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Spectroscopie UV/Vis dans les applications bio
Accélérez vos recherches grâce à des mesures précises des acides nucléiques, des protéines et des cultures cellulaires. Découvrez comment nos spectrophotomètres résolvent les défis quotidiens de votre laboratoire.
La spectroscopie UV/Vis dans les applications biologiques est une méthode rapide et fiable pour mesurer la manière dont les échantillons biologiques absorbent la lumière. En analysant les acides nucléiques, les protéines et les cultures cellulaires, les chercheurs peuvent évaluer rapidement la concentration, la pureté et la qualité des échantillons dans les flux de travail quotidiens des sciences de la vie.
Les mesures biologiques typiques comprennent la quantification de l’ADN et de l’ARN, l’analyse de la concentration des protéines et les mesures de densité optique telles que l’OD600 pour le suivi des cultures cellulaires. Ces résultats aident les scientifiques à vérifier la qualité des échantillons avant les expériences en aval, à préparer les essais en toute confiance et à surveiller la croissance cellulaire et la biomasse.
Cette méthode analytique permet des mesures rapides, précises et reproductibles, aidant les chercheurs à rendre leur travail efficace, cohérent et fiable.
Merci de décrire votre projet
Pourquoi la spectroscopie UV/Vis est-elle importante dans les applications biologiques ?
La spectroscopie UV/Vis offre aux chercheurs un moyen rapide et fiable d’évaluer des échantillons biologiques sans préparation complexe. Elle permet de gagner du temps au laboratoire en fournissant des informations immédiates qui favorisent une meilleure prise de décision pendant les expériences. Grâce à sa polyvalence et à sa simplicité d’utilisation, elle est devenue un outil de confiance pour les analyses de routine dans de nombreux flux de travail des sciences de la vie.
Vos défis quotidiens au laboratoire
Nous comprenons les pressions auxquelles vous êtes confronté. Voici comment nous vous aidons.
Préparation des échantillons chronophage
Passer des heures à effectuer des dilutions et à préparer des échantillons est source d'erreurs et gaspille un temps précieux de recherche ainsi que des échantillons de valeur.
UV5Nano : mesure directe de 0,5 à 2 µL
Résultats incohérents
Les variations entre les mesures et les opérateurs compromettent la fiabilité et la reproductibilité des données.
Les méthodes OneClick™ garantissent des résultats cohérents
Volume d'échantillon limité
Les échantillons précieux nécessitent plusieurs analyses, mais vous disposez à peine de suffisamment de matière pour réaliser un seul test.
La capacité de mesure en micro-volume permet d'économiser les échantillons
Documentation de conformité
Répondre aux exigences réglementaires avec une gestion appropriée des données peut s'avérer complexe sans les outils adaptés.
Logiciel LabX® : conforme à la norme 21 CFR Part 11
Développement de méthodes
La création et la validation de nouvelles méthodes prennent trop de temps lorsque des résultats immédiats sont nécessaires.
Méthodes préprogrammées et prêtes à l'emploi
Applications
Découvrez comment des chercheurs comme vous obtiennent des résultats révolutionnaires.
Analyse de l’ADN et de l’ARN
Quantification des acides nucléiques
Garantissez la réussite de vos applications en aval grâce à une quantification précise des acides nucléiques. Des mesures de mauvaise qualité entraînent l’échec des expériences.
Mesurez en toute confiance :
Concentration en ADN/ARN (A260)
Pureté de l’ADN/ARN (rapports 260/280, 260/230)
Détermination de la concentration des oligonucléotides (ADN simple brin, ssDNA)
Analyse des protéines
Concentration et pureté
De l’expression protéique à la purification, une quantification précise à chaque étape garantit des résultats reproductibles dans vos recherches en biologie structurale et en thérapeutique.
Travaux complets sur les protéines :
Dosages Bradford, BCA, Biuret, Lowry
Mesure directe à 280 nm (A280)
Activité enzymatique
Cinétique et dosages
Comprenez le comportement des enzymes en temps réel grâce à des capacités de suivi continu et au contrôle de la température.
Mesures dynamiques :
Cinétique de Michaelis-Menten
Applications de culture cellulaire
Croissance et viabilité
La surveillance en temps réel des cultures prévient la surcroissance, optimise le moment de la récolte et garantit la cohérence entre les expériences.
Surveillez vos cultures :
Densité cellulaire (OD600)
Analyse de la courbe de croissance
Choisissez la solution UV/Vis adaptée à votre flux de travail biologique
Si votre laboratoire a besoin de...
