Les cuves destinées aux mesures spectrophotométriques sont de petits récipients rectangulaires transparents, disponibles dans plusieurs matières, niveaux de qualité et dimensions. Les cuves en verre sont utilisées pour les mesures dans la plage de lumière visible de 320 à 2 500 nm. Les cuves en quartz offrent des résultats précis sur toute la plage UV et visible de 200 à 2 500 nm. Plus la tolérance de fabrication est réduite, plus les mesures sont précises et répétables.
Les cuves Standard et Excellence sont disponibles en longueurs de trajet optique (OPL) de 10 et 50 millimètres, et en deux types de verre : verre optique (O) pour les mesures VIS et verre de quartz (Q) pour des mesures UV améliorées. Des microcuves spéciales et des cellules à circulation complètent la gamme afin de répondre aux différents besoins en automatisation et applications.
Les cuves Excellence garantissent un parallélisme exceptionnel des fenêtres et offrent des tolérances de longueur de trajet optique extrêmement faibles, de seulement ± 0,01 mm. Elles fournissent ainsi la précision requise pour les applications pharmaceutiques et de recherche.
Les cuves Standard et Excellence sont conçues pour une utilisation à long terme. Elles constituent donc un choix respectueux de l'environnement, qui peut également vous faire économiser de l'argent puisqu'elles vous évitent d'acheter continuellement des cuves en plastique jetables.
Nous vous proposons un support technique complet tout au long du cycle de vie de vos instruments de mesure, qu'il s'agisse d'opérations d'installation, de maintenance préventive, d'étalonnage ou de dépannage.
La cuve utilisée pour mesurer un échantillon fait partie intégrante du système optique du spectrophotomètre. Par conséquent, la position, la géométrie et l'état de la cuve peuvent influencer l'exactitude et la fidélité des mesures d'absorbance et ils doivent être contrôlés avec soin.
La longueur du trajet optique d'une cuve est la distance que parcourt la lumière pour traverser les parois intérieures de la cuve.
Sur une cuve de spectromètre standard, la longueur du trajet optique équivaut à la distance entre la fenêtre avant et la fenêtre arrière. La longueur du trajet optique d'une cuve standard est de 10 mm.
Selon la matière choisie, la cuve peut absorber des rayonnements sur une longueur d'onde donnée. Les cuves en quartz sont complètement translucides sur toute la plage de mesures (UV/VIS). La plupart du temps, les cuves en plastique jetables sont translucides uniquement dans la région visible du spectre. Par conséquent, le choix de la cuve dépend principalement de l'application.
Selon la loi de Beer-Lambert, l'absorbance est directement proportionnelle à la longueur du trajet optique des cuves et à la concentration de l'échantillon. La sélection d'une longueur de trajet optique idéale (par exemple comprise entre 1 mm et 5 cm) permet d'éliminer l'étape de la dilution. Une absorbance comprise entre 0,2 A et 1,5 A génère les résultats les plus précis. Un instrument à microvolume présentant une longueur de trajet optique très courte (1 mm ou 0,1 mm) constitue la solution idéale pour les échantillons fortement concentrés.
Selon les meilleures pratiques de mesure, il convient de laisser la cuve sur son support entre les mesures. Si vous la retirez, vous devez veiller à toujours positionner la cuve dans le même sens dans le support, c'est-à-dire l'étiquette dirigée vers la source de lumière. Vous avez ainsi l'assurance que les effets optiques seront identiques pour les mesures de l'échantillon et du matériau de référence.
Pour de meilleurs résultats, les mesures de l'échantillon et du matériau de référence doivent être réalisées à l'aide du même type de cuve.
Les cuves doivent être pourvues de fenêtres fabriquées dans une matière transparente dans la région spectrale d'intérêt.
Pour de meilleurs résultats de mesure dans la plage UV, il faut utiliser du verre transparent aux UV, comme du verre de quartz ou du verre SUPRASIL®.
SUPRASIL® est une marque de Heraeus (verre de quartz)
Des cuves en verre optique ou des cuves jetables en PMMA (polyméthacrylate de méthyle) ou en PS (polystyrène) sont souvent utilisées pour la plage de la lumière visible (> 400 nm).
Les cuves jetables en polyméthacrylate de méthyle absorbent dans la plage UV et agissent comme un filtre de coupure, nuisant à la précision des mesures dans la plage UV. C'est pourquoi elles doivent être réservées aux mesures dans la plage visible.
Mélangez l'échantillon bien avant utilisation, en particulier dans le cas de remise en suspension d'acides nucléiques ou de protéines. Évitez d'utiliser des pipettes en verre pour remplir la cuve, car elles peuvent rayer la surface optique. Les pipettes avec cônes en plastique jetables sont idéales. Faites couler la solution sur la paroi en verre de la cuve pour éviter toute formation de bulles. Ne remplissez pas la cuve à plus de 80 % de sa contenance.
Les fenêtres de la cuve, par lesquelles la lumière passe, doivent être nettoyées avant chaque utilisation. Pour un nettoyage interne et externe complet, utilisez une solution d'eau et d'isopropanol à 60 %, puis essuyez avec un chiffon de nettoyage optique ou du papier absorbant non pelucheux (afin d'éviter de rayer la surface).
