Руководство «Основы дозирования» — - METTLER TOLEDO
Руководство

Руководство «Основы дозирования» —

Руководство

советы и рекомендации по работе с пипетками

Maecenas faucibus mollis interdum. Donec id elit non mi porta gravida at eget metus. Nullam id dolor id nibh ultricies vehicula ut id elit.
Maecenas faucibus mollis interdum. Donec id elit non mi porta gravida at eget metus. Nullam id dolor id nibh ultricies vehicula ut id elit.

Работа с пипетками составляет основу медико-биологических исследований. Для получения воспроизводимых результатов ученым необходимы точные пипетки и качественные наконечники.

С помощью справочника «Основы дозирования» для медико-биологических лабораторий вы научитесь оценивать и выбирать пипетки и наконечники, повышать производительность дозирования и получать наилучшие результаты. 

Справочник «Основы дозирования» для медико-биологических лабораторий содержит подробные сведения по следующим вопросам:

  • Оценка и выбор пипеток
  • Подбор наконечников
  • Методики дозирования

Скачайте справочник и станьте специалистом по дозированию!

Краткое содержание справочника «Основы дозирования»

1. Предисловие

Надлежащая практика работы с пипетками призвана помочь исследователям в достижении наилучших результатов благодаря продуманному выбору оборудования, правильным и эргономичным методам работы с пипетками, процедурам калибровки и подходящим режимам повседневной работы. Дозирование с помощью пипетки (отбор и перенос небольших объемов жидкости в диапазоне от микролитров до миллилитров) — вероятно, самая распространенная операция в любой лаборатории. Способность выполнять ее быстро и точно — необходимая предпосылка успешной работы. Благодаря своим многочисленным преимуществам современные пипетки воздушного вытеснения используются для выполнения большей части задач в лаборатории — они идеально подходят для эффективного дозирования жидкостей в малых объемах. Новейшие высококачественные пипетки и наконечники позволят достичь высокой производительности при экономии трудозатрат.

2. Планирование рабочего процесса и подбор оборудования

Планирование рабочего процесса

Новый проект имеет смысл начинать с подробного планирования, где каждый этап работы анализируется с точки зрения максимальной эффективности и возможности получить данные. При работе с жидкостями необходимо понимать особенности пробы и анализа, а также то, какой должна быть производительность.Это позволит определиться с методами отбора и объемами проб (планшеты, пробирки и т. д.). От них, в свою очередь, будут зависеть оптимальные средства для отбора рабочих жидкостей. При дозировании пипетку, наконечник и методику работы исследователя следует рассматривать как единую систему, чтобы обеспечить выдачу точного объема требуемой жидкости. Выбор правильной пипетки с наконечником, которые будут использоваться по наиболее эффективной методике, — это обязательная часть планирования и реализации любого проекта или эксперимента.

Анализ рабочего процесса

Первый шаг заключается в определении всех этапов, составляющих рабочий процесс эксперимента, — от первоначального выделения образца до получения конечных данных. Сюда войдут и подготовительные этапы, например, приготовление буферного раствора или концентрированной реакционной смеси. Далее следует определить допустимую вариабельность для эксперимента, которая позволяет получать качественные данные. Некоторые области применения и этапы более чувствительны к экспериментальной нестабильности, чем другие. Например, любой подразумевающий амплификацию эксперимент, такой как количественная ПЦР, может сильно зависеть от алгоритма выполнения, тогда как для этапа приготовления буферного раствора это не так критично. Основным источником вариабельности могут быть неподходящие пипетка и наконечник, а также плохая методика дозирования. Например, погрешности при дозировании могут повлиять на любые эксперименты, зависящие от стандартной кривой, формируемой последовательным разбавлением стандартных образцов.

Оптимизация рабочего процесса

  • Требования к объему пробы и производительности при анализе образцов
  • Требования к контейнерам для образцов и реагентов
  • Специальные требованию к образцу и анализу

3. Выбор пипетки

Существует множество инструментов для дозирования, которые позволяют достичь оптимальных результатов и повысить производительность, обеспечивая при этом дополнительные преимущества, такие как эргономичность и улучшенная функциональность для данной области применения. Микропипетки бывают двух основных типов: воздушного вытеснения и позитивного вытеснения. В обоих типах объем дозируемой жидкости определяется диаметром и длиной хода поршня.

Пипетки воздушного вытеснения

  • Очень точны при работе с водными растворами.
  • Экономичное решение.

Пипетки с воздушным вытеснением — это самые распространенные инструменты для дозирования в лаборатории. Эти пипетки применяют следующим образом: кончик наконечника опускают в жидкость, затем отпускают кнопку поршня. Когда поршень пипетки движется вверх, создается частичный вакуум, и жидкий образец перемещается в верхнюю часть наконечника, заполняя пустое пространство выбранного объема, образовавшееся под действием частичного вакуума.

Пипетки позитивного вытеснения

  • Очень точны при работе с большинством растворов.
  • Рекомендуются для вязких, плотных, летучих или агрессивных жидкостей.

Хотя пипетки позитивного вытеснения не столь распространены, как пипетки с воздушным вытеснением, их можно часто встретить в лабораторной обстановке. Для создания пустого пространства выбранного объема в этих пипетках используется система, состоящая из одноразового поршня и капилляра. Когда поршень, непосредственно соприкасающийся с образцом, начинает подниматься, образец всасывается в капилляр. Пипетки позитивного вытеснения обеспечивают высокую точность и прецизионность при дозировании водных растворов, но рекомендуются для использования с вязкими, плотными, летучими и агрессивными растворами. Одноразовые капилляры и поршни, применяемые в пипетках позитивного вытеснения, обходятся дороже по сравнению с одноразовыми наконечниками для пипеток воздушного вытеснения, поэтому рекомендуется использовать пипетки воздушного вытеснения, если они дадут те же самые результаты.