Solution recommandée
Pourquoi
Mesures de routine en cuvette
UV5Bio
Idéal pour les applications biologiques standard, la cinétique, le balayage, la longueur d’onde fixe et la quantification
Échantillons précieux avec volume limité
UV5Nano
Ne nécessite qu’un échantillon de 1 µL et prend en charge les mesures de micro-volumes
Flux de travail à micro-volume et en cuvette
UV5Nano
Combine les mesures à micro-volume et en cuvette dans un seul instrument compact
Débit d’échantillons élevé avec des méthodes cohérentes
UV5Bio ou UV5Nano + méthodes OneClick™
Prend en charge des méthodes prédéfinies, des raccourcis et la gestion des données
Vue d’ensemble des solutions UV/Vis recommandées, fondées sur les besoins courants des applications biologiques, le volume d’échantillon et les exigences du flux de travail.
Faites défiler la bibliothèque d’applications UV/Vis
Le groupe de support marché de METTLER TOLEDO propose une large gamme d’applications UV/Vis éprouvées et testées, prêtes à être téléchargées. Dans notre bibliothèque d’applications, vous trouverez des notes d’application et les méthodes correspondantes, que vous pouvez télécharger et importer dans vos instruments.
La quantité minimale d’échantillon requise pour une analyse fiable est de 1 μL. L’échantillon pur est simplement pipeté sur la plateforme de mesure. Selon la méthode et l’instrument utilisés, la longueur de trajet requise est ajustée automatiquement ou manuellement.
Réduction des erreurs
La spectroscopie UV/Vis à micro-volume offre un nombre important d’avantages qui contribuent à la réduction globale des erreurs dans le flux de travail. Un avantage majeur est que les concentrations d’échantillons peuvent être mesurées sans dilution préalable. Les mesures sont plus fiables et plus précises lors de l’analyse d’acides nucléiques et/ou de protéines à haute concentration que lors de l’analyse de préparations d’échantillons plus diluées.
Temps jusqu'au résultat
L’étude suivante vise à démontrer les différences significatives de temps jusqu’au résultat obtenues avec les workflows de mesure UV/Vis analytiques suivants. Comme vous le verrez, la mesure en micro-volume à l’aide d’une technologie appropriée permet de traiter 100 échantillons en un peu plus de 100 minutes. Cela se compare très favorablement, en termes de gain de temps et de réduction des efforts, tant au traitement manuel qu’à l’utilisation de cuvettes jetables, tout en réduisant considérablement la quantité de déchets générés par le processus.
Les technologies comparées étaient :
Photométrie automatisée en micro-volume (AMVP). Le principe de mesure utilisé est la compression de l’échantillon.
Photométrie manuelle en micro-volume (MMVP) à l’aide d’un dispositif manuel de micro-volume disponible dans le commerce, pouvant être monté dans le porte-cuvette d’un spectrophotomètre à cuvette conventionnel. Le principe de mesure utilisé dans ce dispositif est la technique de compression de l’échantillon.
Photométrie en macro-volume à l’aide d’une cuvette quartz semi-micro de 10 mm de trajet optique.
Photométrie en macro-volume à l’aide d’une cuvette semi-micro jetable de 10 mm de trajet optique.
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L’étude suivante vise à démontrer les différences significatives de temps jusqu’au résultat obtenues avec les workflows de mesure UV/Vis analytiques suivants. Comme vous le verrez, la mesure en micro-volume à l’aide d’une technologie appropriée permet de traiter 100 échantillons en un peu plus de 100 minutes. Cela se compare très favorablement, en termes de gain de temps et de réduction des efforts, tant au traitement manuel qu’à l’utilisation de cuvettes jetables, tout en réduisant considérablement la quantité de déchets générés par le processus.
Les technologies comparées étaient :
Photométrie automatisée en micro-volume (AMVP). Le principe de mesure utilisé est la compression de l’échantillon.
Photométrie manuelle en micro-volume (MMVP) à l’aide d’un dispositif manuel de micro-volume disponible dans le commerce, pouvant être monté dans le porte-cuvette d’un spectrophotomètre à cuvette conventionnel. Le principe de mesure utilisé dans ce dispositif est la technique de compression de l’échantillon.
Photométrie en macro-volume à l’aide d’une cuvette quartz semi-micro de 10 mm de trajet optique.
Photométrie en macro-volume à l’aide d’une cuvette semi-micro jetable de 10 mm de trajet optique.
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Élimination des déchets
L’étude suivante analyse l’accumulation de déchets due aux consommables jetables (embouts de pipette et cuvettes en plastique) pour les différentes étapes du flux de travail impliquées dans les analyses du délai d’obtention du résultat. La figure illustre la production totale de déchets plastiques (sur la base du poids cumulé) par flux de travail analytique pour 6 mesures consécutives dans une série d’échantillons, extrapolée à 100 échantillons.
