Rainin Good Pipetting Practice fra METTLER TOLEDO er en praktisk, vitenskapsbasert tilnærming for å hjelpe forskere med å forbedre og forbedre nøyaktigheten og effektiviteten til eksperimentene sine. Fra arbeidsflytevaluering og instrumentvalg til teknikk, ergonomi og instrumentkvalifisering, hjelper GPP laboratorier med å forbedre eksperimentell reproduserbarhet med opplæring i væskehåndtering og tekniske ressurser og støtteressurser.
GPP dekker mange pipetteringsteknikker som er relevante for biovitenskapelige forskere eller alle som bruker pipetter regelmessig:
Vårt system med opplæring og ressurser hjelper benkforskere med å forstå nyansene i væskehåndtering og verktøyene, teknikkene og alternativene som vil spare tid, redusere avfall og oppnå mer reproduserbare resultater.
Vi holder opplæring i kort og langt format i laboratoriet ditt med hele teamet ditt og kan til og med måle hver brukers pipetteringsferdigheter før og etter trening.
«Foredraget om det sikre pipetteringsområdet ga oss ny innsikt som vi ikke var kjent med før, og vi ønsker nå å innlemme disse i våre daglige oppgaver.»
– Til å begynne med var deltakerne skeptiske til om det var nødvendig med en praktisk del. Likevel, i ettertid, kan spesifikke mangler i pipettering avdekkes som ikke var kjent før, noe som gjør tilbakemeldingene desto mer positive.»
«GPP-seminaret hjelper oss med å lære opp våre ansatte og holde dem oppdatert med den nyeste pipetteringsteknologien.»
«Deltakeren ønsket å finne ut hvordan de kunne opprettholde konsistente resultater på tvers av sluttbrukergruppen ved å pipettere en løsning med suspenderte celler. Det var avgjørende å holde cellene grundig blandet i løsningen før de ble overført. Etter mye diskusjon var vi alle enige om at det var best å bruke spisser med lav retensjon for å redusere prøveretensjon og blande løsningen noen ganger før vi tok den fungerende alikvoten fra røret til platen."
«De nye ansatte som kom inn i selskapet hadde blitt undervist på forskjellige nivåer i akademialaboratoriet, så de hadde alle forskjellige nivåer av pipetteringserfaring. Dette seminaret var nyttig.»
Gratulerer med å ha fullført et av våre GPP-seminarer. Det går raskt å bestille fullføringsbevis. Bare klikk på denne lenken og skriv inn seminarkoden din.
Når du bestiller ditt gratis fullføringsbevis, planter vi et tre gjennom våre partnere på One Tree Planted.
.png/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.png "god pipetteringspraksis fra Rainin")
Tøying gjennom dagen bidrar til å forhindre tretthet og smerte som kan påvirke eksperimentelle resultater. Skaff deg plakaten og forbedre pipetteringsergonomien i laboratoriet ditt. Les mer
Vår Bench Posture-plakat dekker alle emner om riktig holdning for å forhindre kroniske muskel- og skjelettlidelser for de som jobber i laboratoriet. Les mer
Specific techniques on how to decontaminate pipettes, with distinct cleansers for different sample types. Les mer
Trygg pipettering av tyktflytende, høyt damptrykk, skumming og andre typer utfordrende væsker som inkluderer instruksjoner for omvendt pipettering. Les mer
Hvordan du pipetterer, påvirker direkte suksessen og repeterbarheten til eksperimentene dine. Bruk disse gode pipetteringstipsene for å forbedre pipetteringsnøyaktigheten. Les mer
Denne plakaten illustrerer raske håndstrekk for å øke fingerbevegelsesområdet og styrke pipettertommelen. Les mer
Quick Check-plakaten forklarer i ti enkle trinn hvordan alle i laboratoriet kan sjekke ytelsen til pipettene sine. Les mer
Med god pipetteringspraksis tilbyr METTLER TOLEDO et bredt spekter av opplæring og ressurser for å hjelpe benkforskere, laboratorieledere og kvalitets- og sikkerhetseksperter med å oppnå mer pålitelige og repeterbare eksperimentelle resultater samtidig som organisasjonens totale risiko reduseres.
Evaluering og utvelgelse
Minimer risikoen og forbedre robustheten til pipetteringsarbeidsflytene dine ved å bruke vår risikobaserte tilnærming til å evaluere protokoller og velge riktige instrumenter og forbruksvarer.
Teknikk trening
Hjelp team med å forbedre ferdighetene sine og reproduserbarheten til eksperimentene ved å fokusere på hvordan brukere påvirker pipetteringsnøyaktighet og eksperimentelle resultater.