Оптимизация рабочего процесса

  • Требования к объему пробы и производительности при анализе образцов
  • Электронные одноканальные пипетки
  • Многоканальные пипетки
  • Системы высокопроизводительного дозирования
  • Специальные пипетки
  • Пипетки позитивного вытеснения
  • Шприцевые дозаторы (репитеры)
  • Пипеточные дозаторы
  • Бутылочные дозаторы

4. Выбор наконечника: конструкция, качество и посадка

Пипетку и рекомендуемый изготовителем наконечник лучше рассматривать как систему, а не как два отдельных компонента. В наконечниках, которые рекламируются для использования со всеми типами пипеток, ради универсальности часто жертвуют качеством посадки или конструкции. При выборе наконечников для пипеток следует рассматривать такие характеристики, как конструкция, качество и посадка.

Конструкция наконечника

Наиболее современная конструкция — это гибкий тонкостенный наконечник с тонким кончиком или небольшим отверстием на конце. При дозировании малых объемов (менее 20 мкл) наконечники Rainin Fine- Point™ повышают точность и прецизионность по сравнению со стандартными наконечниками для пипеток с толстыми стенками или скошенными кончиками. Наконечники FinePoint более гибкие, чем большинство других стандартных наконечников, и позволяют жидкому образцу стекать при наклоне наконечника под любым углом, обеспечивая полный перенос пробы. В таком наконечнике остается значительно меньше образца, чем в наконечниках с более толстыми стенками и скошенными кончиками. Различия в конструкции наконечника влияют на производительность, точность и прецизионность. Если используются наконечники, рекомендованные изготовителем, пипетки при правильном обращении будут гарантированно работать с указанной точностью и прецизионностью.

Качество наконечника

Самыми опасными следует считать дефекты на кончике наконечника: именно они сильнее всего влияют на отбор и дозирование образца. На илл. 13 в увеличенном виде показаны кончики наконечников четырех типов.

Заусенец — это остатки пластмассы, образовавшиеся внутри наконечника или вокруг отверстия в процессе отливки.

Дефекты отливки и нарушения соосности возникают в результате неправильного срабатывания пальца подачи литейного стержня после впрыскивания пластмассы. Все эти дефекты приводят к потерям образца во время дозирования. Производственный процесс высокого качества позволяет свести к минимуму возникновение дефектов наконечника и ошибок при дозировании.

Уплотнение между пипеткой и наконечником

  • Система сброса наконечников LTS™ LiteTouch™
  • Выбор наконечника
  • Специальные наконечники для особых областей применения

5. Методы работы с пипеткой

Результаты исследования зависят от правильной оценки области применения и подбора подходящих инструментов. Но это далеко не все, что необходимо учитывать при работе с пипетками. На результаты влияют и другие факторы, такие как правильная методика дозирования и внешние условия. В научных исследованиях велика роль точности и прецизионности, и на следующих страницах будет дан краткий обзор различных аспектов, важных при работе с пипетками. Знаете ли вы, например, что одно лишь выполнение этих рекомендаций может повысить точность и прецизионность почти на 5 %?

Оптимальный диапазон объемов

Нормальный рабочий диапазон для большинства пипеток составляет 10–100 % от номинального объема. Хотя этот диапазон принято считать рабочим, эксплуатационные характеристики пипетки будут меняться при уменьшении объема. Нормы точности для пипетки объемом 100 мкл составляют ± 0,8 % от номинала 50–100 %. Но если бы объем был установлен на 10 мкл (или 10 % от номинала), погрешность увеличилась бы в три раза или до 2,5–3 %. Поэтому оптимальный объем для наибольшей точности и прецизионности обычно составляет 35–100 % от номинала. Старайтесь не устанавливать на пипетке объем меньше 10 % от ее максимального объема — вместо этого перейдите на пипетки меньшего размера, предназначенные для меньших объемов.

Глубина погружения наконечника

Правильная глубина погружения может повысить точность на 5 % и имеет особое значение при работе с микродозаторами. Наконечник следует погружать в образец на глубину 1–2 мм для пипеток, предназначенных для микрообъемов, и на 6–10 мм для пипеток, рассчитанных на большие объемы. Если погрузить наконечник слишком глубоко, содержащийся в нем воздух будет сжиматься, что приведет к всасыванию излишка жидкости. Жидкость, задержавшаяся на поверхности наконечника, также может нарушить точность результатов. Если же погрузить наконечник недостаточно глубоко, это может привести к затягиванию внутрь воздуха, что вызовет образование пузырей и также повлияет на точность результатов. И то, и другое снижает точность дозирования.

  • Отбор образца под правильным углом
  • Улучшение воспроизводимости
  • Единообразное дозирование образца
  • Предварительная промывка наконечников
  • Как избежать колебаний температуры
  • Последовательное изменение настроек объема
Другие материалы
Также может быть интересно:
Другие информационные документы
Thank you for visiting www.mt.com. We have tried to optimize your experience while on the site, but we noticed that you are using an older version of a web browser. We would like to let you know that some features on the site may not be available or may not work as nicely as they would on a newer browser version. If you would like to take full advantage of the site, please update your web browser to help improve your experience while browsing www.mt.com.