Pipettekontroll og pipettekalibrering

En pipette er et laboratorieredskap for transport av små mengder nøyaktig oppmålt væske gjennom aspirering og dispensering av prøven. I dag er de fleste pipetter stempelpipetter, som skaper et delvis vakuum over væsken for å aspirere væsken, og dermed unngår mekanisk kontakt.

Mer: Rainin pipetter

En pipette er kalibrert når det forventede volumet og det faktiske volumet som leveres av en pipette er fastsatt sammen med den tilhørende måleusikkerheten av en godkjent aktør. Formålet er å dokumentere om pipetten fortsatt gir presise resultater innenfor produksjons- eller ISO8655-spesifikasjonene. Hvis en pipette er utenfor toleransen, kan man ofte utføre service, justere og kalibrere den på nytt.
Mer: Rainin pipetteservice

Stempelpipetter brukes vanligvis innen kjemi, biologi, kliniske og medisinske områder, der man tar væskeprøver som ofte må transporteres i små og nøyaktige mengder for ytterligere fortynning, undersøkelse og analyse.

Her er noen vanlige pipetteringsteknikker samt feil ved bruk av stempelpipetter, og hvordan man unngår dem.

1. Feil nedsenkningsdybde
   Riktig nedsenkningsdybde kan forbedre presisjonen med opptil 5 %. Spissen skal senkes ned 1–2 mm for mikrovolumpipetter og opptil 3–6 mm for vanlige pipetter, avhengig av spissens størrelse. Hvis spissen senkes for langt ned, blir gassvolumet i spissen komprimert, slik at det aspireres for mye væske.
   
   
2. Feil pipettevinkel
   Vinkelen pipetten senkes ned i prøven med skal være mest mulig loddrett, og skal ikke avvike mer enn 20 grader fra loddrett. En mer horisontal vinkel fører til at for mye væske trekkes inn i spissen, og gir unøyaktig aspirering. Ved en vinkel på f.eks. 30 grader fra loddrett kan opptil 0,7 % for mye væske bli aspirert.
   
   
3. Inkonsekvent dispensering
   Man kan oppnå bedre nøyaktighet og mer reproduserbare prøver ved å sikre at den siste dråpen dispenseres fullstendig, og ikke henger igjen i spissen. For de fleste bruksområder anbefales det å dispensere med enden av spissen mot veggen på beholderen, siden det reduserer eliminerer mengden av prøven som blir igjen i spissen. Denne teknikken kan øke nøyaktigheten med 1 % eller mer.
   
   
4. Manglende forskylling
   Ved dispensering av væske fra en pipette etterlates et væskebelegg på tuppen, slik at volumet som presses ut blir noe mindre enn det skal være. En ny spiss kan kondisjoneres ved å skylle den minst to ganger med væsken som skal brukes.
   
   
5. Inkonsekvent pipetteringsrytme
   Bruk en konsistent pipetteringsrytme fra prøve til prøve. Unngå hastverk eller rask betjening, og finn en rytme for hvert trinn i pipetteringssyklusen.
   
   Mer: Good Pipetting Practice

Pipettens nøyaktighet skal kontrolleres regelmessig mellom kalibreringer for å unngå resultater utenfor toleranseområdet. Pipetten kontrolleres ved å dispensere minst det nominelle volumet i et beger på en nøyaktig analysebalansevekt minst 4–6 ganger, der gjennomsnittsvolum og avvik kan beregnes med ISO8655-formlene. Balansevekter med innebygd program eller PC-programvare kan gi godkjent eller ikke godkjent resultat automatisk på noen sekunder.

Mer: Pipettekontroll

Pipettens nøyaktighet skal kontrolleres regelmessig mellom kalibreringer for å unngå resultater utenfor toleranseområdet. Pipetten kontrolleres ved å dispensere minst det nominelle volumet i et beger på en nøyaktig analysebalansevekt minst 4–6 ganger, der gjennomsnittsvolum og avvik kan beregnes med ISO8655-formlene. Balansevekter med innebygd program eller PC-programvare kan gi godkjent eller ikke godkjent resultat automatisk på noen sekunder.  

En pipettekalibrering viser forskjellen mellom forventet og faktisk volum, som skal være innenfor en gitt toleranse. Hvis den er utenfor toleransen, kan det føre til uriktig fortynning og til slutt uriktige analyseresultater. Konsekvensen er at resultatene ikke kan reproduseres, og hele analysen må utføres på nytt. For å påvise pipetter som er utenfor toleransene tidlig, anbefales det å kontrollere pipettenes nøyaktighet også mellom kalibreringer for å unngå at toleranseavviket først blir oppdaget ved neste kalibrering.

Ved pipettekalibrering blir det forventede volumet og det faktiske volumet som leveres av en pipette fastsatt sammen med den tilhørende måleusikkerheten av en godkjent aktør. Formålet er å dokumentere om pipetten fortsatt gir presise resultater innenfor produksjons- eller ISO8655-spesifikasjonene. Hvis en pipette er utenfor toleransen, kan man ofte utføre service, justere og kalibrere den på nytt.

Se alltid produsentens bruksanvisning før rengjøringen påbegynnes. Materialenes bestandighet varierer fra merke til merke. Stempelpipetter må demonteres for god rengjøring. Spissejektorarmen og sylinderen kan ofte enkelt skrus løs for hånd for å åpne pipetten. Vær forsiktig: Fjærtrykket kan føre til at deler spretter ut. Delene kan vanligvis rengjøres med en klut som er lett fuktet med mild såpe og destillert vann, eller med en oppløsning av isopropylalkohol eller etanol. Unngå at væske kommer inn i skaftet, også under pipettering, for å unngå forurensning av stempelet og tetningen. Se bruksanvisningen for å se om sterilisering og autoklavering kan utføres, og i så fall hvordan det gjøres for den aktuelle pipettemodellen. Etter rengjøring skal det kontrolleres om pipetten er innenfor toleransen. En pipetteservicetekniker foretar vanligvis en kalibrering etter service, for å kontrollere og bekrefte at pipetten er innenfor toleransen.