Provjera i umjeravanje pipeta

Pipeta je laboratorijski alat za prijenos malih količina precizno izmjerenih tekućina aspiracijom i dispenziranjem uzorka. Danas se uglavnom upotrebljavaju klipne pipete koje stvaraju djelomični vakuum iznad tekućine radi njezine aspiracije, čime se izbjegava dodirivanje mehanizma.

Više: Rainin pipete

Pipeta je umjerena ako je ovlaštena institucija odredila očekivani volumen i stvarni volumen koji se isporučuje pipetom zajedno s povezanom mjernom nesigurnošću. Svrha je toga postupka dokazati da pipeta ispunjava specifikacije proizvođača ili norme ISO8655 radi davanja točnih rezultata. Pipete izvan granica tolerancije često se mogu servisirati, podesiti i ponovno umjeriti.
Više: Rainin servis za pipete

Klipne pipete obično se upotrebljavaju u kemiji, biologiji, kliničkim i medicinskim područjima, tamo gdje se uzimaju tekući uzorci koji se moraju transportirati u malim i točnim količinama radi daljnjeg razrjeđivanja, istraživanja i analize.

U nastavku navodimo neke uobičajene tehnike pipetiranja i pogreške pri upotrebi klipnih pipeta te upute za izbjegavanje tih pogrešaka.

1. Pogrešna dubina uranjanja nastavka
   Ispravna dubina uranjanja nastavka može povećati točnost do 5%. Nastavak treba uroniti od 1 do 2 mm za pipete za mikrovolumene te od 3 do 6 mm za pipete za uobičajene volumene, ovisno o veličini nastavka. Ako je nastavak previše uronjen, volumen plina u nastavku se komprimira, zbog čega se aspirira previše tekućine.
   
   
2. Pogrešan kut pipetiranja
   Kut uranjanja nastavka pipete u uzorak trebao bi biti što bliže okomici i ne bi trebao od nje odstupati za više od 20°. Vodoravniji kut uzrokuje usisavanje previše tekućine u nastavak, što znači da će aspiracija biti netočna. Na primjer, pod kutom od 30 stupnjeva na okomicu, moguća je aspiracija do 0,7% previše tekućine.
   
   
3. Nedosljedno dispenziranje
   Veću točnost i ponovljivost od uzorka do uzorka možete postići ako osigurate da je i posljednja kap uzorka potpuno dispenzirana i da ne prianja za vrh nastavka. U većini primjena preporučuje se dispenziranje s vrhom nastavka oslonjenim o stijenku posude jer se time smanjuje ili potpuno uklanja zaostajanje određene količine uzorka u nastavku. Tom tehnikom točnost se može povećati za 1% ili više.
   
   
4. Izostanak prethodnog ispiranja
   Pri dispenziranju tekućine iz pipete na nastavku ostaje sloj tekućine, što znači da je istisnuti volumen malo manji nego što bi trebao biti. Prethodnim ispiranjem novog nastavka (barem dvaput) tekućinom koja će se upotrijebiti u postupku pripremit će se unutrašnjost nastavka.
   
   
5. Nedosljedan ritam pipetiranja
   Neka vaš ritam pipetiranja bude dosljedan od uzorka do uzorka. Izbjegavajte žurbu ili ubrzani rad i uspostavite ritam za svaki korak u ciklusu pipetiranja.
   
   Više: Dobra praksa pipetiranja

Točnost pipete treba redovito provjeravati između umjeravanja kako bi se u tim razdobljima izbjegli rezultati izvan granica tolerancije. Za provjeru pipete potrebno je dispenzirati najmanje nazivni volumen u laboratorijsku čašu na točnoj analitičkoj vagi najmanje 4 do 6 puta, a zatim se prosječan volumen i odstupanje mogu izračunati upotrebom formula iz norme ISO8655. Vage s ugrađenom aplikacijom ili računalnim softverom automatski pružaju prolazan ili neprolazan rezultat za nekoliko sekundi.

Više: Provjera pipeta

Točnost pipete treba redovito provjeravati između umjeravanja kako bi se u tim razdobljima izbjegli rezultati izvan granica tolerancije. Za provjeru pipete potrebno je dispenzirati najmanje nazivni volumen u laboratorijsku čašu na točnoj analitičkoj vagi najmanje 4 do 6 puta, a zatim se prosječan volumen i odstupanje mogu izračunati upotrebom formula iz norme ISO8655. Vage s ugrađenom aplikacijom ili računalnim softverom automatski pružaju prolazan ili neprolazan rezultat za nekoliko sekundi.  

Umjeravanje pipete pokazuje razliku između očekivanog i stvarnog volumena, koja mora biti unutar zadane tolerancije. Ako je izvan granica tolerancije, moguće je pogrešno razrjeđivanje pa čak i pogrešni rezultati analize. Zbog toga se rezultati ne mogu reproducirati i možda će se cijela analiza morati ponovno obaviti. Da biste dovoljno rano otkrili pipetu koja je izvan granica tolerancije, preporučujemo da točnost pipeta provjeravate između umjeravanja kako biste izbjegli da se preveliko odstupanje otkrije tek pri sljedećem umjeravanju.

Umjeravanjem pipete ovlašteno tijelo određuje očekivani volumen i stvarni volumen koji se isporučuje pipetom zajedno s povezanom mjernom nesigurnošću. Svrha je toga postupka dokazati da pipeta ispunjava specifikacije proizvođača ili norme ISO8655 radi davanja točnih rezultata. Pipete izvan granica tolerancije često se mogu servisirati, podesiti i ponovno umjeriti.

Prije nego što počnete čistiti uvijek proučite priručnik proizvođača jer se otpornost materijala razlikuje ovisno o robnoj marki. Da bi se dobro očistile, klipne pipete najprije se moraju rastaviti. Mehanizam za ispuštanje nastavka i cilindar često se mogu jednostavno rukom odviti kako bi se pipeta otvorila. Pripazite: pritisak opruge može prouzročiti da dijelovi odskoče. Dijelovi se obično mogu očistiti krpom lagano namočenom blagim sapunom s destiliranom vodom ili upotrebom izopropilnog alkohola ili otopine etanola. Izbjegnite prodor tekućine u držak, kako i tijekom pipetiranja, kako biste izbjegli onečišćenje klipa i brtve. Za sterilizaciju ili autoklaviranje u priručniku provjerite mogu li se i kako provesti na željenom modelu pipete. Nakon čišćenja treba provjeriti je li pipeta unutar granica tolerancije. Servisni tehničar za pipete nakon servisiranja obično obavlja umjeravanje kako bi provjerio i potvrdio da je pipeta unutar granica tolerancije.