细胞活性结果在很大程度上取决于所使用的测量方法。METTLER TOLEDO 新发布的一份白皮书比较了 CytoDirect、流式细胞术和台盼蓝染色在五种细胞模型中的表现。数据显示，使用 CytoDirect 进行的无染色细胞活性检测与流式细胞术结果高度一致；流式细胞术是检测凋亡和坏死的参考技术。
下载白皮书，查看完整比较，并判断无染色工作流程是否适合您的实验室。
流式细胞术仍是检测细胞样本中细胞凋亡与坏死的参比金标准。但该方法设备昂贵、染色流程耗时较长，且需要专业人员操作并正确解读结果。即便实验室认可其检测精度，上述短板也限制了它用于日常常规检测。
台盼蓝排斥法解决了成本与检测速度的难题，凭借操作简便，在各类普通实验室与检测机构中得到广泛应用。但该方法存在已知缺陷：利用血球计数板人工计数无法识别早期凋亡细胞。在样本进入后续研究前的关键节点，这一短板会直接影响细胞活力数据的准确性。
该白皮书采用 5 种实验模型，将 CytoDirect 与两种参比方法进行比对，每种模型分别模拟不同的实际实验场景。研究人员使用星形孢菌素处理 HeLa 细胞与 Jurkat 细胞以诱导细胞凋亡；星形孢菌素是研究成熟的细胞毒性试剂，被广泛应用于凋亡相关研究。实验还对 HeLa 细胞进行紫外辐照处理，紫外属于非化学类应激源，会引发异质性更强的细胞应答；同时对分离后不同时间点的新鲜外周血单个核细胞与冻存复苏后的外周血单个核细胞开展对照测试。
每套模型设置固定活细胞 / 死细胞比例：0:100、50:50、100:0。该实验设计能够评估各检测方法在低活力、中等活力与高活力样本中的表现，而不只是在差异容易被掩盖的极端条件下进行验证。
结果显示，在所有测试模型中，CytoDirect 与流式细胞术的结果高度一致：
经 staurosporine 处理的 HeLa 细胞：CytoDirect 评估的存活率为 87%，流式细胞术为 91%
经 staurosporine 处理的 Jurkat 细胞：96% 对 97%
经紫外线照射后的 HeLa 细胞：92% 对 93%
解冻后 24 小时测量的 PBMC：89% 对 86%
在这些相同样本中，台盼蓝与参考方法相比的差异更大。对于存活率较低的样本，例如完全凋亡的 Jurkat 细胞，它往往会低估存活率；而在 PBMC 模型中逐渐细胞衰减的过程中，它则倾向于高估存活率。
CytoDirect 依托数字全息显微技术结合机器学习算法实现检测，无需染色剂，也不需要人工设门。仪器直接分析样本，依据细胞自身的形态学与生物物理特征完成判定，而非依靠荧光标记物。
这种免染色方案省去了流式细胞术中耗时的染色与设门操作，同时摒弃了制约台盼蓝法灵敏度的人工计数步骤。本研究中每份样本均做三次重复检测，取平均值输出结果，使该方法具备可用于日常实验流程的稳定重复性。
对于开展常规活力检测的实验室，免染色细胞活力检测能够达到流式细胞术级别的数据可信度，同时无需高昂成本、漫长等待以及专职操作人员。该优势在综合实验室与检测机构中尤为重要，这类实验室样本量大，检测周转时间会影响整个实验链条。
对于使用外周血单个核细胞（PBMC）等原代细胞的实验室，该技术对早期凋亡事件具备更高检测灵敏度，可以在样本质量问题干扰下游实验前完成评估。捕捉到早期异常信号，能够及时调整样本使用方案，避免事后才发现问题。
细胞活力数据的可靠性完全取决于检测方法本身。这份白皮书完整展示了 CytoDirect 的全部实验数据，包含 HeLa 细胞、Jurkat 细胞以及外周血单个核细胞的检测结果，同时附上生成各组数据所用的散点图与活力判定阈值。您可以直观对比该方法与实验室现有可靠设备的实际表现。
