | 450 |
关于核酸和蛋白质样品的光程依赖性定量限的概述。
为什么选择 UV5Bio 和 UV5Nano 紫外分光光度计？
UV5Bio Excellence Spectrophotometer | UV5Nano Excellence Spectrophotometer |
Technology designed around your workflow | |
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处理珍贵的生物样品？UV5Nano 和 UV5Bio 帮助您自信测量
处理珍贵的生物样品？UV5Nano 和 UV5Bio 帮助您自信测量
- 比色皿和微量样品工作流程
- DNA、RNA、蛋白质和 OD600 的预定义方法
- 用于一致日常测量的 OneClick™ 快捷方式
- 用于数据处理和合规性的 LabX® 软件支持
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视频与使用知识
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常见问题解答
紫外/可见光谱如何用于生物应用？
UV/Vis 光谱是生命科学实验室中应用最广泛的分析技术之一，因为它能从极少量样品中快速、准确且无损地获得结果。主要应用包括：
- 核酸定量：在 260 nm 处测量 DNA 和 RNA 浓度。通过 260/280 nm 吸光度比评估样品纯度——约为 1.8 的比值表示纯净 DNA，而更低的数值可能表明存在蛋白质或溶剂污染。
- 蛋白质分析：在 280 nm 处或通过比色法（Bradford、BCA）测定蛋白质浓度，以支持样品制备和下游工作流程。
- 细胞密度监测（OD600）：通过测量 600 nm 处的光密度来跟踪培养中的细菌生长，从而实现可重复的培养条件。
- 微量测量：仅需少至 1 µL 的样品，现代分光光度计即可免去稀释步骤，并保留宝贵的生物材料。
- 样品质量控制：UV/Vis 光谱有助于在 PCR、测序或其他对下游应用敏感的实验使用前，验证生物样品是否达到质量阈值。
UV5Nano 和 UV5Bio 有什么区别？
这两款仪器都专为生命科学应用而设计，并共用相同的核酸、蛋白质和细胞密度预编程方法。关键区别在于测量模式：UV5Nano 采用微量平台，可对低至 1 µL 的核酸和蛋白质样品进行浓度和纯度测定；而 UV5Bio 是一款专用于生命科学标准比色皿测量的仪器，提供多种预定义的直接测量应用。如果你的实验室经常处理珍贵样品或低体积样品，UV5Nano 会是更合适的选择。
微量测量需要多少样品体积？
UV5Nano 仅需 1 µL 样品即可进行可靠测量。将纯样品移取到测量表面后，臂会自动锁定到精确定义的光程——无需稀释样品即可确保测量准确性并避免错误。这使其非常适合样品保存至关重要的珍贵生物提取物。
在不稀释样品的情况下，我可以测量多大浓度范围？
UV5Nano 可自动在两个精确定义的光程下进行测量，从而覆盖很宽的浓度范围。浓度为 6 ng/µL 至 15,000 ng/µL 的 dsDNA 样品无需进一步稀释即可测量，每个光程只需 2 秒。对于 RNA 和 BSA，dsDNA 和 RNA 的最佳测量范围为 10–10,000 ng/mL，BSA 的最佳测量范围为 0.5–400 mg/mL。
UV5Nano 适用于受监管的生物制药环境吗？
是的。可选自动化和 21 CFR Part 11 合规性可满足生命科学和生物制药实验室的需求。UV5Nano 可配合 LabX™ UV/Vis 软件操作，该软件提供完整审计追踪、用户管理和电子签名。结合用于自动进行符合药典要求的性能验证的 CertiRef™ 模块，该仪器可无缝融入 GLP 和 GMP 工作流程。
在生物应用中，我可以使用紫外/可见光谱测量什么？
使用 UV/Vis 光谱法，您可以测量核酸浓度、蛋白质含量、纯度比和细胞密度等关键样品参数。这些测量有助于您评估样品质量，并判断样品是否已准备好进行进一步分析。对于研究和生物制药实验室中的许多常见生物工作流程而言，这是一种用途广泛的技术。