Ergonomi
God benkergonomi forbedrer teamets helse og velvære samtidig som den forbedrer eksperimentell reproduserbarhet og reduserer potensialet for repeterende belastningsskader.
Kalibrering og rutinemessig drift
Kvalitetssikringsbehovene varierer sterkt mellom laboratorier og organisasjoner. GPP kan hjelpe deg med å finne den rette balansen mellom kvalitet, sikkerhet, samsvar og kostnad.
Dette whitepaperet diskuterer hvordan en vellykket væskehåndteringsstrategi er en kritisk suksessfaktor for små og nystartede biovitenskapsselskaper som prøver å nå time-to-market-mål. Les mer
Vår Rainin-veiledning til pipettering vil hjelpe deg med å oppnå nøyaktige, reproduserbare resultater gjennom informerte valg av pipette og spiss og riktig teknikk. Les mer
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "Hvitbok om pipetteringsergonomi")
Høyere pipetteringskrefter og lange timer med pipettering er assosiert med utvikling av repeterende belastningsskader (RSI). Følgende anbefalinger funnet i denne hvitboken om pipetteringsergonomi vil hjelpe forskere med å minimere sjansen for å utvikle disse tilstandene. Les mer
Improve pipetting accuracy by understanding basic concepts behind pipetting errors and uncertainty. Learn how pipetting accuracy can improve pipetting results. Les mer
Dette white paperet gir en oversikt over vanlige pipettetyper, og gir verdifulle tips om hvordan du får mest mulig ut av pipetteringen avhengig av arbeidsflyten. Les mer
Pipettekalibrering og -teknikker er avgjørende for å holde pipettene godt vedlikeholdt og maksimere ytelsen i laboratoriet. Les mer
Denne artikkelen er skrevet for alle som har en rolle i å skape et trygt laboratorium – ansatte, ledere og andre strategiske partnere. Les mer
.jpg/_jcr_content/renditions/cq5dam.web.1280.1280.jpeg "God pipetteringspraksis")
White-paperet Væskehåndtering for cellekultivering forklarer de ulike celletypene som kan kultiveres, og hvilke forskningsområder og verktøy som er mest hensiktsmessige for hver type. Les mer
De fleste forskere rapporterer at de ikke har klart å reprodusere eksperimenter. Last ned vårt nye white paper for å finne ut hva som driver det og tips for å sikre at det ikke skyldes unøyaktig væskehåndtering. Les mer
Nøyaktig pipettering krever å mestre noen få grunnleggende teknikker. Disse inkluderer:
De fleste biovitenskapelige applikasjoner inkluderer kritiske væskehåndteringstrinn der pipettert volum direkte påvirker resultatet. Hvis pipetteringen ikke er konsistent og nøyaktig, kan tid, penger og materiale gå til spille. Nøyaktig pipettering danner grunnlaget for reproduserbart arbeid, noe som er avgjørende for å generere meningsfulle data.
Det første trinnet mot å forbedre pipetteringsnøyaktigheten er å velge riktig type pipette og riktig volumområde. For størrelse, velg pipetten med lavest volum som passer til volumet du pipetterer. Hvis du for eksempel pipetterer 2 μL og har en 5 μL-pipette og en 20 μL-pipette, får du bedre nøyaktighet ved å bruke 5 μL.
Ta en titt på dette white paperet om valg av pipette for å forstå hvilken pipette som fungerer best for væsken og andre faktorer som er unike for din situasjon: Velge riktig pipette
Når du har det riktige instrumentet, bruk din gode pipetteringsteknikk i praksis. Sett opp en rutinemessig testplan for å maksimere tilliten til resultatene dine over tid, og som med alle presisjonsinstrumenter, sørg for å innføre et regelmessig, ekspert service- og kalibreringsregime.
Den enkleste måten å raskt teste en pipettes nøyaktighet på kan være Rainin SmartCheck. Finn ut mer på mt.com/SmartCheck
Å velge riktig pipette innebærer å evaluere dine behov. For det første, hva slags prøver pipetterer du? Er de vandige? Eller er de tyktflytende, flyktige, skummende, etsende eller farlige? For vandige og nesten vandige væsker er de vanligste luftforskyvningspipettene (også kalt "luftpute"-pipetter) et godt valg. For tyktflytende, flyktige og andre uvanlige væsketyper vil en pipette med positiv forskyvning være et bedre valg for både nøyaktighet og sikkerhet.