Les cuves doivent être nettoyées soigneusement avant et après chaque utilisation pour éviter une hausse de l'absorbance. Au terme du nettoyage, il faut bien veiller à ne pas toucher la fenêtre. L'échantillon doit être retiré juste après la mesure pour empêcher que les solvants n'endommagent la cuve au cours de leur évaporation.
Une hausse de l'absorbance peut être constatée lorsque des résidus, comme des empreintes digitales ou de la graisse, qui constituent des composants absorbants supplémentaires, se déposent sur la fenêtre de la cuve. Un nettoyage rigoureux avant et après utilisation permet d'éviter cet effet indésirable. Au terme du nettoyage, il faut bien veiller à ne pas toucher la fenêtre.
Maintenez les cuves uniquement par les côtés dépolis et assurez-vous de ne pas laisser d'empreintes digitales sur la cuve.
Positionnez la cuve en dirigeant le côté transparent vers le faisceau de lumière. Assurez-vous que l'étiquette de la cuve contenant le blanc et l'échantillon soit dans la même direction. Veillez à ce que la cuve ne soit pas inclinée et qu'elle soit parfaitement fixée au support. La cuve ne doit plus bouger.
Afin de limiter l'évaporation de solvant ou l'absorption de l'eau de l'air ambiant en cas d'échantillons hydrophiles, utilisez le couvercle normalement fourni avec la cuve.
Les cellules à circulation doivent toujours être entièrement vidées au terme d'une série de mesures. Afin d'éviter la calcification de la fenêtre optique, il faut rincer l'intérieur de la cellule à circulation avec de l'acétone et la sécher complètement pour éliminer tout résidu d'acétone.
Des supports à cuves spéciaux sont proposés pour les stocker à court terme. Pour un stockage prolongé, il faut utiliser le coffret livré pour éviter les rayures ou dépôts de poussière sur la surface en verre.
Selon les meilleures pratiques de mesure, il convient de laisser la cuve sur son support entre les mesures. Si vous la retirez, vous devez veiller à toujours positionner la cuve dans le même sens dans le support, c'est-à-dire l'étiquette dirigée vers la source de lumière. Vous avez ainsi l'assurance que les effets optiques seront identiques pour les mesures de l'échantillon et du matériau de référence. Grâce aux tolérances de fabrication très strictes des cuves Excellence de METTLER TOLEDO, il n'est pas nécessaire de respecter cette orientation, car les différences d'absorbance sont marginales à 180 degrés.
La présence de résidus, comme des empreintes digitales ou de la graisse, qui constituent des composants absorbants supplémentaires sur la fenêtre de la cuve entraîne une hausse de l'absorbance mesurée. Un nettoyage rigoureux avant et après utilisation permet d'éviter cet effet indésirable. Au terme du nettoyage, il faut bien veiller à ne pas toucher la fenêtre.
Une cuve est un petit tube rectangulaire destiné à contenir des échantillons aqueux. Elle dispose de parois droites fabriquées dans un matériau transparent. Elles sont aussi appelées cellules ou capillaires. Les cuves sont utilisées dans les mesures spectrophotométriques pour déterminer l'absorbance d'une longueur d'onde spécifique.
Si une cuve présente des rayures ou de petites fissures sur le côté poli, elle ne doit plus être utilisée pour réaliser des mesures, sous peine de compromettre le résultat ou de voir la cuve se briser à l'intérieur du spectrophotomètre. L'utilisation de matières en résine pour réparer ou recoller la cuve risque de nuire à la qualité des mesures. Par conséquent, il n'est pas recommandé de réparer une cuve endommagée.
Une cuve de blanc est utilisée pour étalonner les lectures du spectrophotomètre avant de mesurer une solution inconnue. Le spectrographe s'appuie sur la cuve de blanc pour la lecture. Certains facteurs environnementaux, tels que la poussière, la température et l'humidité, peuvent avoir un effet sur la lecture. Afin d'éliminer tous les facteurs externes, les lectures de la cuve de blanc réalisées par le spectrographe sont soustraites des lectures de la cuve de solution échantillon.
Verre optique METTLER TOLEDO : longueur d'onde de 320 à 2 500 nm ; taux de transmission > 80 % ; réutilisable ; spectre visible
Verre en quartz METTLER TOLEDO : longueur d'onde de 200 à 2 500 nm ; taux de transmission > 82 % ; réutilisable ; spectre UV-visible
La contenance la plus courante d'une macrocuve standard de 10 mm est 3,5 ml (3 500 µL). Le volume d'une cuve se calcule facilement : longueur interne x largeur interne x hauteur interne x 80 % = volume de la cuve
Une paire de cuves appariées est constituée de deux cuves qui sont fabriquées dans la même matière et présentent la même longueur de trajet optique. En raison des tolérances de fabrication, les paires appariées garantissent des mesures comparables. Les cuves Excellence de METTLER TOLEDO offrent des tolérances de fabrication de seulement ± 0,01 mm et ne nécessitent donc pas d'appariement.