Le comptage cellulaire est une procédure essentielle dans divers domaines de la recherche biologique et du bioprocessing, en soutenant la découverte de médicaments et la fabrication de thérapies cellulaires. Ses applications vont de l’évaluation de la viabilité cellulaire au suivi de cultures complexes, avec des implications importantes tant pour les résultats expérimentaux que pour la qualité de la fabrication.
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Le comptage et l’analyse des cellules contribuent à améliorer la fiabilité des données, à réduire les artefacts liés aux cellules mortes ou endommagées, et à garantir des résultats expérimentaux cohérents. Différentes méthodes de comptage cellulaire offrent des avantages variés, ce qui en fait des outils complémentaires pour la préparation des échantillons et le contrôle qualité avant les étapes de traitement en aval.
Manuel (hémocytomètre) | Imagerie assistée par colorant | Comptage par impulsions résistives | Cytométrie en flux | Microscopie holographique numérique |
Description | ||||
Les cellules sont comptées visuellement à l'aide d'un microscope et d'une chambre de comptage calibrée. | Les cellules sont colorées à l'aide de colorants colorés ou fluorescents, puis imagées et comptées à l'aide d'un logiciel. | Les cellules en suspension passent à travers une petite ouverture. Le système compte et mesure chaque cellule à partir des variations de la résistance électrique. | Les cellules passent individuellement à travers un faisceau laser. L'instrument analyse chaque cellule à l'aide de signaux de diffusion de la lumière et, lorsque des marqueurs fluorescents sont utilisés, de signaux de fluorescence. | La reconstruction holographique de l'échantillon fournit des données quantitatives sur le nombre, la taille et la viabilité des cellules. |
Objectif principal | ||||
Comptages cellulaires manuels de routine, avec contrôles optionnels de viabilité à base de colorant. | Comptages cellulaires précis et mesures objectives de viabilité. | Mesures automatisées de la concentration cellulaire et analyse basée sur la taille. | Analyse détaillée, multiparamètre des cellules individuelles et des populations. | Évaluation rapide de la concentration cellulaire et de la viabilité. |
Avantages | ||||
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Inconvénients | ||||
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Exemples d’utilisation | ||||
Comptages de routine avant l'ensemencement, les repiquages ou les expériences. | Vérifications de la concentration et de la viabilité avant les dosages, la transfection ou la cryoconservation. | Mesures de routine de la concentration et de la taille, y compris le suivi des cultures. | Identification et quantification des populations cellulaires à l'aide de biomarqueurs. | Vérifications rapides de la concentration et de la viabilité avant les tests en aval. |
Un comptage et une caractérisation précis des cellules sont essentiels pour obtenir des résultats fiables, mais plusieurs facteurs peuvent affecter la qualité des données et la reproductibilité.
La coloration avec des colorants ou des anticorps ajoute du temps, des coûts et de la variabilité, et peut modifier le comportement des cellules.
Les étapes de préparation et de lavage peuvent réduire le nombre de cellules, ce qui pose un problème particulier pour les populations rares ou fragiles.
Certaines méthodes nécessitent un investissement initial important et de l’espace sur la paillasse, ainsi que des coûts récurrents de consommables.
Certaines méthodes ne comptent que les cellules, tandis que d’autres révèlent aussi la fonction, l’expression des protéines ou la morphologie.
Un point de départ pratique pour faire correspondre votre besoin d’analyse à une méthode.
| Besoins analytiques | Approche adaptée | Exemple |
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| Contrôle de routine de la culture | CytoDirect | Vérifications de la concentration et de la viabilité avant le repiquage, l’ensemencement ou la récolte. |
| Analyse détaillée de la population | Cytofluorométrie en flux | Phénotypage immunitaire CD4/CD8, expression de marqueurs de surface ou détection de cellules rares. |
| Évaluation fonctionnelle de l’état cellulaire | Cytofluorométrie en flux | Analyse d’apoptose Annexine V/PI ou analyse du cycle cellulaire. |
| Flux de travail combiné | CytoDirect, puis cytofluorométrie en flux | Contrôles de routine fréquents, avec phénotypage plus approfondi à des moments choisis. |
La microscopie holographique numérique, ou DHM, capture un hologramme de chaque cellule au lieu d’une image directe. CytoDirect associe la DHM à l’apprentissage automatique pour mesurer la concentration et la viabilité cellulaire sans colorants ni agents de coloration. Cette approche préserve l’intégrité des échantillons et élimine les étapes de coloration manuelles requises par les méthodes traditionnelles de comptage cellulaire.
Le comptage cellulaire est essentiel pour évaluer la viabilité cellulaire, surveiller la santé des cultures cellulaires, quantifier les cellules souches, les cellules sanguines ou les cellules microbiennes, et garantir la cohérence dans la recherche, la bioproduction et les diagnostics cliniques.
Les compteurs de cellules METTLER TOLEDO associent une imagerie avancée et des algorithmes logiciels pour fournir des comptages rapides, précis et reproductibles sur différents types de cellules, réduisant ainsi les efforts manuels et améliorant la fiabilité des données.
Les notes d’application offrent des méthodes prêtes à l’emploi, testées par des experts, qui simplifient la configuration et l’utilisation, permettant aux utilisateurs d’obtenir rapidement des comptages cellulaires précis et des flux de travail rationalisés pour répondre à divers besoins de laboratoire.
CytoDirect est actuellement disponible uniquement dans certains pays. Contactez votre organisation commerciale METTLER TOLEDO locale ou votre distributeur officiel pour connaître la disponibilité dans votre pays.