Hvilket volum vil du pipettere? Hvor mange prøver trenger du for å overføre fra ett fartøy til et annet? Ta en titt på dette white paperet om valg av pipetter for å forstå hvilken pipette som fungerer best, avhengig av væsken og andre faktorer som er unike for din situasjon.
Pipettering av minst mulig volum involverer spesialiserte instrumenter og teknikker. En repeterende pipette kan være det beste valget for å repetere volumer ned til 100 nL. En annen pipette kan også fungere for bare noen få dispenseringer. Sørg for å bruke den minste pipetten som passer til volumet du ønsker å pipette.
Ved svært lave volumer har pipetteringsteknikk en proporsjonalt større innvirkning på nøyaktighet og reproduserbarhet. Nedsenkingsdybde, pipetteringsvinkel og aspirasjonshastighet er viktig å kontrollere. Pipetting Techniques-plakaten fra Rainin kan hjelpe.
Rainin NanoRep gjentar og dispenserer alikvoter ned til 100 nL. Finn ut mer her: mt.com/NanoRep
Den viktigste faktoren for nøyaktig, reproduserbar flerkanalspipettering er integriteten til tetningen for hver kanal i pipetten. Det betyr at hver spiss passer perfekt på hvert skaft uten luftlekkasje. Ulike produsenter oppnår dette på forskjellige måter, med varierende ergonomisk letthet og tetningskonsistensnivåer. LTS LiteTouch System-pipettespisser fra Rainin krever minst mulig kraft for å laste og løse ut fra flere kanaler, og de forsegler konsekvent hver gang.
Klikk her for å se Rainins brede utvalg av flerkanalspipetter.
Når du aspirerer, hold en pipette så nær vertikal som mulig, og unngå enhver vinkel større enn 20° fra Y-aksen. Når du dispenserer, hvis du berører veggen til målbeholderen for å trekke all væske helt ut av spissen, er det OK å overskride 20°-vinkelen.
Fremoverpipettering er standard pipetteringsteknikk og det beste valget for vandige prøver. For viskøse og flyktige prøver gir omvendt pipettering bedre nøyaktighet.
For å sende pipetten fremover, skyv stempelet ned til første stopp mens du holder pipetten utenfor væsken. Senk deretter spissen 2-10 mm dypt ned i væsken du jobber med – ikke dypere. Slipp stempelet sakte til full forlengelse for å aspirere hele væskevolumet. For å dispensere inn i målbeholderen, flytt pipetten inn i beholderen, og trykk deretter stempelet med jevn hastighet gjennom det første stoppet helt til det andre stoppet – så langt stempelet går. Med stempelet helt trykket, dra spissen av pipetten lett oppover veggen på karet for å "berøre". Dette hjelper til med å dispensere hele væskevolumet fullstendig. Slipp stempelet, løs ut pipettespissen, sett inn en ny pipettespiss og gjenta.
For å reversere pipetten skyver du stempelet helt ned gjennom det første stoppet til det andre stoppet – så langt stempelet går. Senk deretter spissen i væske og slipp stempelet sakte og jevnt for å aspirere. Beveg deg til mottakerbeholderen og trykk stempelet KUN TIL FØRSTE STOPP for å dispensere riktig volum. Et lite restvolum vil forbli i pipettespissen. Flytt pipetten over et kasseringsbeholder og trykk stempelet helt ned til det andre stoppet, også kalt "utblåsningsstoppet", for å frigjøre eventuell gjenværende væske.
Slipp stempelet, løs ut pipettespissen, sett inn en ny pipettespiss og gjenta.
En luftfortrengningspipette kan brukes til å pipettere lett tyktflytende væsker, inkludert blod. For å oppnå maksimal nøyaktighet, bruk omvendt pipetteringsteknikk beskrevet ovenfor. For mer tyktflytende væsker, for eksempel 85 % glyserol eller Triton X-100, gir en pipette med positiv forskyvning den beste nøyaktigheten og konsistensen.
Lett flyktige væsker som etanol kan pipetteres med en luftforskyvningspipette ved hjelp av den ovennevnte omvendte pipetteringsteknikken. Pipetter med positiv forskyvning er imidlertid et bedre valg for flyktige væsker.
Hvis du bruker en luftforskyvningspipette, må du forhåndsskylle pipettespissen (aspirere og dispensere) minst fem ganger før du pipetterer volumet. Dette balanserer luften inne i pipetten, og bremser væskens fordampningshastighet. Rask fordampning av flyktige væsker utvider luften inne i en pipette og tvinger væske ut av spissen uten at det legges noe trykk på stempelet, og dette reduserer nøyaktig volumtilførsel.