Le flux de travail à micro-volume élimine le recours aux cuvettes jetables tout en conservant un délai d’obtention du résultat similaire, voire légèrement plus long. Selon l’échelle des analyses réalisées, cela peut entraîner non seulement une réduction significative des déchets plastiques, mais aussi une diminution des coûts. Par conséquent, en plus d’un temps de traitement favorable et d’une économie de matière d’échantillon, le passage, lorsque cela est approprié, des mesures UV/Vis à macro-volume aux mesures à micro-volume améliore la rentabilité et la durabilité environnementale du flux de travail.
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L’étude suivante analyse l’accumulation de déchets due aux consommables jetables (embouts de pipette et cuvettes en plastique) pour les différentes étapes du flux de travail impliquées dans les analyses du délai d’obtention du résultat. La figure illustre la production totale de déchets plastiques (sur la base du poids cumulé) par flux de travail analytique pour 6 mesures consécutives dans une série d’échantillons, extrapolée à 100 échantillons.
Le flux de travail à micro-volume élimine le recours aux cuvettes jetables tout en conservant un délai d’obtention du résultat similaire, voire légèrement plus long. Selon l’échelle des analyses réalisées, cela peut entraîner non seulement une réduction significative des déchets plastiques, mais aussi une diminution des coûts. Par conséquent, en plus d’un temps de traitement favorable et d’une économie de matière d’échantillon, le passage, lorsque cela est approprié, des mesures UV/Vis à macro-volume aux mesures à micro-volume améliore la rentabilité et la durabilité environnementale du flux de travail.
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Technologie LockPath™ : mesures fiables de micro-volumes
L’analyse micro-volume permet de préserver de précieux échantillons biologiques, mais des résultats fiables exigent une longueur de trajet optique précise et répétable. Grâce à la technologie LockPath™, le UV5Nano verrouille automatiquement le bras de mesure à une longueur de trajet définie, aidant ainsi les utilisateurs à obtenir des résultats constants avec un volume d’échantillon minimal.
Cette technologie prend en charge des mesures précises à des longueurs de trajet de 0,1 mm et 1 mm, sécurise le bras pendant la mesure et contribue à réduire le dessèchement de l’échantillon au cours de l’analyse. Il est ainsi plus facile de mesurer des échantillons d’ADN, d’ARN ou de protéines concentrés sans dilution et avec une plus grande confiance.
Avantages clés :
Aide à garantir des mesures micro-volume précises
Réduit la variabilité causée par les différences de longueur de trajet
Prend en charge des résultats fiables à partir d’un échantillon de seulement 1 µL
Aide à éviter les erreurs liées à la dilution
Permet de mesurer en toute confiance de précieux échantillons biologiques
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L’analyse micro-volume permet de préserver de précieux échantillons biologiques, mais des résultats fiables exigent une longueur de trajet optique précise et répétable. Grâce à la technologie LockPath™, le UV5Nano verrouille automatiquement le bras de mesure à une longueur de trajet définie, aidant ainsi les utilisateurs à obtenir des résultats constants avec un volume d’échantillon minimal.
Cette technologie prend en charge des mesures précises à des longueurs de trajet de 0,1 mm et 1 mm, sécurise le bras pendant la mesure et contribue à réduire le dessèchement de l’échantillon au cours de l’analyse. Il est ainsi plus facile de mesurer des échantillons d’ADN, d’ARN ou de protéines concentrés sans dilution et avec une plus grande confiance.
Avantages clés :
Aide à garantir des mesures micro-volume précises
Réduit la variabilité causée par les différences de longueur de trajet
Prend en charge des résultats fiables à partir d’un échantillon de seulement 1 µL
Aide à éviter les erreurs liées à la dilution
Permet de mesurer en toute confiance de précieux échantillons biologiques
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Longueurs de trajet optique optimales selon la concentration de l’échantillon
Longueur du trajet optique [mm]
Limite
Concentration d’ADN double brin [ng/μL]
Concentration de BSA [mg/mL]
10 (cuvette)
Faible
0.5
0.015
Élevée
100
4,500
1 (plateforme à micro-volume)
Faible
5
0.15
Élevée
1,000
45
0.1 (plateforme à micro-volume)
Faible
50
1.5
Élevée
10,000
450
Aperçu des limites de quantification dépendantes de la longueur de trajet optique pour les échantillons d’acides nucléiques et de protéines.
Pourquoi choisir le spectrophotomètre d’excellence UV5Bio et UV5Nano ?
Spectrophotomètre d’excellence UV5Bio
Spectrophotomètre UV5Nano Excellence
Une technologie conçue autour de votre flux de travail
Embed Your UV Vis Spectrophotometer in a Laboratory Network
Réponses à vos questions fréquentes
Comment la spectroscopie UV/Vis est-elle utilisée dans les applications bio ?
