Spectroscopie Questions et réponses
Expertise

Spectroscopie UV/VIS

Expertise

Toutes les réponses à vos questions concernant la Spectroscopie.

Le Spectrophotomètre UV/VIS Excellence METTLER TOLEDO offre des solutions pour tous vos besoins de spectroscopie. En plus de son design compact et de sa performance remarquable, la technologie FastTrack™ permet des mesures rapides et fiables qui peuvent être effectuées directement à partir de l'écran d'accueil du spectrophotomètre.

La fonctionnalité Plug&Play permet aux spectrophotomètres UV/VIS METTLER TOLEDO d'être facilement installés et prêts à l'emploi en quelques secondes.

Questions fréquentes :

Qu'est-ce que la Spectroscopie UV/VIS ?

La spectroscopie UV/VIS est une technique simple et couramment utilisée basée sur l'absorption de la lumière dans un échantillon donné. En fonction de la quantité de lumière et de la longueur d'onde absorbée par l'échantillon, des informations précieuses peuvent être obtenues, telles que la concentration ou la pureté d'un échantillon. De plus, comme chaque substance absorbe la lumière d'une manière différente, il existe une relation unique et spécifique entre la substance et son spectre UV/VIS. Le spectre peut ensuite être utilisé pour identifier une substance.

Comment fonctionne un spectrophotomètre UV/VIS ?

Un spectrophotomètre UV/VIS mesure l'intensité de la lumière traversant une solution d'échantillon dans une cuvette et la compare à l'intensité de la lumière émise avant de traverser l'échantillon. Les principaux composants d'un spectrophotomètre UV/VIS sont une source de lumière, un porte-échantillon, un dispositif dispersif pour séparer les différentes longueurs d'onde de la lumière, et un détecteur approprié.

Pourquoi les spectres UV/VIS sont-ils mesurés ?

Il y a cinq raisons principales pour lesquelles les spectres UV/VIS sont mesurés :

  • Les spectres UV/VIS identifient les composants présents dans une solution d'échantillon. Plus précisément, la position du pic, et dans une certaine mesure le profil de spectre permettant l'identification de composés spécifiques.
  • Des pics d'absorption peuvent être utilisés pour quantifier l'échantillon étudié. Par exemple, la concentration de l'échantillon peut être calculée à partir de la valeur d'absorbance du pic.
  • Un spectrophotomètre UV/VIS est basé sur la relation entre l'absorbance et la concentration de l'échantillon. Il est utilisé pour des techniques analytiques quantitatives dans des segments de marché tels que la biotechnologie, la pharmacie, la cosmétique, l'agroalimentaire, la chimie et l'analyse de l'eau.
  • Le spectre peut révéler des propriétés physiques spécifiques des molécules d'échantillon et permet de calculer le coefficient d'extinction de l'échantillon, calculer le point de fusion des protéines et des acides nucléiques en mesurant les spectres UV/VIS à différentes températures, et déterminer la vitesse de réaction en surveillant les spectres d'absorption en fonction du temps.
  • La position et le profil des pics dans le spectre peuvent donner des informations sur l'environnement microscopique des molécules de l'échantillon.

Quelles sont les applications d'un spectrophotomètre UV/VIS ?

  • La longueur d'onde fixe est l'application la plus simple d'un spectrophotomètre. Il s'agit d'une mesure de longueur d'onde unique ou multiple et le résultat peut être indiqué en absorbance ou transmittance.
  • La quantification ou la détermination de la concentration d'une substance par un spectrophotomètre UV/VIS est basée sur la loi Beer-Lambert qui stipule que l'absorbance d'une solution est directement proportionnelle à la concentration de la substance absorbante dans la solution et à la longueur du trajet de la cuvette. Ainsi, un spectrophotomètre UV/VIS peut être utilisé pour déterminer la concentration d'un échantillon
  • Les mesures de balayage spectral déterminent l'absorbance ou la transmittance d'un échantillon sur une gamme de longueurs d'onde spécifiée ou sur toute la gamme du spectre, typiquement de 190 à 1100nm. L'analyse la plus commune par la suite est la détection des pics et des vallées.
  • Un spectrophotomètre UV/VIS est souvent utilisé pour surveiller le changement de la concentration du réactif ou du produit en mesurant l'absorbance à une longueur d'onde spécifique au cours du temps. Ces méthodes cinétiques sont souvent utilisées pour étudier les vitesses de réactions enzymatiques ou pour déterminer la concentration de glucides spécifiques tels que le glucose, le fructose ou le lactose.

