Pipetagem de 96 Poços para Identificação Precoce da Doença - METTLER TOLEDO

Pipetagem de 96 Poços para Identificação Precoce da Doença

Os pesquisadores desenvolveram recentemente um método mais preciso de identificação de certas doenças de depósito lisossômico em recém-nascidos. O Rainin Liquidator 96 acelera a preparação de amostras e garante alta precisão no diagnóstico destas doenças genéticas.

Doenças de depósito lisossômico (DDLs) são uma família de distúrbios com sintomas debilitantes de leves  a graves. Essas doenças geralmente são causadas pela mutação de proteínas que estão envolvidas no processamento lisossômico.  A  gravidade  dos  sintomas depende  de  quais  proteínas  sofrem  mutação, como  elas  sofrem a mutação,  os diferentes  fatores que controlam a expressão de genes e os fatores ambientais.

Existe muitas vezes um atraso no diagnóstico e tratamento de DDLs devido à sua apresentação variável e aos sintomas não específicos.

Diagnosticar DDLs com espectroscopia de massas em tandem

Em  um trabalho enviado ao  Periódico  de  Pediatria, intitulado "Identificação de Crianças com Risco de Desenvolver as Doenças de  Fabry e Pompe  ou Mucopolissacaridose-I  a partir de  Gotas de  Sangue de  Recém-nascidos por Espectrometria de Massas em Tandem”, de Scott et  al.,  os  autores  desenvolveram  um  método que  utiliza  espectrometria  de massas  para  rastrear  muitas  DDLs  em  paralelo.  Eles  primeiro recolheram  gotas de  sangue secas  de  recém-nascidos, nos  quais muitas  enzimas  lisossômicas  mantêm atividade, e  as  re-suspenderam  em um buffer  que continha  os substratos  apropriados  de enzima  para  as  enzimas cujos defeitos provocam a doença. Utilizando a  espectrometria de  massas  em tandem,  a equipe  pôde  distinguir  se  uma  determinada criança estava deficiente em alguma atividade de enzima  específica.  A depender  da  atividade  da  enzima  em  uma  dada  gota de sangue,  os autores analisaram  as sequências  de gene dos  recém-nascidos  para  confirmar  se  a baixa atividade  de enzima medida  no  ensaio  tinha relação  com  as mutações  na  mesma  enzima.  Scott  et  al.  descobriram  que  o seu método aumentou a probabilidade de detecção  das Doenças de  Fabry,  Pompe  e  mucopolissacaridose-I sobre aqueles de diagnóstico clínico padrão.

Liquidator 96o instrumento de escolha

As experiências exigiram  a  análise de mais  de  100.000  gotas de sangue.  Um  número  tão alto  de  amostras  exigiu  um processo de  preparação  de amostras  preciso  e  sistemático.  Pequenas  “punções”  de cada gota de sangue foram colocadas numa placa de 96 poços.  Usando o  Liquidator 96 da  METTLER  TOLEDO,  os  pesquisadores foram capazes  de adicionar  solução  de reação  enzimática,  supressão de reação e solventes de extração do produto à placa de forma rápida e precisa. Estas amostras  foram,  em seguida,  usadas  na  espectrometria de massas em tandem.

O  Liquidator 96  é  um  instrumento  de pipetagem  com 96 poços  para bancada  altamente exato e  preciso  que  não  requer  qualquer  energia elétrica  para  o funcionamento. Com  pipetagem de 96 canais ao mesmo tempo, o Liquidator 96  pode  acelerar  significativamente fluxos de trabalho experimentais  além do que  é possível  com  pipetas  monocanal e  multicanais.  Em  aplicações  em que o tempo é fundamental, como as reações enzimáticas, é de especial importância que a reação seja iniciada em todos os  96  poços  ao  mesmo  tempo.  O Liquidator  realiza  esta  tarefa  de forma simples e precisa  e  evita  o  risco  de  fileiras ignoradas,  um  cenário  comum  com  a pipetagem multicanais em placas de 96 poços.

Saiba mais sobre as aplicações do Liquidator 96 e faça o download dos white papers e das observações de aplicação