La spectroscopie UV/Vis est l’une des techniques analytiques les plus utilisées dans les laboratoires des sciences de la vie, car elle fournit des résultats rapides, précis et non destructifs à partir de très petits volumes d’échantillon. Les principales applications comprennent :
Quantification des acides nucléiques : les concentrations d’ADN et d’ARN sont mesurées à 260 nm. La pureté de l’échantillon est évaluée à l’aide du rapport d’absorbance 260/280 nm — un rapport d’environ 1,8 indique un ADN pur, tandis que des valeurs plus faibles peuvent signaler une contamination par des protéines ou des solvants.
Analyse des protéines : la concentration en protéines est déterminée à 280 nm ou au moyen de tests colorimétriques (Bradford, BCA), ce qui facilite la préparation des échantillons et les workflows en aval.
Surveillance de la densité cellulaire (OD600) : la croissance bactérienne en culture est suivie en mesurant la densité optique à 600 nm, ce qui permet d’obtenir des conditions de culture reproductibles.
Mesures de micro-volume : avec seulement 1 µL d’échantillon, les spectrophotomètres modernes éliminent le besoin de dilution et préservent un matériel biologique précieux.
Contrôle qualité des échantillons : la spectroscopie UV/Vis aide à vérifier que les échantillons biologiques répondent aux critères de qualité avant leur utilisation en PCR, en séquençage ou dans d’autres applications aval sensibles.
Quelle est la différence entre le UV5Nano et le UV5Bio ?
Les deux instruments sont spécialement conçus pour les applications des sciences de la vie et partagent les mêmes méthodes préprogrammées pour les acides nucléiques, les protéines et la densité cellulaire. La principale différence réside dans le mode de mesure : le UV5Nano permet de déterminer la concentration et la pureté d’échantillons d’acides nucléiques et de protéines à partir de 1 µL grâce à une plateforme à micro-volume, tandis que le UV5Bio est un instrument dédié aux mesures standard en cuvette dans les sciences de la vie, avec une large gamme d’applications de mesure directe prédéfinies. Si votre laboratoire travaille régulièrement avec des échantillons précieux ou de faible volume, le UV5Nano est le choix le plus adapté.
Quel volume d’échantillon est nécessaire pour une mesure de microvolume ?
Le UV5Nano ne nécessite que 1 µL d’échantillon pour des mesures fiables. L’échantillon pur est déposé à la pipette sur la surface de mesure et le bras se verrouille automatiquement sur une longueur de trajet précisément définie — la précision de mesure est assurée et les erreurs sont évitées, car l’échantillon n’a pas besoin d’être dilué. Cela en fait l’appareil idéal pour les extraits biologiques précieux, pour lesquels la préservation de l’échantillon est essentielle.
Quelle plage de concentration puis-je mesurer sans diluer mon échantillon ?
Le UV5Nano mesure automatiquement à deux longueurs de trajet précisément définies, ce qui permet de couvrir une large plage de concentrations. Des échantillons d’ADN double brin (dsDNA) présentant des concentrations de 6 ng/µL à 15 000 ng/µL peuvent être mesurés sans dilution supplémentaire, en 2 secondes par longueur de trajet. Pour l’ARN et la BSA, la plage de mesure optimale est de 10 à 10 000 ng/mL pour le dsDNA et l’ARN, et de 0,5 à 400 mg/mL pour la BSA.
Le UV5Nano est-il adapté aux environnements biopharmaceutiques réglementés ?
Oui. Les options d’automatisation et la conformité à la norme 21 CFR Part 11 répondent aux besoins des laboratoires des sciences de la vie et de la biopharmacie. Le UV5Nano peut être utilisé avec le logiciel LabX™ UV/Vis, qui offre des pistes d’audit complètes, la gestion des utilisateurs et des signatures électroniques. Associé au module CertiRef™ pour la vérification automatisée des performances conforme aux pharmacopées, l’instrument s’intègre parfaitement dans les workflows GLP et GMP.
Que puis-je mesurer avec la spectroscopie UV/Vis dans les applications bio ?
Avec la spectroscopie UV/Vis, vous pouvez mesurer des paramètres clés d’échantillons tels que la concentration en acides nucléiques, la teneur en protéines, les rapports de pureté et la densité cellulaire. Ces mesures vous aident à évaluer la qualité de l’échantillon et à déterminer s’il est prêt pour une analyse plus approfondie. C’est une technique polyvalente pour de nombreux workflows biologiques courants dans les laboratoires de recherche et de biopharmacie.
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