Quelles est la différence entre un spectrophotomètre à balayage et un spectrophotomètre à barrettes de diodes ?

  • Un instrument de spectroscopie à balayage prend beaucoup plus de temps car il mesure chaque longueur d'onde séparément. Un instrument à barrettes de diodes mesure le spectre complet dans un court laps de temps, car toutes les longueurs d'onde sont mesurées par le détecteur de matrice.
  • Un instrument à balayage mesure le spectre à l'aide d'éléments tournant mécaniquement. Cela peut entrainer des erreurs dans la reproductibilité de la longueur d'onde. Un instrument à balayage nécessite donc un réétalonnage régulier pour garantir la précision de la longueur d'onde. Un instrument à barrettes de diodes n'inclut pas aucune pièce optique en mouvement, ce qui signifie qu'il n'y a pas d'écarts de performance dans le temps dus à des imprécisions mécaniques.
  • Un instrument à barrettes de diodes ne nécessite pas de compartiment d'échantillon fermé parce qu'il est immunisé à la lumière ambiante en raison de sa conception optique.
  • Télécharger le livre blanc : " Barrette de diode contre balayage"

Dans quels secteurs de l'industrie un spectrophotomètre UV/VIS est-il utilisé ?

Notre portefeuille de spectrophotométrie a été conçu pour s'adapter à plusieurs segments de l'industrie :

  • Les spectrophotomètres UV5Bio et UV5Nano sont généralement utilisés dans les secteurs pharmaceutiques, les sciences de la vie, la biotechnologie et l'enseignement supérieur
  • Les spectrophotomètres UV7 et UV5 sont généralement utilisés dans les secteurs pharmaceutiques, agroalimentaire, chimique, cosmétique, pétrochimie et académique.

Qu'est-ce qu'un spectrophotomètre à micro-volume ?

Un spectrophotomètre à micro-volume effectue des mesures en utilisant de petits volumes d'échantillon (jusqu'à 1 microlitre). Des échantillons très concentrés peuvent également être mesurés sans dilution supplémentaires grâce à la technologie LockPath sur l'UV5Nano METTLER TOLEDO, qui peut définir la longueur du trajet à 0,1 ou 1mm.

Quelles applications des sciences de la vie sont disponibles sur un spectrophotomètre METTLER TOLEDO ?

  • Les spectrophotomètres UV5Nano et UV5Bio de METTLER TOLEDO offrent une vaste collection d'applications en sciences de la vie, telles que :
    • Analyse quantitative de l'ADN, de l'ARN et des protéines
    • BCA, Bradford, Lowry et d'autres dosages de protéines colorimétriques
    • Colorants préconfigurés et possibilité d'ajouter des colorants personnalisés
    • Calculateur Oligo pour la détermination de la concentration des oligos ADN et ARN
    • OD600 pour la culture cellulaire. De plus, les spectrophotomètres UV5Bio et UV7 offrent des méthodes de cinétique pour réaliser la cinétique enzymatique.
  • Pour plus d'informations sur les applications des Sciences de La Vie avec les spectrophotomètres METTLER TOLEDO

Comment puis-je vérifier que mon spectrophotomètre fonctionne correctement et est conforme aux normes de pharmacopée ?

Le CertiRef™ de METTLER TOLEDO est le moyen le plus efficace de vérifier si votre spectrophotomètre fonctionne correctement. Cet accessoire effectue automatiquement des tests pour la précision et la répétabilité de la longueur d'onde, la précision et la répétabilité photométrique, la résolution, la lumière parasite, le bruit photométrique et la dérive, ainsi que la régularité de base.

Comment mon spectrophotomètre bénéficie-t-il du logiciel LabX® ?

Le logiciel LabX de METTLER TOLEDO permet aux utilisateurs d'avoir une plus grande flexibilité en créant des workflows personnalisés pour les besoins de l'utilisateur. Les erreurs de calcul et de transcription sont complètement évitées. Il garantit également que toutes les données soient stockées en toute sécurité dans une base de données sécurisée, y compris toutes les vérifications et les services. Avec des fonctions de sécurité telles que les signatures électroniques et la gestion des utilisateurs, il aide à se conformer à la réglementation 21 CFR partie 11.

Thank you for visiting www.mt.com. We have tried to optimize your experience while on the site, but we noticed that you are using an older version of a web browser. We would like to let you know that some features on the site may not be available or may not work as nicely as they would on a newer browser version. If you would like to take full advantage of the site, please update your web browser to help improve your experience while browsing www.mt.com.