Flyktige væsker som acetonitril håndteres generelt bedre med en pipette med positiv forskyvning.
Ja, pipettering med luftforskyvningspipetter kan skape aerosoler. Aerosoler kan stige inn i det indre av pipetten og forurense innvendige vegger og stempel. Aerosolisering skjer lettere når stempelet frigjøres for raskt under aspirasjon og kan også forekomme i motsatt retning utenfor pipetten med altfor rask dispensering.
For å minimere aerosoler, aspirer og dispenser sakte og jevnt. Bruk filtrerte spisser.
Pipetter med positiv forskyvning bruker sprøytespisser som forhindrer aerosolisering. En pipette med positiv forskyvning er det beste valget for pipettering av farlige væsker og enhver væske med forhøyet viskositet eller flyktighet.
Svært kalde eller varme væsker endrer lufttrykket i luftforskyvningspipetter, noe som fører til unøyaktig pipettering.
Pipetter med positiv forskyvning, med sprøytespisser som ikke har luftlomme mellom væske og stempel, påvirkes ikke av forskjellige temperaturer på væsker. Pipetter med positiv forskyvning vil gi nøyaktige resultater med væsker uten romtemperatur.
Hvis du må pipettere en veldig varm eller kald væske med en luftforskyvningspipette, må du ikke forhåndsskylle pipettespissen – dette er vanligvis den beste fremgangsmåten for høyest mulig nøyaktighet. Aspirer og dispenser i stedet raskt for å minimere effekten av væskens temperatur på pipettens indre luftspalte.
For å unngå bobler og skumdannelse ved pipettering, må du ikke senke spissen mer enn 10 mm i væskebeholderen, og aspirere sakte.
Omvendt pipettering gir ekstra beskyttelse fordi du trykker stempelet helt til 2. For mer om omvendt pipettering, besøk denne siden.
En pipette med positiv forskyvning skaper ikke bobler eller skum når den samhandler med væske fordi sprøytespissen ikke har luft som væsken kan samhandle med.
Dekontaminerer en pipette ved å tørke av den med en våt klut og et vaskemiddel som isopropanol eller en 10 % blekemiddelløsning. Unngå mikrometerets klare plastvindu.
Autoklavering kan være et annet alternativ, men sjekk pipettens instrumentspesifikasjoner. Hvis det er autoklaverbart, er hele instrumentet autoklavert eller bare væskeenden? Ofte kan bare væskeenden autoklaveres.
Hvis du vil ha mer informasjon om rengjøring av en pipette, kan du laste ned plakaten Rengjøring av en pipette .
Kalibrering er kontrollert og dokumentert måling av en pipettes systematiske feilrate (nøyaktighet) og tilfeldige feilrate (presisjon). I mange laboratoriemiljøer må pipetteytelsen testes regelmessig og dokumenteres ved lov under spesifikke forhold sertifisert av et akkreditert organ.
ISO-sertifiserte leverandører kalibrerer pipetter i en kontrollert setting. Resultatene dokumenteres sikkert på et kalibreringssertifikat, og legger til en revisjonsklar ytelseshistorikk for hvert instrument. Når justeringer er nødvendige, tilbyr ISO-sertifiserte kalibreringslaboratorier ekspertservice med deler og smøremidler som er anbefalt av produsenten.
Rainin og METTLER TOLEDO er verdens største pipetteserviceorganisasjon med rask behandling fra postinnsending og servicealternativer på stedet. Servicelaboratorier er ISO 17025-sertifiserte, og prosedyrer følger 2022-oppdateringen til ISO 8655.
Pipettenøyaktighet – eller sannhet, som det heter nå – er forskjellen mellom gjennomsnittsvolumet for alle målinger (4–10 målinger) og det innstilte volumet.
Presisjon er standardavviket for alle målinger som utføres. Hvor langt fra hverandre er de andre?
En pipettes usikkerhet er den kvantitative betegnelsen for dens generelle nøyaktighet. Det er en kombinasjon av sannhet (et mål på systematisk feil) og presisjon (et mål på tilfeldig feil).
Ligningen for usikkerhet er:
Usikkerhet = Systematisk feil + Tilfeldig feil * k. k (dekningsfaktor eller Z-score) avhenger av antall målinger. k=3,31 for fire målinger og 2 for ti målinger.
Oppbevar pipetter vertikalt, hengende fra en hylle eller pipettestativ. Hold pipettene rene og fri for forurensninger. Hold pipettespissstativene lukket.